張 剛 余 瓊 杜 娟
(江漢大學附屬醫院武漢市第六醫院消化內科,武漢430015)
胃癌是發生于消化系統的惡性腫瘤,其在世界范圍內影響著人類的生命健康,胃癌具有轉移快、早期發病隱匿等特點,多數患者在發現時已經處于胃癌晚期且已經發生了轉移,胃癌轉移是胃癌致死的重要原因之一[1]。延齡草屬于百合科植物,是傳統中藥之一,具有延年益壽、祛風活血等作用[2]。最近的研究表明,延齡草總皂苷具有抗腫瘤作用,目前在宮頸癌、結直腸癌等腫瘤細胞中已經驗證其具有體外抑制腫瘤細胞生長和轉移的作用,延齡草總皂苷對胃癌細胞侵襲和遷移作用尚不明確[3,4]。IL-6/STAT3信號是與腫瘤轉移有關的調節因子,IL-6表達上調可以誘導STAT3發生磷酸化,促進腫瘤細胞侵襲、遷移和EMT[5]。我們的實驗以明確延齡草總皂苷對胃癌細胞侵襲遷移的作用和機制為目的,為延齡草總皂苷治療腫瘤的臨床應用提供參考依據。
1.1材料 胃癌細胞SGC-7901購自美國ATCC;MMP-2抗體、STAT3抗體、MMP-9抗體購自美國Sigma;延齡草總皂苷由湖北大學中藥生物技術實驗室提取保存;E-cadherin抗體、IL-6抗體購自美國Abcam;Vimentin抗體、p-STAT3抗體購自美國R&D Systems;IL-6重組慢病毒和陰性對照慢病毒由上海吉凱基因化學技術有限公司構建。
1.2方法
1.2.1CCK-8檢測延齡草總皂苷對胃癌細胞增殖影響 胃癌細胞經過計數之后按照3 000個/孔接種到96孔板內,將細胞按照0、10、20、40、80、160 mg/L的延齡草總皂苷作用濃度梯度分組,放在培養箱內孵育48 h,取出培養板,添加CCK-8溶液10 μl,在避光中反應2 h。測定酶標儀波長470 nm 的A值。……