兩株新的金黃色葡萄球菌烈性噬菌體的生物學特性和基因組學研究

靳曉東，張聰慧，鐘江

復(fù)旦大學生命科學學院微生物學與微生物工程系, 上海 200438

奶牛乳腺炎是奶牛中常見的乳腺炎癥反應(yīng)，嚴重影響牛奶的質(zhì)量和產(chǎn)量。其主要致病菌是金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、無乳鏈球菌(Streptococcusagalactiae)等[1]。金黃色葡萄球菌是隱性奶牛乳腺炎的主要致病菌[2]。目前，抗生素是治療奶牛乳腺炎的主要手段[3]，但抗生素長期使用往往引起細菌耐藥性，導(dǎo)致治療效果不佳[4]，且牛奶因抗生素殘留而被廢棄，嚴重影響牛奶產(chǎn)業(yè)[5]。

噬菌體用于抗菌治療具有特異性強、成本低等優(yōu)點，且不會產(chǎn)生耐藥性等不良反應(yīng)，逐漸引起國內(nèi)外研究者的重視[6]。已有一些研究成功利用金黃色葡萄球菌噬菌體進行了奶牛乳腺炎治療[7-8]，為奶牛乳腺炎的噬菌體療法提供了理論基礎(chǔ)。

噬菌體具有宿主特異性，獲得更多種類的噬菌體，建立噬菌體庫，對更好地應(yīng)用噬菌體療法具有重要意義。本研究從奶牛場廢水中分離到兩株金黃色葡萄球菌烈性噬菌體，對其生物學和基因組學特征進行了分析。

1 材料與方法

1.1 材料

金黃色葡萄球菌標準株ATCC 25923、1株牛源金黃色葡萄球菌cowSA_1、1株人源金黃色葡萄球菌humanSA_1及1株人源表皮葡萄球菌(S.epidermidis)humanSE_1為本實驗室保藏。細菌培養(yǎng)采用高鹽LB培養(yǎng)基(酵母提取物5 g/L、蛋白胨10 g/L、氯化鈉70 g/L，pH 7.0，分別添加 0.7% 瓊脂糖和 1.8% 瓊脂獲得半固體和固體高鹽LB培養(yǎng)基)。

1.2 方法

1.2.1噬菌體的分離和純化取自上海市寶山區(qū)某奶牛場，樣品為患病奶牛乳房清洗液，4 ℃ 2 000g離心10 min后取上清液，以ATCC 25923作為指示菌，用雙層瓊脂平板法檢測是否含有裂解性噬菌體。……