利用DMF溶解順鉑制備的DDP/PLA膜對口腔癌CAL-27細胞增殖抑制作用研究

賈顏鴻,周 童,王欣琦,栗 達,郝秀峰,張澤兵*

(1.吉林大學口腔醫院,吉林 長春130021；2.吉林大學化學院)

靜電紡絲技術所制備的納米纖維膜具有優良的載藥性能，廣泛應用于抗生素、抗腫瘤藥物和生物大分子等控制釋放中[1]。本課題組在前期工作中，以H2O/CHCl3作為溶劑制備載順鉑(DDP)聚乳酸(PLA)靜電紡絲膜(DDP/PLA膜)，并作用于口腔鱗狀細胞癌細胞CAL-27細胞取得了很好的抑制效果[2]。但因順鉑在H2O中的溶解度小，導致DDP/PLA膜載藥量受到限制，影響對口腔癌細胞的抑制作用。本研究對該載藥體系加以改進，改用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)作為順鉑的溶劑，探討改進后的DDP/PLA膜的載藥效果及其對口腔癌CAL-27細胞的增殖抑制作用。

1 材料與方法

1.1 細胞、主要試劑和儀器

口腔鱗狀細胞癌CAL-27細胞株由上海交通大學附屬口腔醫學院陳萬濤教授惠贈。DMEM培養基、胎牛血清、胰蛋白酶消化液(以色列BI公司)、聚乳酸(PLA)(Mw≈150000)由吉林大學化學院提供，順鉑(DDP)(中國食品藥品檢定研究所)，N,N-二甲基甲酰胺(DMF)(天津天泰精細化學品有限公司)，噻唑藍(MTT)(美國中杉金橋公司)，牛血清白蛋白(BSA)(美國Sigma公司)，注射泵(型號：SPLab02，保定申辰泵業有限公司)，靜電發生器(型號：DW-P303-1ACFO，東文高壓電源(天津)有限公司)，掃描電鏡(型號：SU8020，HITACHI)，紫外分光光度計(日本島津公司)，酶標儀(型號：SynergyHT，美國Biotek公司)。

1.2 靜電紡絲納米纖維的制備

1.2.1紡絲液配制 將PLA溶解在氯仿中，分別配制成5%wt、6%wt、7%wt、8%wt、9%wt的溶液。超聲30分鐘后室溫攪拌直至聚乳酸全部溶解。加入體積分數為35%的無水乙醇，室溫攪拌至溶液澄清均勻。

稱取DDP使其與PLA質量比分別為1×10-3:1、2×10-3:1、3×10-3:1，并將其溶于1 ml DMF中配制成DDP溶液，將DDP溶液加入8%wtPLA溶液中，室溫攪拌至溶液澄清均勻。……