高通量基因測序在胎兒染色體非整倍體產前篩查中的應用

馬占忠 許紅雁 范舒舒 徐靜 劉玉蘭 陳偉娟 江玫玫

（汕頭大學醫學院附屬粵北人民醫院，廣東 韶關 512026）

染色體異常是新生兒出生缺陷的主要原因，最常見的有21-三體、18-三體、13-三體和性染色體異常。此類遺傳病尚無有效的治療方法，只能通過產前篩查和產前診斷來預防患兒的出生［1］?，F行的產前篩查和產前診斷方法存在一定的局限性［2］。應用高通量基因測序對母體外周血中的胎兒游離DNA進行無創產前基因篩查（noninvasive prenatal screening，NIPS）是產前篩查新技術［3］，與傳統血清學篩查及有創產前診斷相比，具有準確可靠、簡便快速和無創易接受等優點，在臨床上應用日益廣泛。本研究對3186名孕婦的NIPS結果進行分析，探討其臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2015年1月至2017年10月在粵北人民醫院就診，知情同意自愿進行NIPS檢測的3186例孕婦，年齡17～47歲，平均年齡30歲，孕周12～33周，平均孕周15周；所有孕婦在1年之內無輸血、移植、免疫治療等異體細胞輸入史。

1.2 方法

1.2.1 NIPS檢測 ①樣本采集及血漿分離：孕婦簽署知情同意書后，采集靜脈血5 ml置于專用游離DNA樣本保存管（康為世紀生產），室溫保存，96 h內分離血漿，4℃下1 600 g離心10 min，取上層血漿，于4℃下16 000 g離心10 min，上層血漿分裝于2 ml離心管，－80℃保存待檢。②基因測序：血漿經過DNA提取和文庫構建，采用華大基因BGISEQ500測序平臺進行基因測序分析。③結果判讀：利用華大基因NIFTY軟件計算染色體Z值，-3＜Z＜3為低風險，Z＞3時為高風險，1.96＜Z＜4時為灰區，重新建庫復查。胎兒DNA濃度＜3.5%時重新采血復查。

1.2.2 產前診斷 NIPS提示高風險的孕婦，經遺傳咨詢在知情同意后經有資質的醫師在B超引導下對孕16～24周行侵入性羊膜腔穿刺采集羊水或孕24周后采集臍血進行染色體核型和染色體微陣列分析（chromosomal microarray，CMA）?！?br>