可溶性B7—H4在類風濕性關節炎中的診斷意義分析

姚炯濤

[摘要]目的 研究可溶性B7-H4在類風濕性關節炎診斷中的意義。方法 選取2013年1月～2014年12月我院收治的類風濕性關節炎（RA）患者65例為RA組，骨性關節炎（OA）66例為OA組，并選取同時期來我院行健康體檢對象70例為健康組。利用酶聯免疫吸附法（ELISA）對三組患者可溶性B7同源體4（sB7-H4）、抗環瓜氨酸肽（CCP）抗體、葡萄糖6-磷酸異構酶（GPI）水平，免疫比濁法測定患者的類風濕因子（RF）。比較分析sB7-H4在RA診斷中的意義。結果 RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI水平顯著高于OA組及健康組，差異均有統計學意義（P<0.05）。sB7-H4與RF、抗CCP抗體成正相關關系，而與GPI水平無相關性。另外，RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI陽性率顯著高于OA組與健康組，差異均有統計學意義（P<0.05）。結論 sB7-H4在診斷RA中有著很高價值，臨床應用前景較好。

[關鍵詞]可溶性B7-H4；類風濕性關節炎；診斷意義；抗CCP抗體水平

[中圖分類號] R593.22 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）6（c）-0112-03

[Abstract]Objective To study the significance of soluble B7-H4 in the diagnosis of rheumatoid arthritis.Methods A total of 65 rheumatoid arthritis （RA） patients and 66 osteoarthritis （OA） patients admitted to our hospital from January 2013 to December 2014 were selected.At the same time，70 patients were selected for physical examination in our hospital.The serum levels of sB7-H4，anti-cyclic citrullinated peptide （CCP） antibodies，and glucose 6-phosphate isomerase （GPI） levels were measured in three groups by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）.The patient′s rheumatoid factor（RF） was measured by immunoturbidimetry.The significance of sB7-H4 in the diagnosis of RA was compared and analyzed.Results The levels of sB7-H4，RF，anti-CCP antibody and GPI in RA group were significantly higher than those in OA group and healthy group，the differences were statistically significant（P<0.05）.sB7-H4 was positively correlated with RF and anti-CCP antibodies but not with GPI levels.In addition，the positive rates of sB7-H4，RF，anti-CCP antibodies，and GPI in the RA group were significantly higher than those in the OA group and the healthy group，the differences were statistically significant （P<0.05）.Conclusion sB7-H4 has high value in diagnosing RA and has good clinical application prospects.

[Key words]Soluble B7-H4；Rheumatoid arthritis；Diagnostic significance；Anti CCP antibody level

類風濕性關節炎（RA）是一個累及周圍關節為主的多系統炎癥性的自身免疫病，我國發生RA的概率為0.35%左右，是導致人們喪失較強勞動力及致殘的重要病因[1]。盡管近年來發現的一些診斷指標如類風濕因子、抗核周因子、抗瓜氨酸環肽抗體等對RA的診斷有一定的價值，但這些指標陽性或升高亦可見于系統性紅斑狼瘡、干燥綜合癥等其他免疫性疾病，因而RA臨床診斷存在著特異性不明顯、靈敏度較低等問題[2-3]。因此，在進行RA早期診斷時，篩選新型的檢測物對這項工作有著重要影響。本研究選取我院收治的RA患者、骨性關節炎（OA），并選取同時期來我院行健康體檢對象70例，探討sB7-H4在診斷RA中的價值，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2013年1月～2014年12月我院收治的RA患者65例為RA組，男女性別比為32∶33，年齡28～69歲，平均（43.98±4.98）歲。OA患者66例為OA組，男女性別比為33∶33，年齡29～72歲，平均（43.43±4.25）歲。并選取同期來我院行健康體檢對象70例為健康組，男女性別比為36∶34，年齡31～71歲，平均（43.06±4.66）歲。三組研究對象的一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。所有研究對象均知情同意，本研究經醫院醫學倫理委員會的審核。

1.2儀器與試劑

酶聯微量反應板、抗小鼠可溶性B7同源體4（B7-H4）多克隆抗體、辣根過氧化物酶（HRP）標記羊抗兔IgG（免疫球蛋白G），TMB底物（3，3，5，5-四甲基聯苯胺底物溶液）、抗人B7-H4單克隆抗體及顯色劑。抗環瓜氨酸肽（CCP）抗體、葡萄糖6-磷酸異構酶（GPI）試劑，類風濕因子（RF）試劑。全自動生化分析儀（貝克曼公司，型號au480）、全自動酶聯免疫分析儀（美國貝克曼庫爾特公司，型號DxI800）。

1.3采集標本

清晨空腹取靜脈血3 ml離心留血清備用，采取酶聯免疫吸附試驗法對B7-H4含量、CCP含量進行測定，采取乳膠凝集法對RF予以檢驗，采取抗核抗體制ANA（IIF）法對抗核周因子進行檢測。

1.4判斷標準

RF>20 U/ml為陽性；抗CCP抗體>5 U/ml為陽性；GPI抗原>0.2 mg/L[4]為陽性；sB7-H4>36.5 μg/L為陽性。

1.5統計學方法

采用SPPSS 20.0統計學軟件進行統計學處理，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，采用t檢驗；多組計量資料比較采用F檢驗，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1三組sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI水平的比較

RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI水平顯著高于OA組及健康組，差異有統計學意義（P<0.05）（表1）。

2.2三組sB7-H4與RF、抗CCP抗體、GPI水平的相關性分析

將RA組的sB7-H4水平與RF、抗CCP抗體、等進行單因素分析，結果顯示，sB7-H4與這些指標間成正相關關系，而與GPI水平無相關性，sB7-H4與RF的相關性（r=0.612，P<0.05）；sB7-H4與抗CCP抗體的相關性（r=0.536，P<0.05）；sB7-H4與GPI的相關性（r=0.209，P>0.05）。

2.3三組sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI診斷陽性率的比較

RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI診斷陽性率顯著高于OA與健康組，差異均有統計學意義（P<0.05）（表2）。

3討論新成員，有抑制細胞增殖，抑制細胞因子生長及阻礙細胞周期進程的作用，可以對細胞的免疫應答進行負相調控[5]。B7-H4的mRNA在淋巴樣及非淋巴樣組織中得到廣泛表達，但實際上它的蛋白質在各種組織中的表達性較低，而在樹突狀細胞及單核細胞、T細胞、B細胞表面有著較高的誘導性表達[6]。B7-H4可對腫瘤細胞的胞漿及胞膜進行表達，另外還會發現其在血清中的存在形式為可溶性形式[7]。B7-H4可有效地對T細胞增殖產生抑制，并抑制細胞因子，抑制細胞周期進程，進而負性調控T細胞免疫應答；其能促進上皮細胞向惡性轉化，并有效的保護腫瘤細胞，調控腫瘤細胞的發生發展及轉歸。B7-H4中可能存在缺失跨膜區剪切體并在血清中表達，且能通過基質金屬蛋白酶作用而從膜蛋白脫落到血清。

實驗表明，乳腺癌及肺癌等癌癥類型的患者，其血清B7-H4水平出現顯著增高[8-9]。通過對RA患者發病機制進行研究，發現在其中起主導作用的為T細胞[10-11]。這種細胞群會轉移到患者的病變關節，在對其中特定的抗原肽進行識別后，釋放了多種炎癥因子，如白介素-17（IL-17）、干擾素-γ（INF-Y）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）[12-13]。通過這樣的作用，實現滑膜細胞增值，使其形成血管翳，最終破壞患者。通過研究T細胞活化機制得出，T細胞活化及效應發揮需要有共刺激信號的作用。若是在其活化過程中，沒有共刺激信號，抗原刺激就容易出現免疫耐受的情況。已知的幾種共刺激分子在RA中占據主導作用[14]。如在對RA患者進行治療時連續6個月使用細胞毒T細胞抗原4（CTLA-4-Ig）融合蛋白，會發現患者本身含有的關節炎癥出現減輕，生活情況也因關節炎癥的減輕而得到好轉。國內外有關B7-H4與RA的關系報道甚少[15-16]。

本研究結果顯示，RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI水平顯著高于OA組及健康組（P<0.05）。sB7-H4與RF、抗CCP抗體成正相關關系，而與GPI水平無相關性。另外，RA組的sB7-H4、RF、抗CCP抗體、GPI陽性率顯著高于OA組與健康組（P<0.05），提示可溶性B7-H4在RA診斷、判斷預后和轉歸及評價治療療效等方面，都具有較高的實用價值。如可溶性B7-H4可作為新的RA標志物，且在發病早期就能檢測，那么采取有針對性的治療措施能降低病患的致殘率，有良好的經濟效益及社會效益，此外還可將sB7-H4作為一種潛在的分子靶點，以提供新的腫瘤治療策略。

綜上所述，sB7-H4在診斷RA中有著很高價值，臨床應用前景較好。

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（收稿日期：2018-03-15 本文編輯：崔建中）