shRNA干擾BAMBI對非小細胞肺癌生長、侵襲和遷移的調控作用①

王學中 劉志廣 劉 平

(新鄉市中心醫院胸瘤一科，新鄉453003)

原發性肺癌是常見的惡性腫瘤之一，是發病率和死亡率最高的癌癥。據統計，全球每年新增肺癌病例約為180萬，死亡人數約為1.5萬。肺癌可以分為小細胞肺癌和非小細胞肺癌，其中非小細胞肺癌約占肺癌的80%～85%[1]。非小細胞肺癌病情發展迅速，轉移速度快，大部分患者在確診時已發展至中晚期，導致患者手術治療機會減少且術后復發率高[2,3]。由于非小細胞肺癌對放療和化療不敏感，使患者5年生存率低，處于Ⅲ期和Ⅳ期的患者5年生存率低于10%。為提高治療效果，增加患者生存時間，研究有效的治療手段有著重要的臨床意義。小發夾RNA(small hairpin RNA,shRNA)是序列特異性誘導細胞基因表達沉默的RNA干擾技術，具有抑制效率高、作用時間長的特點，廣泛用于基因功能、腫瘤治療的研究當中[4]。骨形成蛋白和激活素的穿膜抑制劑(Bone morphogenetic protein and activin membrane-bound inhibitor,BAMBI)是與轉化生長因子β家族1型受體相關的跨膜糖蛋白，參與多種與細胞發育和疾病相關的過程。研究發現過表達BAMBI能促進乳腺癌、胃癌、神經膠質瘤等多種腫瘤的發展[5-7]，但BAMBI在非小細胞肺癌中的功能和作用機制有待進一步研究。本文研究shRNA干擾BAMBI細胞后對非小細胞肺癌A549細胞生長、侵襲和遷移的影響及其調控機制。

1 材料與方法

1.1 材料 非小細胞肺癌A549細胞株購自美國ATCC公司；DMEM培養基、胎牛血清和0.25%胰酶均購自Hyclone公司；BAMBI-shRNA載體和shRNA Scramble購自上海吉瑪制藥技術公司；RNA提取試劑盒購自天根生化科技；TurboFect Transfection Regent脂質體轉染試劑、反轉錄試劑盒購自Thermo Fisher Scientific；……