嬰兒與母親皮膚細菌群落結構的比較分析

朱婷，曾丹寧，全哲學

復旦大學生命科學學院，上海 200438

皮膚作為人體的第一道物理屏障，對防御外來病原菌的攻擊有重要作用[1]。皮膚上有大量微生物，包括細菌、真菌、病毒和螨蟲等[2]。根據物理結構及化學環境等差異，皮膚主要分為3類：背部及額頭等油脂分泌較多的皮脂溢出部位，前臂等干燥部位，以及鼻孔及指縫等濕潤部位[3]。這3類皮膚上的微生物群落結構大不相同。已有研究表明，皮膚脂溢部位的微生物多樣性顯著低于干燥和濕潤部位[4]。

嬰兒皮膚表面的微生物對其免疫系統的建立有一定影響。研究顯示，新生兒出生后10 min內已能檢測到皮膚表面的微生物，表明出生后皮膚表面迅速被各種微生物占據[5-6]。因此，研究嬰兒皮膚表面的微生物對維護人類健康和疾病防治非常重要[7-8]。新生兒皮膚的理化性質與成人有顯著差異。相比成人，新生兒皮膚更柔軟，水分及pH更高，皮脂含量更低[9-12]。同時，新生兒皮膚表面的微生態與成人也有差異，在出生不到1年的新生兒皮膚表面葡萄球菌屬(Staphylococcus)和鏈球菌屬(Streptococcus)的豐度高達60%[13]。

目前，皮膚微生物相關研究主要針對成人，母親與嬰兒之間皮膚細菌群落相關性的文獻較少。有學者對出生1 d以內的新生兒及其母親相應部位的微生物進行取樣，證明新生兒皮膚表面的微生物與分娩方式有關[5,14]。母親是嬰兒接觸最為頻繁的人，兩者皮膚微生物相互傳播的機會較多[8,14-15]。嬰兒出生后免疫系統需要一定的時間才能逐步健全，在此期間自身微生物與免疫系統尚未達到平衡狀態，成人機體上的細菌在嬰兒皮膚微生態的塑造中發揮著何種作用尚不可知[16]。另一方面，自然分娩出生的嬰兒首先接觸的有菌環境是母親的產道，并從中獲取部分細菌，而剖宮產出生的嬰兒則首先接觸母親的皮膚和外部環境，兩類嬰兒之間細菌群落結構差異有統計學意義[5,15]。有研究顯示，剖宮產可能與嬰兒乳糜瀉、哮喘等疾病有關[17-20]，但尚不清楚生產方式不同導致的微生物差異如何給嬰兒帶來潛在疾病風險及這種差異會在何時消失。

本研究選取8名2～4個月的嬰兒及其母親作為受試者，采用焦磷酸測序分析皮膚細菌多樣性，意在闡明年齡為2～4個月的嬰兒皮膚表面細菌群落的特征、母嬰皮膚細菌多樣性的相關性、自然分娩出生的嬰兒與剖宮產出生的嬰兒之間皮膚微生物群落的差異。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1試劑和儀器儀器包括恒科DK 80水浴鍋、TaKaRa聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction，PCR)儀、Eppendorf臺式高速離心機5415D和Nanodrop 3300。Mobio PowerSoil DNA提取試劑盒、Mobio UltraClean PCR純化試劑盒購自深圳市青珊瑚科技有限公司，ExTaq酶混合液和無酶無菌去離子水購自天根科技(北京)有限公司，小牛血清蛋白購自生工生物工程(上海)股份有限公司，PicoGreen dsDNA Reagent(Invitrogen)購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司，AxyPrep DNA Gel Extraction Kit(Axygen)購自上海因帕儀器有限公司。

1.1.2引物采用細菌通用引物27FYM(5′-AGAGTTTGATYMTGGCTCAG-3′)和536RK(5′-GTATTACCGCGGCKGCTGG-3′)擴增細菌16S rRNA基因V1～V3區域。引物AdaA-27FYM(5′-CCATCTCATCCCTGCGTGTCTCCGACGA-CTNNNNNNNNTCAGAGTTTGATYMTGGCT-CAG-3′)包含454測序接頭A、8-nt[用于區分不同樣品的標簽序列(NNNNNNNN)]、2-nt連接堿基(TC)和27FYM。引物AdaB-536RK(5′-CCTA-TCCCCTGTGTGCCTTGGCAGTCGACTCAGT-ATTACCGCGGCKGCTGG-3′)包含454測序接頭B、2-nt連接堿基(CA)和536RK[21]。

1.1.3在線工具和數據庫使用細菌16S rRNA基因數據庫Silva(http://www.arb-silva.de/)、UniFrac距離矩陣在線構建工具Fast UniFrac(http://bmf2.colorado.edu/fastunifrac/index.psp)。

1.2 方法

1.2.1采樣本研究通過了復旦大學生命科學學院倫理委員會的審核。有8對年齡相近的母嬰參與本研究，其中4名嬰兒為剖宮產，4名嬰兒為自然分娩(表1)。受試者均由醫師在取樣前檢查并確認沒有皮膚病。所有母親均被詳細告知本研究的目的和采樣后可能出現的不適反應，并簽署了書面知情同意書。所有受試者在采樣前7 d內未使用抗生素或甾醇類藥物，采樣位點12 h內未有洗漱。母親皮膚表面的采樣部位共有7處，采樣順序為手背(hand back，Hb)、手指指縫(interdigital space，Is；在中指與無名指之間進行樣本采集)、前臂掌側(volar forearm，Vf)、肘窩(antecubital fossa，Af)、鼻孔(nares，Na)、額頭(glabella，Gb)和背部(back，Ba)。Na部位的樣品采集可能對嬰兒造成傷害，因此嬰兒采集了除Na之外其余6個部位的樣品，先后順序與母親相同。采樣使用 0.15 mol/L NaCl和 0.1% 吐溫20溶液浸濕的聚酯纖維頭拭子，采樣面積為 2 cm×2 cm(Is部位為1 cm×1 cm)。采樣過程中，拭子在規定區域內至少完成50次擦拭，持續時間約30 s。然后用滅菌鑷子將拭子頭取出，小心放入Mobio PowerSoil DNA提取試劑盒內含有石英砂的PowerBead Tube中。將一個濕潤的、未經擦拭的拭子頭放入PowerBead Tube中，作為空白對照。每個受試者接受隔天3次重復采樣，最終獲取母嬰樣品共計312份。采樣時室溫維持在24 ℃左右。

表1受試者信息表

Tab.1Informationofsubjects

MothersNo.Age (year)InfantsNo.Way of parturitionAge (month)SexM0131I01Caesarean3MaleM0230I02Caesarean4FemaleM0328I03Caesarean4FemaleM0426I04Caesarean2FemaleM0529I05Vaginally born2MaleM0631I06Vaginally born3FemaleM0733I07Vaginally born3MaleM0832I08Vaginally born2Female

1.2.2DNA提取所有樣品均在采樣后12 h內完成DNA提取。為提高DNA提取效率，優化了DNA提取步驟：將加入60 μL C1溶液的PowerBead Tube密封并于65 ℃恒溫水浴10 min，隨后以最大速度在渦旋振蕩儀上水平振動5 min，其余步驟按試劑盒提供的指導說明逐步進行，最終將DNA重懸于50 μL洗脫液中，-20 ℃ 保存。

1.2.3PCR使用兩輪PCR擴增細菌16S rRNA基因序列。第1輪反應使用細菌通用引物27FYM和536RK。25 μL反應體系包括：正反向引物(10 μmol/L)各 0.25 μL、DNA 6 μL、小牛血清蛋白溶液(20 mg/mL)1 μL、ExTaq酶混合液 12.5 μL。擴增反應參數：94 ℃預變性5 min；94 ℃ 45 s、53 ℃ 30 s、72 ℃ 90 s，20次循環；72 ℃最終延伸10 min。第2輪反應使用引物AdaA-27FYM和AdaB-536RK，將焦磷酸測序接頭連接到擴增產物的兩端。100 μL反應體系包括：正反向引物(10 μmol/L)各1 μL、第1輪PCR產物10 μL、小牛血清蛋白溶液(20 mg/mL)4 μL、ExTaq酶混合液50 μL。反應參數中循環數由20下調至10，其余參數與第1輪相同。最終獲得含有測序接頭的長約500 bp的片段。

1.2.4PCR產物純化和測序采用Mobio UltraClean PCR試劑盒純化第2輪PCR擴增產物，隨后用50 μL洗脫液將純化后的產物重懸。用PicoGreen dsDNA Reagent染色并于Nanodrop 3300測定產物濃度，根據濃度將所有純化產物混合，用AxyPrep DNA Gel Extraction Kit進行切膠回收，完成進一步純化。最后于Roche 454 GS-FLX平臺進行焦磷酸測序。

1.2.5微生物分類和多樣性分析測序產生 196 790 條16S rRNA基因序列。采用Mothur軟件對測序數據進行初步處理[22]，質控(Q score>25)分庫后保留 138 375 條；在Bioedit軟件內刪除前端引物序列后，根據97%相似度劃分可操作分類單元(operational taxonomy unit，OTU)，產生 2 239 個OTU；使用UCHIME比對Silva gold database(http://www.mothur.org/wiki/Silva_reference_files)，識別并去除數據中的嵌合體；移除序列數少于5條的OTU以避免焦磷酸測序錯誤產生的影響，最終獲得 1 078 個OTU；比對Silva數據庫，獲取各OTU代表序列的分類信息。若某細菌在超過50%的樣品中被發現，則認為是皮膚常駐細菌(general bacterium)，若同時豐度>1%，則被認為是皮膚主要細菌(core bacterium)。對皮膚上較為常見且在本研究中豐度較高的幾個細菌種屬進行Local Blast，比對數據庫為各種屬典型菌株的16S rRNA基因序列[23-27]。對數據進行標準化(深度為74)后計算α多樣性指數(包括Sobs、ACE、Shannon、Chao I、Jackknife指數)和 β多樣性(使用Fast UniFrac計算加權和非加權UniFrac距離矩陣)。

1.2.6聚類分析和統計學檢驗使用R軟件中ape()進行主坐標分析(principal coordinates analysis，PCoA)，ggplot()進行繪圖，pairwise.t.test()進行雙尾T檢驗，并使用Bonferroni方法進行多重檢驗矯正。距離矩陣熱圖繪制采用MeV(MultiExperiment Viewer)軟件，聚類分析采用HCL(hierarchical clustering)方法。

2 結果

2.1 母親和嬰兒皮膚細菌多樣性分析

Shannon等α多樣性指數結果如表2所示。母親不同部位細菌群落的5個多樣性指數變化基本相同：Gb、Ba和Na部位細菌多樣性低于Af、Is、Vf和Hb部位。在嬰兒樣本中，Is和Hb部位多樣性相對較低，Ba部位多樣性較高，且不同嬰兒同一部位的多樣性指數變化較大。嬰兒群體在Ba部位的多樣性指數顯著高于母親群體(P<0.001)，母親群體手部皮膚(Is和Hb)較嬰兒群體擁有更高的細菌多樣性(均P<0.05)。

表2母親和嬰兒皮膚各部位的細菌α多樣性指數

Tab.2αdiversityindexesofbacterialcommunitiesonskinsofmothersandinfants

GbMothersInfantsBa??MothersInfantsNa MothersSobs19.8±4.726.5±3.022.8±3.236.6±5.019.1±2.5 Chao I44.0±11.449.1±7.850.1±9.991.2±17.941.2±10.9 ACE88.1±41.281.3±24.696.4±15.3147.5±40.663.3±15.7 Jackknife46.8±11.150.2±8.456.6±12.4100.0±23.042.4±10.7 Shannon1.80±0.412.67±0.312.17±0.373.22±0.252.31±0.12Simpson0.348±0.1170.122±0.0490.245±0.106 0.048±0.0150.132±0.013 AfMothersInfantsIs??MothersInfantsSobs33.8±2.832.8±2.736.3±3.720.1±0.9 Chao I73.4±14.975.0±16.280.6±19.540.7±8.0 ACE102.1±24.6100.3±18.0129.3±38.660.5±14.9 Jackknife79.1±18.080.9±18.889.4±27.740.7±7.5 Shannon3.15±0.133.07±0.113.19±0.222.37±0.17 Simpson0.053±0.0100.061±0.0110.054±0.0200.134±0.026VfMothersInfantsHb?MothersInfantsSobs37.8±2.533.6±1.936.8±2.329.7±5.3 Chao I81.1±10.374.5±11.880.2±14.259.6±14.1 ACE111.1±14.199.0±16.4124.8±29.698.4±20.7 Jackknife87.6±14.676.6±11.483.4±17.861.2±15.5 Shannon3.23±0.162.99±0.123.23±0.122.82±0.27 Simpson0.050±0.0170.077±0.0180.051±0.0110.091±0.019

*P<0.05,**P<0.001.

將加權UniFrac數據按M_same_Site(母親相同部位所有樣品之間的差異)、M_different_Sites(母親某部位所有樣品與其他部位樣品之間的差異)、M_I(母親與嬰兒相同部位所有樣品之間的差異)、I_same_Site(嬰兒相同部位所有樣品之間的差異)和I_different_Sites(嬰兒某部位所有樣品與其他部位樣品之間的差異)分組，并在每兩組之間進行T檢驗(圖1)。結果顯示，M_same_Site顯著低于M_different_Sites(P<0.05)，而I_same_Site顯著高于M_same_Site(P<0.05)。I_same_Site與I_different_Sites之間差異較小，但仍有統計學差異(P<0.05)。上述結果表明，嬰兒皮膚細菌群落在個體間的變異程度比母親高。從M_I組可看出，母親與嬰兒之間同一部位細菌群落結構差異較大，尤其是Gb、Is和Hb；而在Af部位，母親與嬰兒的菌群結構相似。此外，將出生方式、嬰兒性別與細菌群落結構的關系也納入檢驗，但沒有觀察到顯著差異。

觀察非加權和加權UniFrac PCoA(圖2)及距離矩陣熱圖(圖3)發現，非加權結果中，母親Na部位與其他部位差異較大，但與嬰兒Is部位相近(圖2A、圖3A)；加權結果中，母嬰皮膚部位之間的細菌群落各自聚類(圖2B、圖3B)，嬰兒的Is、Vf、Hb和Gb部位與所有母親樣品分開。嬰兒Gb與Hb部位細菌群落結構相似，Ba與Af部位相似。母親Is、Af部位分別與嬰兒Ba、Af部位細菌群落結構相似。

M_same_Site: weighted UniFrac distance between the same site of mothers; M_different_Sites: weighted UniFrac distance between different sites of mothers; I_same_Site: weighted UniFrac distance between the same site of infants; I_different_Sites: weighted UniFrac distance between different sites of infants; M_I: weighted UniFrac distance between the same site from mothers and infants.

圖1樣本之間加權UniFrac距離比較

Fig.1WeightedUniFracdistanceofsamples

Samples were grouped according to the identity and skin site. M means mothers, I means infants. For example, M.Na means Na samples from mothers.

圖2母嬰各皮膚部位細菌群落非加權(A)和加權(B)PCoA分析

Fig.2Unweighted(A)andweighted(B)PCoAanalysisofbacterialcommunitiesonskinsofmothersandinfants

Hierarchical Clustering method was used in sample clusters.

圖3母嬰各皮膚部位之間細菌群落非加權(A)和加權(B)距離矩陣熱圖

Fig.3Unweighted(A)andweighted(B)UniFracdistanceheatmapofbacterialcommunitiesbetweenskinsitesofmothersandinfants

2.2 母親和嬰兒皮膚微生物組成分析

母嬰皮膚微生物主要有4個門：擬桿菌門(Bacteroidetes；母嬰皮膚表面平均含量分別為 2.3% 和 2.0%)、放線菌門(Actinobacteria；分別為 29.0% 和 10.5%)、厚壁菌門(Firmicutes；分別為 30.4% 和 64.4%)及變形菌門(Proteobacteria；分別為 28.0% 和 19.1%)。后三者在母親與嬰兒樣本中含量差異顯著(P<0.001)，其余門的比例均<1%。

母親與嬰兒皮膚的主要細菌相似(圖4、表3)，包括棒狀桿菌屬(Corynebacterium)、丙酸桿菌屬(Propionibacterium)、葡萄球菌屬和鏈球菌屬。母親與嬰兒相同的皮膚常駐細菌包括不動桿菌屬(Acinetobacter)、厭氧球菌屬(Anaerococcus)、脫硫微菌屬(Desulfomicrobium)、水棲菌屬(Enhydrobacter)、鹽單胞菌屬(Halomonas)、嗜糖假單胞菌屬(Pelomonas)、假單胞菌屬(Pseudomonas)和鞘氨醇單胞菌屬(Sphingomonas)。短波單胞菌屬(Brevundimonas)和副球菌屬(Paracoccus)是母親獨有的常駐細菌；孿生球菌屬(Gemella)、普雷沃菌屬(Prevotella)、羅思菌屬(Rothia)和韋榮球菌屬(Veillonella)是嬰兒獨有的常駐細菌。該結果與PCoA和距離矩陣熱圖(母嬰樣本在非加權時聚類在一起，而在加權時呈現各自的聚類)結果可表明，嬰兒與母親皮膚表面細菌種類組成相似，但豐度存在差異。

圖4母嬰皮膚各部位主要細菌屬(>0.5%)的分布狀況

Fig.4Mainbacterialgenera(>0.5%)onskinsitesofmothersandinfants

表3母親和嬰兒皮膚表面主要和常駐細菌

Tab.3Coreandgeneralbacteriaonskinsofmothersandinfants

MothersInfantsCore bacteriaPropionibacterium, Staphylococcus, Corynebacterium, Streptococcus, EscherichiaStreptococcus, Staphylococcus, Corynebacterium, PropionibacteriumGeneral bacteriaEnhydrobacter, Acinetobacter, Pseudomonas, Pelomonas, Desulfomicrobium, Sphingomonas, Halomonas, Anaerococcus, Paracoccus, BrevundimonasEnhydrobacter, Escherichia, Veillonella, Acinetobacter, Pseudomonas, Gemella, Pelomonas, Desulfomicrobium, Anaerococcus, Halomonas, Sphingomonas, Rothia, Prevotella

V: vaginally born infants; C: caesarian-born infants.

圖5自然分娩出生的嬰兒與剖宮產出生的嬰兒各部位主要細菌屬(>0.5%)分布比較

Fig.5Mainbacterialgenera(>0.5%)onskinsitesofvaginallybornandcaesarian-borninfants

不動桿菌屬在母親Is和Hb部位比例較高，主要包含約氏不動桿菌(Acinetobacterjohnsonii；35.5%)、瓊氏不動桿菌(Acinetobacterjunii；30.2%)和鮑曼不動桿菌(Acinetobacterbaumannii；11.8%)。棒狀桿菌屬主要分布在Na和其他非脂溢部位，包括假生殖道棒狀桿菌(Corynebacteriumpseudogenitalium)、結核硬脂酸棒狀桿菌(Corynebacteriumtuberculostearicum)和擁擠棒桿菌(Corynebacteriumaccolens)，三者占棒狀桿菌屬總量的 57.8%；其他還包括Corynebacteriumcamporealensis(27.3%)和麥氏棒桿菌(Corynebacteriummacginleyi；6.8%)。丙酸桿菌屬在母親的Gb、Ba和Na部位含量豐富，Local Blast結果顯示僅存在一個種：痤瘡丙酸桿菌(Propionibacteriumacnes)。痤瘡丙酸桿菌多分布在皮膚脂溢部位，在潮濕和干燥部位的豐度低于皮膚脂溢部位。

比較自然分娩出生的嬰兒與剖宮產出生的嬰兒(圖5)，Gb部位鏈球菌屬(自然分娩出生的嬰兒和剖宮產出生的嬰兒的含量 65.2%vs. 48.5%)和葡萄球菌屬(1.7%vs. 4.5%)含量差異顯著；Ba部位脫硫微菌屬(0.2%vs. 3.3%)、葡萄球菌屬(3.9%vs. 13.2%)和不動桿菌屬(2.3%vs. 0.4%)含量差異顯著；Af部位假單胞菌屬(1.8%vs. 0.4%)和葡萄球菌屬(5.0%vs. 13.0%)含量差異顯著(均P<0.05)；Is和Hb部位微生物組成無顯著差異。葡萄球菌屬在Is部位最多，其次是Af和Ba部位；剖宮產出生的嬰兒Gb、Ba和Af部位葡萄球菌屬的含量較自然分娩出生的嬰兒高(P<0.05)。Local Blast結果顯示，葡萄球菌屬包括溶血性葡萄球菌(Staphylococcushominis；64.2%)、表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermis；28.3%)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus；5.7%)。鏈球菌屬在嬰兒Ba部位含量較低(0～14.1%)。8名嬰兒中僅有1名為非母乳喂養，其樣本中鏈球菌平均含量為 40.4%。Local Blast結果顯示，鏈球菌屬主要為假肺炎鏈球菌(Streptococcuspseudopneumoniae；72.1%)、唾液鏈球菌(Streptococcussalivarius；15.3%)和口腔鏈球菌(Streptococcusoralis；10.0%)。

3 討論

皮膚是人體重要的防御器官，了解皮膚表面微生物有助于疾病預防和治療。皮膚細菌對環境選擇有一定的偏好，例如放線菌門(主要為丙酸桿菌)在母親的皮脂溢出部位(Gb和Ba)較高，而在嬰兒相應部位較低。除Na部位外，厚壁菌門(主要為鏈球菌和葡萄球菌)的豐度在其他采樣點高于放線菌門。由此推斷，放線菌門傾向于分布在皮脂溢出部位，而厚壁菌門更傾向于分布在非皮脂溢出部位[4]。出生4個月以內的嬰兒皮脂分泌量少，角質層水分含量很高，有利于鏈球菌和葡萄球菌的生長[13]。成人Gb和Ba是皮脂溢出部位，而丙酸桿菌與皮膚皮脂分泌密切相關，因此丙酸桿菌在母親Gb和Ba部位有很高的豐度[4]。

母親的微生物群落已成為獨立的生態位，個體間相同部位細菌群落結構差異較小，呈現相對穩定性。相反，嬰兒個體間的細菌群落結構差異大，表現出相對高的變異性。兒童Hb和Is部位的微生物多樣性指數低于母親，鏈球菌和葡萄球菌的含量較高可能是原因之一。研究顯示，人類皮膚細菌多樣性指數在12歲之前呈上升趨勢，成人的皮膚細菌多樣性顯著高于青少年和老年人[28-29]，與本研究結果一致。母親的細菌多樣性高于嬰兒，嬰兒與自己母親在細菌種類構成上又相似，表明母親是影響嬰兒皮膚微生物群落塑造的重要外環境之一。嬰兒之間皮膚細菌群落結構更相近，表明皮膚微生物的豐度與皮膚的年齡、理化狀態相關，而環境對皮膚微生物的影響主要為微生物種類[28,30]。

不同分娩方式出生的嬰兒皮膚表面微生物從出生開始呈現不同的結構。葡萄球菌在環境中常見，出生時剖宮產出生的嬰兒中其含量比自然分娩出生的嬰兒更高。原因可能是自然分娩出生的嬰兒在出生時經過產道并獲取部分微生物，且母親產道菌群分泌的抗菌肽能幫助其抵抗環境微生物的定植[31]。而剖宮產出生的嬰兒首先接觸到的有菌環境是母親的皮膚和空氣，因此首先從外部環境中獲取部分微生物。換言之，剖宮產出生的嬰兒更易受到環境微生物入侵，這對嬰兒皮膚免疫系統的建立具有重要意義[8]。

出生2～3個月以后，兩種分娩方式出生的嬰兒皮膚表面微生物呈現相似狀態，群落結構差異不顯著[13]。嬰兒皮膚表面存在大量鏈球菌和葡萄球菌。鏈球菌是嬰兒所有皮膚部位的優勢菌，但在嬰兒出生時并不占主導地位[13]，出生數月后鏈球菌優勢逐漸呈現。鏈球菌可幫助其他微生物形成生物膜并定植于牙齒表面[32-34]。研究顯示，嬰兒皮膚上的鏈球菌可能源自母親的口腔和母乳[16,35]。本研究中，嬰兒皮膚表面的鏈球菌主要為假肺炎鏈球菌、唾液鏈球菌和口腔鏈球菌，后兩者通常在口腔中被檢測到[36-37]，此結果也支持嬰兒皮膚上鏈球菌可能源自母親口腔。此外，4種嬰兒獨有的皮膚常駐細菌(孿生球菌屬、普雷沃菌屬、羅思菌屬和韋榮球菌屬)通?？稍诔赡耆说目谇恢袡z測到[38]。另有小鼠實驗研究證明，母親的口腔微生物是胎兒宮內感染的潛在來源[39]。這些結果表明，母親的口腔細菌對嬰兒早期皮膚細菌群落的塑造可能發揮一定的作用[31-33]。

綜上所述，嬰兒與母親的皮膚表面細菌群落結構存在差異，又有聯系。出生后2～4個月，嬰兒皮膚常駐細菌不僅受不同分娩方式的影響，還受母親皮膚、口腔細菌的影響。這些結果對了解嬰兒皮膚微生態構造和皮膚病防治有重要意義。