張海玉
(陜西省漢中市人民醫院 檢驗科, 陜西 漢中, 723000)
小兒感染性腹瀉是由多種微生物感染引起的小腸及結腸炎性反應,是兒科臨床發病率僅次于呼吸道疾病的傳染病[1]。嬰幼兒由于消化系統發育不完善,機體抵抗防御功能較差,細菌、病毒、支原體感染等均可引起患兒嘔吐、腹瀉,造成水電解質和酸堿平衡紊亂,嚴重者甚至休克[2]。有報道[3]指出,小兒感染性腹瀉是導致嬰幼兒生長發育障礙和營養不良的高危因素,也是5歲以下兒童死亡的主要原因之一,因而需加強預防和治療。引起小兒感染性腹瀉的病原菌種類復雜,且隨著抗生素藥物的廣泛使用,耐藥性菌株不斷增多[4], 因而加大了小兒感染性腹瀉的防治難度。本研究選取426例感染性腹瀉患兒的糞便標本進行細菌培養實驗和耐藥性分析,旨在為臨床合理防控小兒感染性腹瀉提供參考,現報告如下。
收集2016年1月—2017年10月在本院就診的426例小兒感染性腹瀉患者,男267例,女159例,年齡1~12歲。采集對象均存在嘔吐或腹瀉等消化道癥狀,臨床初步診斷為感染性腹瀉,且近期未服用抗生素類藥物。收集患兒新鮮糞便標本426份,置于Cary-Blair氏運送培養基后24 h內送檢。
菌株鑒定采用生物梅里埃API細菌鑒定試劑條,由北京賽為思生物技術開發中心提供。志賀氏菌、沙門氏菌以及致病性大腸桿菌診斷血清均來自蘭州生物制品研究所。Cary-Blair氏運送培養基購自青島海博生物公司,其他病原菌分離鑒定用培養基來自廣東環凱生物公司。藥敏紙片選用英國OXOID公司產品。標準菌株大腸埃希菌(ATCC25922)、金黃色葡萄球菌(ATCC25923)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)作為質控菌株,由衛生部檢驗中心提供。
細菌培養及分離鑒定參照《全國臨床檢驗操作規程》[5]進行。采用K-B紙片擴散法進行藥敏試驗,參照美國臨床實驗室標準委員會的相關規則和標準進行判別。
本研究采集的426份感染性腹瀉患兒糞便標本中,共檢出病原菌5種73株,檢出率為17.14%。其中沙門氏菌陽性檢出率最高,共24株,占32.88%; 銅綠假單胞菌陽性檢出率最低,共6株,占8.22%。見表1。

表1 426例患兒病原菌檢出率及構成狀況
根據沙門氏菌血清學分型,共檢出24株沙門氏菌,其中沙門O4群11株(占45.83%)、O2群9株(占37.50%)、O7群4株(占16.67%)。
根據志賀氏菌血清分析,共檢出20株志賀氏菌,其中福氏志賀菌(B群)9株(占45.00%)、宋內志賀菌(D群)7株(占35.00%)、鮑氏志賀菌(C群)3株(占15.00%)、痢疾志賀菌(A群)1株(占5.00%)。
沙門氏菌和志賀氏菌對氨芐西林、頭孢唑啉、環丙沙星的耐藥率均較高,對頭孢吡肟、頭孢他啶、復方新諾明以及亞胺培南的耐藥率較低,見表2。

表2 沙門氏菌和志賀氏菌藥敏結果[n(%)]
感染性腹瀉是嬰幼兒常見的腸道疾病,主要因小兒受病毒、細菌、支原體等感染所致,以大便次數增多和大便性狀改變為主要特征,好發于6個月~3歲的嬰幼兒[6]。相關調查[7]顯示,全球每年約380萬感染性腹瀉兒童病例死亡,占同齡兒童死因的30%左右,而中國感染性腹瀉的年發病率約0.9次/人, 5歲以下兒童的年發病率則為2.1次/人,因此需加強對小兒感染性腹瀉的防控。感染性腹瀉的致病菌種類多樣,且各種腸道致病菌對不同抗生素藥物的敏感性不一,因而臨床醫務人員需深入了解小兒感染性腹瀉的病原菌分布特點和耐藥情況,為日后小兒感染性腹瀉的預防、診斷以及治療提供參考依據。
本研究對426例感染性腹瀉患兒進行細菌病原學檢測,共檢出5種73株,檢出率為17.14%, 其中沙門氏菌陽性檢出率最高,達5.64%, 為引起本院小兒感染性腹瀉的主要病原,與報道[8]相吻合。近年來,沙門氏菌的檢出率逐漸升高,這與人們生活習慣、飲食結構的變化相關,其中蛋、肉類食物占比提升,而這類食物為沙門氏菌的主要傳播媒介。本研究檢出的24株沙門氏菌中,主要血清型為O4群,占45.83%, 與近年來報道[9]中的沙門氏菌感染患病率大幅上升趨勢一致,應引起高度重視。王宵雪等[10]認為,沙門菌O4群鼠傷寒沙門氏菌為小兒沙門氏菌感染中最常見者,其自然疫源廣泛,且在外界環境中抵抗力強,水、牛奶等食品被污染機會較多。小兒由于免疫力低下,且無良好的個人衛生習慣,感染病原菌的機會相對更高。本研究中志賀氏菌的陽性檢出率僅次于沙門氏菌,共20株,檢出率為4.69%, 與其他研究結論略有差異,如沈麗珍等[11]報道2010—2013年浙江省溫州地區感染性腹瀉患者的主要腸道致病菌以志賀氏菌為首,沙門氏菌次之,王春娟等[12]報道2004—2016年陜西省西安市兒童細菌性腹瀉的主要病原菌為志賀氏菌,這說明不同時間與地域的感染性腹瀉病原譜存在差異。本研究20株志賀氏菌中,以福氏志賀菌(B群)檢出率最高,占45.00%, 宋內志賀菌(D群)次之,與國際流行特征[13]相當。
隨著抗生素藥物的廣泛使用,細菌耐藥性現象也日趨嚴重,已成為全球性的公共衛生問題。本研究藥敏結果顯示,沙門氏菌對四代頭孢菌素、亞胺培南、復方新諾明均具有較好的敏感性,與國內各項檢查報告[14-15]結果基本一致,對三代頭孢菌素的耐藥率在16.67%左右,與報道[16]相比耐藥率有所降低,對氨芐西林的耐藥率最高,達66.67%。志賀氏菌均對亞胺培南、復方新諾明藥物敏感,對三、四代頭孢菌素的耐藥率分別為25.00%、5.00%, 且對常用的β-內酰胺類抗生素以及喹諾酮類藥物等耐藥性較高。由此可見,志賀氏菌的多重耐藥問題較沙門氏菌嚴重,與報道[17]相吻合。目前人們普遍認為細菌的耐藥性主要由耐藥質粒介導,通過質粒轉導、基因重組等方式在菌種中擴散蔓延,臨床應加強抗菌藥物的規范使用。
綜上所述,本研究中小兒感染性腹瀉的病原菌以沙門氏菌為主,志賀氏菌次之,且多元耐藥問題以志賀氏菌較為嚴重,兩種菌株對亞胺培南、復方新諾明和頭孢吡肟均比較敏感。醫務人員需采取相應措施解決細菌高耐藥性問題,及時檢測病原菌譜和耐藥情況,為小兒感染性腹瀉的合理用藥提供參考依據。