薛亞軍 杜雅彥 黃文華 耿 濤 魏育濤 胡建明
(新疆石河子大學醫(yī)學院,石河子832000)
食管癌居世界癌癥死亡病因的第6位,我國食管癌發(fā)病率和死亡病例均占全球的50%和發(fā)展中國家的60%,是居民的重要疾病負擔,侵襲和轉(zhuǎn)移是導致患者治療失敗和死亡的主要原因[1]。針對食管癌侵襲轉(zhuǎn)移的途徑進行研究,抑制食管癌的侵襲轉(zhuǎn)移是提高食管癌生存期的關(guān)鍵[2]。微小RNA(miRNAs)是一類在生物體內(nèi)普遍存在的單鏈非編碼蛋白質(zhì)小分子RNA,主要功能是調(diào)控生物體生長、發(fā)育、分化和凋亡等生命過程中的相關(guān)基因表達,在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用[3]。miR-143-3p是高度保守的miRNA,位于人5號染色體33位,是腫瘤生長的潛在調(diào)控因子,異常表達與子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、膀胱癌、大腸癌等多種癌癥的發(fā)生、發(fā)展有關(guān),但其在食管癌增殖、遷移和侵襲中的作用尚未見報道[4,5]。本研究通過采用將miRNA-143-3p擬似物和阻遏物轉(zhuǎn)染食管癌ECA109細胞,探討miRNA-143-3p對食管癌ECA109細胞增殖、遷移、侵襲的影響。
1.1材料
1.1.1細胞株和實驗動物 人食管癌ECA109細胞株由本院腫瘤研究中心提供,采用含10%新生牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液,37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),隔日更換培養(yǎng)液。SPF級BALB/c裸鼠36只,3~4周齡,體質(zhì)量14~17 g,購于山東大學實驗動物中心,恒溫、恒濕飼養(yǎng),采用隨機數(shù)字表法將動物分為4組即空白組、陰性組、擬似組和阻遏組。
1.1.2試劑與儀器 胎牛血清、0.25%胰蛋白酶購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司;Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑購自北京義翹神州科技有限公司;Trizol購自上海聯(lián)碩生物科技有限公司;……