藏紅花素通過HIF-1α/VEGF通路對缺氧誘導的視網膜色素上皮細胞血管新生的抑制作用

閆義濤 王曉麗 谷圓圓 任艷凡 胡俊喜

(新鄉醫學院第一附屬醫院眼科，新鄉453003)

失明或視力障礙嚴重影響人類生活質量。視網膜血管新生是造成早產兒視網膜病變、糖尿病視網膜病變、老年性黃斑變性等各個年齡階段眼病致盲及視力障礙的主要原因[1,2]。大量研究揭示了抗血管內皮生長因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)療法對視網膜疾病的療效[3]。但目前的抗VEGF藥物成本效益并不理想，且會產生眼部或全身性的副作用，如眼內炎、眼內出血和視網膜脫離、心肌梗死、中風等[4-6]。開發安全有效的眼病治療方法迫在眉睫。長期以來藏紅花因具有抗氧化，抗炎及免疫調節等生物活性而被作為多種疾病的治療藥物[7,8]。藏紅花素(化學結構式見圖1)是藏紅花的主要成分，是一種類胡蘿卜素衍生物，有利于神經系統疾病、心血管疾病及癌癥的治療[9-12]。據報道藏紅花素還具有保護缺血再灌注誘導的視網膜損傷功能[13]。但藏紅花素對視網膜細胞血管新生的作用還有待進一步研究。本文的主要目的是通過氯化鈷處理視網膜色素上皮(Retinal pigment epithelial,RPE)細胞建立缺氧模型，探索藏紅花素對缺氧誘導的RPE細胞血管新生的影響及其分子機制。

1 材料與方法

1.1 材料 RPE細胞來源于美國典型培養物保藏中心 (American Type Culture Collection,ATCC)。培養基 DMEM及胎牛血清購自賽默飛世爾科技公司。藏紅花素和氯化鈷購自Sigma公司。MTT購自上海生工。血管生成載玻片購自德國Ibidi公司。Matrigel膠購自BD公司。抗HIF-1α抗體、鼠抗VEGF抗體、鼠抗鼠VEGR2抗體和兔抗P-P38抗體購自英國Abcam公司。

1.2 方法

1.2.1 細胞培養與藥物處理 RPE細胞在添加了10%胎牛血清和1%青-鏈霉素的DMEM培養基中于37℃、5%CO2的恒溫培養箱中培養。……