微滴數字PCR和Super-ARMS檢測晚期肺腺癌患者血漿循環腫瘤DNA表皮生長因子受體基因突變的臨床價值研究

曹喆 王靜 秦娜 李琨 呂嘉林 王敬慧 楊新杰 李曦 張卉 張權 龍洪清 舒誠榮 馬麗 張樹才

表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor,EGFR）基因突變狀態對晚期肺腺癌患者合理選擇靶向藥物至關重要。由于心肺功能差，無法取材、取材組織少或為壞死組織、病變位置特殊或質地堅韌活檢鉗不易著位等原因，晚期肺腺癌患者在初治或進展后組織標本基因檢測困難。2018版中國非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）血液EGFR檢測專家共識指出，外周血可作為檢測EGFR基因突變的標本。現階段臨床常用Super-擴增阻滯突變系統（amplification refractory mutation system, ARMS）法來檢測外周血游離腫瘤DNA的EGFR基因突變，其具有操作方便、費時少等優勢，然而其靈敏度有待提高[1]。當血液標本中EGFR基因突變的豐度較低時，會造成一定的假陰性，使一部分患者EGFR基因突變被漏檢。多項研究表明微滴數字PCR（droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR）在檢測循環腫瘤脫氧核糖核酸（circulating tumor DNA, ctDNA）時靈敏度可以達到0.01%，高于Super-ARMS法0.2%的靈敏度[2-4]。

本研究通過ddPCR法和Super-ARMS法檢測119例晚期肺腺癌患者血液標本EGFR基因突變狀況，分析比較ddPCR和Super-ARMS技術檢測血漿ctDNAEGFR基因突變的敏感度、特異度，結合EGFR酪氨酸激酶抑制劑（tyrosine kinase inhibitors, TKI）藥物療效分析，為臨床選擇更佳的EGFR基因突變檢測方法提供依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集2016年2月-2019年2月首都醫科大學附屬北京胸科醫院確診的初治晚期肺腺癌癌患者119例。入選標準：（1）病理確診為肺腺癌；（2）臨床分期IIIb期-IV期（根據第8版TNM分期）；（3）應用一代EGFR-TKI治療前有充足的血液標本用于本研究，不干預臨床實踐；（4）EGFR敏感突變的患者接受EGFR-TKI藥物口服治療；（5）有完整的臨床病理信息，包括吸煙、性別、年齡等。……