miR-34a通過靶向SIRT1對MPP+誘導的帕金森病模型細胞凋亡和氧化應激損傷的影響①

劉金泉 孫永勝 劉春云

(山西大同大學神經病學與精神病學教研室，大同 037009 )

微小RNAs(miRNAs)是一類長度通常為22～30 nt的小分子RNA，通過降解靶基因或抑制靶基因翻譯調控轉錄后的基因表達，被證實在帕金森病(parkinson′s disease,PD)神經細胞凋亡和氧化應激等過程中發揮著重要作用[1-3]。1-甲基-4-苯基吡啶離子(MPP+)是一種可引起神經細胞氧化應激損傷和細胞凋亡的神經毒，常被作為帕金森病細胞模型的誘導劑[4，5]。近年來，有研究顯示，在MPP+誘導的帕金森病細胞模型中miR-34a表達上調，且miR-34a與PD神經細胞凋亡和氧化應激損傷密切相關[6，7]，但其具體的調控機制尚不完全清楚。沉默信息調控因子1(SIRT1)是一種組蛋白去乙?；福哂袩燉０废汆堰识塑账嵋蕾囆悦撘阴Ｃ富钚?，被認為在PD發病過程中具有神經保護的作用[8]。本研究通過生物信息學軟件預測發現，miR-34a與SIRT1 3′-非編碼區存在互補的核苷酸序列，猜測miR-34a可能通過靶向調控SIRT1表達影響PD神經細胞凋亡和氧化應激反應。因此，本研究以人神經母細胞瘤SH-SY5Y為研究對象，構建MPP+誘導的PD細胞模型，擬探討miR-34a低表達能否通過靶向SIRT1抑制MPP+誘導的SH-SY5Y細胞凋亡和氧化應激損傷。

1 材料與方法

1.1材料 人神經母細胞瘤株SH-SY5Y購于廣州中山大學細胞庫。兔抗人SIRT1和甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)多克隆抗體購于美國Santa Cruz公司，MPP+、噻唑藍(MTT)和二甲基亞砜購于美國Sigma公司，青鏈霉素混合液購于北京索萊寶公司，胎牛血清、胰蛋白酶和DMEM/F12培養基購于美國Gibco公司，乳酸脫氫酶(LDH)活性檢測試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑……