使用高效液相色譜法檢測蔬果中啶蟲脒等5種農藥殘留

□ 余曉波 劉 沖 枝江市公共檢驗檢測中心

1 材料與方法

1.1 儀器與設備

在本次研究中，使用LC—20A高效液相色譜儀（紫外檢測器，LCsolution色譜工作站，日本島津公司）；HY—5回旋式振蕩器（金壇市鴻科儀器廠）；TG16—WS臺式高速離心機（長沙湘儀離心機儀器有限公司）；RE—52CS旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）；AL204電子天平（梅特勒—托利多儀器（上海）有限公司）；0.22μm微孔濾膜（天津市津騰實驗設備有限公司）；Milli—Q direct8超純水機（密理博公司）。

1.2 材料與試劑

本次研究所使用果蔬的樣品均在本地的農貿市場采購，進行粉碎后備用。所使用的農藥啶蟲脒、嘧霉胺、氟蟲腈、辛硫磷和噠螨靈標準物質（濃度為1 000μg/mL，青島捷世康生物科技有限公司）；甲醇、乙腈（色譜純，MREDA公司）；二氯甲烷（色譜純，MERCK公司；氯化鈉（分析純，南京化學試劑股份有限公司）；NH2小柱（500 mg/6 mL，上海安譜實驗科技股份有限公司）；在本次的實驗過程中所使用的水都是超純水[1]。

1.3 試驗方法

1.3.1 制備標準溶液

100 μg/mL農藥標準儲備液：取1 000 μg/mL農藥標準溶液各1 mL，放在10 mL刻度管中，使用甲醇稀釋到刻度，再對其進行搖勻。1 μg/mL的農藥標準工作液：把0.1 mL標準儲備液移入10 mL的刻度管中，使用甲醇將其稀釋到刻度，再對其進行搖勻。標準工作液：根據要求使用甲醇—水（1∶1，V∶V）稀釋到合理的濃度。

1.3.2 對樣品進行預處理

稱取10 g已經粉碎好的蔬果樣品，放在50 mL的離心管里，再加入20 mL的乙腈，在恒溫搖床上振蕩30 min后，再放入10 g的氯化鈉，蓋上蓋子，使用恒溫搖床振蕩1 min，以4 000r/min的速度離心5 min，取上清液10 mL放入50 mL的梨形瓶里，在40 ℃下旋轉蒸干。加入4 mL的二氯甲烷—甲醇（97∶3，V∶V）洗脫液對殘渣進行溶解，等候凈化。使用5 mL的洗脫液活化氨基小柱，拋棄洗脫液，當液位將要達到氨基柱吸附層表面時，馬上把樣品溶液轉移到氨基小柱里，把流出的液體收集在50 mL的雞心瓶里，然后用洗脫液分兩次清洗梨形瓶，每次3 mL，也轉移到氨基柱中，將洗脫液混合進雞心瓶中，在30 ℃環境下旋轉蒸發到接近干燥，再使用洗耳球將其吹干，使用1 mL甲醇—水（1∶1，V∶V）進行定容，旋渦混合均勻，使用0.22 μm的濾膜進行過濾，再應用高效液相色譜法進行測定[2]。

1.3.3 液相色譜條件

使用Dikma Spursil C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流速為1 mL/min；柱溫為35 ℃；進樣量為20 μL；流動相A為水，流動相B為甲醇。

2 結果與討論

2.1 方法的線性范圍和定量限

本次研究配置質量濃度為0.1、0.25、0.5、1.0μg/mL 和 2.0 μg/mL的混合標準溶液，經過測定之后發現，不同的農藥在0.1～2.0 μg/mL的濃度范圍內與色譜峰面積具有較好的線性關系，相關系數為0.999 4～0.999 7。按照儀器的靈敏度和加標回收試驗，根據信噪比（S/N）≥10計算方法得出，定量限為0.006～0.02 mg/kg，能夠滿足國家限量標準的規定。

2.2 方法回收率與精密度

對蔬果樣品進行添加回收實驗，加標的濃度分別為0.02、0.05、0.1 mg/kg， 不同農藥的加標回收率在70.4%～112.8%的區間內，而RSD則為2.2%～11.7%。試驗結果說明，經過氨基固相萃取柱的凈化，高效液相色譜紫外變波長檢測蔬菜和水果中多種農藥殘留具有較高的準確性[3]。

3 結語

本文提出了測定蔬菜和水果中啶蟲脒、嘧霉胺、氟蟲腈、辛硫磷以及噠螨靈等農藥殘留的高效液相色譜方法。本研究所使用的樣品經過乙腈提取，氨基固相萃取小柱富集和凈化。將樣品中的目標化合物與干擾共提物分離的同時，將被分析物濃縮，方法定量限為0.006～0.02 mg/kg。這一方法較為簡潔和高效，符合多種農藥殘留檢測的要求，因而具有適用性，值得在蔬果農藥殘留檢測中進行推廣。