基于“脾為本虛”理論探討左歸復(fù)方對(duì)2型糖尿病小鼠腸道炎癥及黏膜屏障的影響①

向 琴 蔣宛瑾 喻 嶸 鄒曉玲 吳勇軍 劉 秀 劉子毓

(湖南中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)沙 410208)

據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟(International Diabetes Federation,IDF)2017年報(bào)道，中國(guó)大陸20～79歲糖尿病患者數(shù)量為1.144億，位居全球第一。2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)約占糖尿病發(fā)病人數(shù)的95%[1,2]。T2DM因其并發(fā)癥多、預(yù)后差，嚴(yán)重影響患者身心健康。胰島素抵抗和胰島素分泌不足是T2DM發(fā)病的重要病理生理機(jī)制，而全身慢性低度炎癥是引發(fā)胰島素抵抗的重要原因。越來(lái)越多的研究證明，腸道免疫-慢性炎癥在代謝性疾病發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色[3,4]。

中醫(yī)藥防治T2DM有著多靶點(diǎn)、整體調(diào)節(jié)的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。研究表明，中醫(yī)藥在改善糖脂代謝、胰島素抵抗和減輕全身慢性低度炎癥方面療效顯著[5-7]。近幾年來(lái)，中醫(yī)藥從調(diào)節(jié)腸道黏膜免疫防治T2DM也屢見(jiàn)不鮮[8,9]。左歸復(fù)方為明代著名醫(yī)家張景岳的左歸丸加減化裁而成，根據(jù)T2DM發(fā)病前期“以虛為本”的病機(jī)理論，主以健脾益氣，滋陰養(yǎng)腎。前期研究表明，左歸復(fù)方能降低T2DM小鼠血糖和炎癥因子[10,11]，對(duì)糖脂代謝具有調(diào)控作用，且多靶點(diǎn)[12,13]；能明顯改善“脾腎陰虛”的證候，但治療本虛的機(jī)制尚未明確。本研究以轉(zhuǎn)基因2型糖尿病MKR鼠為研究對(duì)象，通過(guò)觀察血糖、胰島素水平，檢測(cè)血清中內(nèi)毒素(lipopolysaccharide,LPS)和炎癥相關(guān)因子IL-1β、IL-6、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量并檢測(cè)小鼠結(jié)腸組織緊密連接蛋白及炎癥信號(hào)通路關(guān)鍵因子的表達(dá)水平，探討2型糖尿病“脾為本虛”的理論機(jī)制及左歸復(fù)方的干預(yù)作用，為中醫(yī)理論提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，為左歸復(fù)方防治T2DM提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1動(dòng)物 MKR小鼠由美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院授權(quán)使用引進(jìn)，是采用組織特異性過(guò)度表達(dá)轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的骨骼肌胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體缺失的非肥胖型2型糖尿病小鼠，經(jīng)自然交配后繁殖的子代用于實(shí)驗(yàn)觀察。……