口腔鱗狀細胞癌穩定過表達蛋白酶體激活因子PA28γ細胞株的構建

辛川 王冏珂 李敬 曾昕

口腔疾病研究國家重點實驗室 國家口腔疾病臨床醫學研究中心四川大學華西口腔醫院黏膜病科，成都 610041

頭頸部癌癥是第六大最常見的癌癥類型，其中90%是鱗狀細胞癌[1]?？谇击[狀細胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）是最常見的頭頸部鱗狀細胞癌，估計全世界每年有35萬例新發病者和17萬人因此死亡[2]。其中男性發病率比女性高得多[3]。盡管近年在診斷和治療方面取得了進展，但疾病復發仍然很常見，5年生存率不超過50%[4]。

PA28γ（又稱REGγ、11Sγ、PSME3）最早在系統性紅斑狼瘡患者體內發現并且命名為Ki抗原，之后的研究[5]表明其屬于PA28家族，是一種與非泛素化和非ATP依賴的降解蛋白質密切相關的蛋白酶體激活因子。已發現PA28γ在甲狀腺、結腸、肝臟、肺、卵巢、腎細胞癌和胃癌等多種不同類型的癌癥中均有過表達[6-8]。課題組前期采用差異蛋白組學分析，篩選出52種蛋白在OSCC組織中的表達水平與正常組織有顯著差異，其中一種蛋白是PA28家族蛋白，其生物功能和相互作用網絡分析表明該家族蛋白PA28γ可能在癌變中起重要作用[6,9]。并應用免疫組織化學方法檢測了3個獨立隊列共368例OSCC組織中PA28γ的表達水平，發現其中179個OSCC組織的PA28γ高表達，且PA28γ高表達與較低的總存活率密切相關，隨后TCGA數據庫印證了該結果[9]。因此，本研究建立了PA28γ穩定過表達OSCC細胞株，并鑒定其過表達PA28γ的效率，為深入研究PA28γ對口腔癌發生發展過程的影響及探究其分子機制提供準備。

1 材料和方法

1.1 細胞株、質粒、菌株及主要試劑

人OSCC細胞系HSC-3細胞、293T細……