蠐螬提取物對(duì)視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞模型兔小膠質(zhì)細(xì)胞CD68表達(dá)的影響及機(jī)制研究*

蔣鵬飛，董子奕，彭俊，馬俊旭，梁凱霞，彭清華

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410208；2.天津市人民醫(yī)院 眼科，天津 300121；3.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院 眼科，湖南 長沙 410007）

視網(wǎng)膜靜脈阻塞（retinal vein occlusion，RVO）病程冗長，治療困難，尚無特效療法，視網(wǎng)膜新生血管是RVO的常見并發(fā)癥。文獻(xiàn)記載蠐螬可治療目疾，并有破血、行瘀、散結(jié)及明目的功效，前期研究發(fā)現(xiàn)蠐螬提取物可促進(jìn)RVO出血的吸收，抑制視網(wǎng)膜新生血管[1-2]。為明確其機(jī)制，本文通過復(fù)制RVO動(dòng)物模型，探討蠐螬提取物對(duì)視網(wǎng)膜新生血管的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

選用40只健康實(shí)驗(yàn)性兔，雌雄兼用，體重1.8～2.3 kg（合格證號(hào)：湘醫(yī)動(dòng)字第30-015號(hào)）。蠐螬提取物制備參考陽長明等[3]的方法。復(fù)方血栓通片（揚(yáng)州中惠制藥有限公司），一抗為兔抗白細(xì)胞分化抗原68（cluster of differentiation 68，CD68）多克隆抗體（武漢博士德公司），二抗為生物素標(biāo)記的IgG（武漢博士德公司）。

1.2 設(shè)備

電子秤（JY0001，上海天平儀器廠），勒克斯照度計(jì)（ZDS-10，上海嘉定學(xué)聯(lián)儀器廠），眼科手術(shù)顯微鏡（YZZOT，蘇州醫(yī)療器械設(shè)備廠），PCR儀（德國Biometra公司），凝膠成像系統(tǒng)（Gel Doc XR+，美國Bio-Rad公司），微量移液器（德國Eppendorf公司），垂直板電泳槽（DYCZ-24D，北京六一儀器廠），臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（美國賽默飛公司），水平電轉(zhuǎn)槽（DYCP-40C，北京六一儀器廠），超純水儀（美國Millipore公司），紫外可見分光光度計(jì)（SP-752，上海Spectrum公司），恒溫?fù)u床（THZ-82A，金壇華特實(shí)驗(yàn)儀器有限公司），水平搖床（WD-9405B，北京六一儀器廠），掃描儀（9000F MarkⅡ，日本Canon公司）。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物分組將40只實(shí)驗(yàn)性兔依次編為1～40號(hào)，通過隨機(jī)數(shù)字表法，從第3行第5個(gè)數(shù)開始抄錄40個(gè)數(shù)，將這些數(shù)字除以4，余數(shù)為1作為空白組，余數(shù)為2作為模型組，余數(shù)為3作為復(fù)方血栓通組，余數(shù)為0作為蠐螬組，最終每組10只動(dòng)物，20只眼。……