miR-296-5p靶向MICB促進(jìn)口腔鱗癌生長的分子機(jī)制①

王藜篥 張 濤 金 珊 周祥文 王 青 姚雨彤 楊扉扉

(貴州省骨科醫(yī)院，貴陽550004)

MHCⅠ類相關(guān)蛋白(Major histocompatibility complex,MHC)包括主要組織相容性蛋白A/B (MICA/B)，均位于6號染色體，由3個胞外區(qū)、1個跨膜區(qū)、1個胞質(zhì)尾區(qū)構(gòu)成[1，2]。MICA/B主要存在于上皮細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜，也有少量研究報道其主要位于細(xì)胞質(zhì)，極少部分位于癌細(xì)胞膜[3]。MICA/B可通過與NK 細(xì)胞上自然殺傷細(xì)胞受體蛋白2D (Natural killer cell receptor protein 2D,NKG2D)結(jié)合活化效應(yīng)細(xì)胞，參與抗感染、抗腫瘤、移植排斥、自身免疫及腫瘤的免疫逃避作用[4]。2007年馬烽等[5]報道，MICB(Major Histocompati-bility complex classⅠ-related chain B)是NK細(xì)胞活化受體NKG2D的配基，可在應(yīng)激作用下與NKG2D作用，在NK細(xì)胞對病毒感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的殺傷中具有重要的作用。MICB在多種癌癥中均參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展[6]，但其在口腔癌中的作用機(jī)制尚未十分清楚。miRNA可通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平控制細(xì)胞的生物學(xué)行為，其在癌癥中的作用已成為該領(lǐng)域的研究熱點[7]。miR-296-5p在很多癌癥中均發(fā)生異常表達(dá)，但其在口腔鱗癌的研究甚少[8]。本研究檢測口腔鱗癌組織中miR-296-5p、MICB的表達(dá)并采用口腔鱗癌細(xì)胞Cal27，觀察抑制miR-296-5p、過表達(dá)MICB、敲減MICB對口腔鱗癌細(xì)胞存活率、NK細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ含量的影響，揭示miR-296-5p可調(diào)控口腔鱗癌細(xì)胞的存活及NK細(xì)胞的殺傷能力，其機(jī)制可能與靶向MICB有關(guān)，可為口腔鱗癌的治療提供新靶點。

1 材料與方法

1.1材料 選取本院2017年2月至2018年6月期間外科手術(shù)切除的口腔鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本41例及癌旁組織標(biāo)本30例作為對照。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者及家屬均簽署知情同意書；口腔鱗癌細(xì)胞Cal27、NK細(xì)胞購自ATCC；DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清、5-二苯基四氮唑溴鹽、胰蛋白酶均購自美國Gibco公司；……