朱麗華,李佳,李兵
(1.山東中醫藥大學附屬眼科醫院 山東省中西醫結合眼病防治重點實驗室,山東 濟南 250002;2.錦州醫科大學附屬第一醫院,遼寧 錦州 121000)
全世界主要的致盲疾病中,白內障占首要位置。晶狀體上皮細胞是晶狀體前囊膜下一層單層細胞,維持晶狀體的正常代謝,阻擋房水內任何有害物質進入晶狀體,一旦晶狀體上皮細胞功能障礙,就會引起晶狀體代謝紊亂,出現混濁,最終導致白內障。白內障的誘發因素很多,氧化應激是主要原因,其次是細胞凋亡,氧化損傷也是細胞凋亡的誘發因素之一[1]。過量的活性氧(ROS)可以直接攻擊脂質、蛋白質和DNA,導致晶狀體受損,還可以作為信號通路的上游信號分子,激活細胞內多種信號轉導通路和轉錄因子并介導過氧化氫H2O2對晶狀體的損傷[2]。
核因子E2相關因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)是細胞抵御氧化損傷、抗凋亡的重要轉錄因子。近來研究發現,Nrf2 蛋白對各種以氧化應激和凋亡為主要發病機制的疾病都具有保護作用[3-4]。本研究主要探討Nrf2 在晶狀體上皮細胞對抗H2O2氧化損傷和凋亡的作用,并為今后探討防治白內障提供新的思路和途徑。
人晶狀體上皮細胞(SRA01/04)購自中國科學院上海細胞所,MEM 培養基購自美國BI 公司,活性氧檢測試劑盒購自上海碧云天生物有限公司,超氧化物酶歧化酶(SOD)檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所,Nrf2 一抗、剪切型Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)、Bax、Bcl-2 一抗購自美國Absci 公司,GAPDH、辣根過氧化物酶二抗購自杭州弗德生物公司,Dapi 染色液購自北京索萊寶公司,熒光二抗購自北京博奧森公司,核漿蛋白提取試劑盒購自上海碧云天生物有限公司。……