肉雞雞胚十二指腸上皮細胞的體外分離、鑒定及其原代培養吸收模型的構建與評估

張樹敏 廖秀冬 呂 林 張麗陽 羅緒剛

(中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所，礦物元素營養研究室，北京 100193)

小腸是動物重要的消化器官，是營養物質主要的消化與吸收的場所。而小腸上皮細胞(intestinal epithelial cells，IEC)作為體內更新最快的一類細胞，是腸道內外環境的媒介，又是機體免疫屏障的重要組成部分，具有消化、吸收、分泌、免疫等重要的生理功能[1]。小腸上皮細胞在一定條件下可進行體外分離和培養。體外分離培養小腸上皮細胞對于研究腸道生物學功能、營養物質吸收機制及其調控以及小腸上皮細胞增殖和分化提供了簡單、快速的手段，并為研究營養素及其他外界因素對腸上皮的作用提供了理想的體外模型[2]。一般而言，體外培養胚胎組織比成體組織更易生存和生長，因而其細胞分離后容易培養成功。而成體組織中大部分是非繁殖的分化細胞，當細胞分化時生長受到嚴重抑制或完全停止，并且成體組織的年齡越大，體外培養的成功率越低，這可能與胚胎干細胞的分化水平有關，故成體來源組織培養細胞增殖極為困難，且培養周期縮短[3]。李艷等[4]選取9胚齡雞胚，Guo等[5]選取17胚齡雞胚，馬玉龍等[6]和古少鵬等[7]選取18胚齡雞胚，Derache等[8]選用大于18胚齡的將出殼雞胚，賈國東等[9]選取20胚齡雞胚進行小腸上皮細胞原代培養，均已成功構建小腸上皮細胞體外原代培養模型。以上文獻中選取的雞胚多集中在18胚齡左右，故本試驗選用18胚齡雞胚十二指腸上皮細胞進行原代培養。……