間充質干細胞移植對丙烯酰胺中毒大鼠周圍神經病的治療研究①

楊敏慧 劉愛群 向光紅 李金海

(中南大學湘雅醫學院附屬海口醫院神經內科，海口 570208)

周圍神經主要是指嗅覺、視覺神經以外的腦神經和脊神經、自主神經及其神經節[1]。而周圍神經病變(peripheral neuropathy,PN)主要是指原發于周圍神經系統結構或功能損害的疾病，主要表現為運動、感覺和自主神經癥狀的減弱或者消失[2,3]。丙烯酰胺是一類神經毒性的有機試劑，常用于工業生產和實驗研究過程中。持續性接觸丙烯酰胺會導致慢性中毒，臨床主要表現為周圍神經病變[4,5]。間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSC)是一類具有自我復制能力和多向分化潛能的成體干細胞，研究證實間充質干細胞可以發育為成骨細胞、軟骨細胞、肌肉細胞、神經元細胞、神經膠質細胞以及內皮細胞等，間充質干細胞具有免疫原性低的特點，容易分離培養和遺傳背景穩定等優點[6,7]。本研究分析了間充質干細胞對丙烯酰胺中毒性大鼠周圍神經的影響以及作用機理，旨在為丙烯酰胺類試劑引起的周圍神經疾病的治療提供一定的理論依據。

1 材料與方法

1.1材料 65只雌性SD大鼠，SPF級，4月齡，體質量(200.0±10.5)g，購自北京維通利華實驗動物有限責任公司，所有大鼠自由攝食飲水，相對溫度(26±5)℃，相對濕度(50±10)%，適應性飼養1周后進行試驗；丙烯酰胺(美國Sigma公司，批號：18099)；α-MEM培養基、胎牛血清和胰酶均購自Thermofisher公司(批號分別為17561、237B1和1834E)；鼠抗人FITC-CD45、FITC-CD90、PE-CD105、PE-CD34、PE-CD73、PE-HLA-DR單克隆抗體、FITC-IgG1和PE-IgG1同型對照單克隆抗體均購自美國R&D公司(批號分別為A1231、A172、1717、1721、1745、1862、1854和1834E)。VEGF小鼠單克隆抗體、NGF單克隆抗體和多克隆抗體和GDNF單克隆抗體購自美國Santa Cruz公司(批號分別為C321、3E2W和3907)；……