lncRNA MAGI2-AS3調控Fas/FasL通路抑制神經母細胞瘤的生長

黃垂名 張小波 彭小旅

(海南省人民醫院小兒外科，海口570100)

神經母細胞瘤是較為常見的神經系統惡性腫瘤，據統計我國每年發病兒童達上千例，且患病兒童常在晚期發現，患兒治療困難，預后差，嚴重影響患者的身心健康[1]。神經母細胞瘤中細胞的異常增殖與細胞侵襲是導致神經母細胞瘤患者死亡的主要原因，Fas/FasL通路在細胞的增殖、凋亡中發揮重要作用[2]。近年來隨著對腫瘤研究的深入，已經從編碼蛋白RNA層面逐漸延伸到非編碼RNA(lncRNA)。LNCRNs是一類長度超過200個核苷酸的內源性非編碼蛋白質RNA，其在胚胎發育、細胞增殖、細胞分化中發揮重要作用[3]。多項研究表明lncRNA的調控機制與腫瘤的發生、發展相關。lncRNA HOTAIR 在腫瘤的進展中發揮重要作用，其通過重組染色質促進癌轉移[4]；lncRNA TUG1過表達促進宮頸癌細胞增殖和遷移[5]。MAGI2-AS3是近年來新發現的lncRNA，其在乳腺癌中發揮重要作用[6]。但其在神經母細胞瘤中的研究鮮有報道，故本研究通過組織學和分子學機制探究lncRNA MAGI2-AS3在Fas/FasL通路中對神經母細胞瘤的調控作用。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 材料與儀器 人神經母細胞瘤細胞系SH-SY5Y、SK-N-SH均購自中國科學院。MAGI2-AS3慢病毒顆粒(LV-MAGI2-AS3)和對照慢病毒顆粒(LV-NC)購自上海GenePharma Bio。DMEM培養基(美國Thermo Fisher Scientific公司)，胎牛血清(FBS，美國Gibco-BR)，胰蛋白酶(美國Difo公司)，DMSO(美國Amresco公司)，Trizol試劑盒、RNA反轉錄試劑盒(中國大連TaKaRa公司)，SYBR Prime Script RT-PCR試劑盒(大連寶生物工程有限公司)，BCA蛋白試劑盒(上海碧云天生物技術有限公司)，PVDF微孔濾膜(美國Bio-Rad 公司)，β-肌動蛋白抗體(美國ABcam公司)，Fas抗體、FasL抗體(美國Proteintech公司)，二抗辣根過氧化物酶……