3種小鼠肝纖維化模型的建立及評價

魯智文， 潘曉莉， 宋宇虎

華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬協(xié)和醫(yī)院消化內科，湖北 武漢 430022

肝纖維化是多種慢性肝病發(fā)展的共同病理基礎[1]，絕大多數(shù)的肝硬化和肝癌患者由肝纖維化發(fā)展而來[2]，肝纖維化屬于可逆性病變，因此，建立一種合適的肝纖維化動物模型對于研究肝纖維化的發(fā)生發(fā)展、防治肝硬化和肝癌具有重要意義[3]。本研究旨在建立3種不同機制的小鼠肝纖維化模型，為肝纖維化的研究提供合適的動物模型。

1 材料與方法1.1 材料

SPF級C57/BL6小鼠雄性41只，雌性3只，6～8周齡，體質量18～22 g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司。飼養(yǎng)于華中科技大學同濟醫(yī)學院實驗動物中心。硫代乙酰胺(TAA)及二乙基亞硝胺(DEN)購自日本TCI公司，四氯化碳(CCl4)購自武漢啟動子公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 膽總管結扎(bile duct ligation, BDL)誘導的小鼠肝纖維化模型：隨機選取20只小鼠分為2組，模型組15只，用質量濃度為100 g/L的水合氯醛溶液進行腹腔注射麻醉，開腹后游離膽總管進行雙重結扎并離斷，縫合腹腔；對照組5只，為假手術組，麻醉開腹后將膽總管游離，縫合腹腔。于4周后處死小鼠。

1.2.2 TAA誘導的小鼠肝纖維化模型：將另20只小鼠分為2組，模型組15只,將150 mg TAA溶于10 ml生理鹽水中配成15 mg/ml的溶液，以150 mg/kg的劑量腹腔注射，每周3次，連續(xù)8周，并分別于第2周、3周、4周、6周、8周時隨機處死小鼠2只；對照組5只，腹腔注射生理鹽水。

1.2.3 DEN+CCl4誘導的小鼠肝纖維化模型：將1雄3雌4只小鼠飼養(yǎng)至10周后合籠，將孕鼠單獨分籠，繁殖的小鼠隨機分為模型組15只，15 d大的小鼠以25 mg/kg的劑量腹腔注……