MRTF-A通過HOTAIR調控非小細胞肺癌細胞A549的增殖及遷移

張琨 周渝斌 馮剛 曾富春

非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）是肺癌的主要類型之一，占肺癌的80%-85%，在全球范圍內具有較高的發病率以及死亡率[1,2]。由于早期不具備明顯的臨床癥狀，患者發現時已經錯過最佳治療時期，致使其5年生存率不足15%[3,4]。盡管諸多治療手段不斷推廣應用，但由于NSCLC的遷移以及侵襲特性，患者長期生存率及生存狀況不盡人意[5,6]。

MRTF-A是轉錄調控因子SRF的輔助因子。Rho信號通路中MRTF-A與G-actin結合阻滯了其核運輸，抑制了靶基因的激活。MRTF-A通過與SRF形成轉錄調控復合體，結合到靶基因的啟動子區域調控基因的表達[7-9]。有文獻[10,11]報道，在乳腺癌中MRTF-A能夠調控基質金屬蛋白酶的表達（MMP3及MMP9）進而調控乳腺癌MCF-7細胞的遷移。

LncRNA是近年研究發現的一類長度超過200 nt非編碼RNA，在真核細胞內普遍表達但是不編碼蛋白質[12]。大量研究證明，lncRNA能夠通過與蛋白質、DNA或RNA相互作用，在表觀遺傳水平、轉錄水平和轉錄后水平調控基因的表達，進而參與細胞增殖、凋亡、遷移以及侵襲等生物學進程[13,14]。HOTAIR是2007年發現的一個LncRNA，在多種腫瘤細胞中存在異常表達，其異常表達與腫瘤的發生發展遷移以及侵襲密切相關[15,16]。因此，準確揭示MRTF-A與HOTAIR在NSCLC發生發展以及遷移侵襲中的作用具有重要的臨床意義。本文擬通過實驗研究MRTF-A及HOTAIR對NSCLC增殖遷移的影響以及MRTF-A對HOTAIR表達的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 RPMI-1640培養基、胎牛血清購于美國Gibco公司。HOTAIR的siRNA購于中國廣州銳博生物科技有限公司。MRTF-A抗體購Abcam公司。Odyssey雙色紅外激光成像系統購于美國LICOR公司。CCK8購于Sigma公司。Trizol、SYBR及Lipo2000購于美國Invitrogen公司。……