慢性低O2高CO2對小鼠海馬細胞凋亡、caspase-3和p38 MAPK活性的影響

任惠明，王小同，袁海，康翰林

（1.寧波市第二醫院 康復醫學科，浙江 寧波 315010；2.溫州醫科大學附屬第二醫院 腦科康復中心，浙江 溫州 325027；3.合肥市第二人民醫院 康復醫學科，安徽 合肥 230011；4.贛南醫學院第一附屬醫院 神經內科，江西 贛州 341000）

慢性低O2高CO2普遍存在于慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）和阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征（obstructive sleep apnea syndrome，OSAS）等呼吸系統疾病患者中。COPD患者可伴有明顯認知功能障礙，增加COPD患者急性加重的風險，導致日?；顒邮芟?，增加住院率和病死率[1]。OSAS患者也存在認知功能損害，尤以記憶功能減退為突出表現[2]。慢性低O2高CO2模型可以模擬這類疾病的病理生理過程，進一步研究該類疾病引起的認知功能障礙[3-4]。已有研究發現海馬細胞凋亡可能是慢性低O2高CO2導致腦功能損害的重要機制之一[5]，但具體機制尚未明確。p38 MAPK屬于應激激活的蛋白激酶，參與了多種因素所致的神經細胞凋亡，是近些年研究的熱點[6]，caspase-3是細胞凋亡過程中最重要的蛋白酶之一。本研究通過建立慢性低O2高CO2小鼠模型，觀察海馬細胞凋亡以及p38 MAPK、caspase-3活性情況，初步探討慢性低O2高CO2模型小鼠海馬細胞的凋亡機制。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物：雄性C57BL/6小鼠24只，9～10月齡，體質量26～28 g，溫州醫科大學實驗動物中心SPF條件下繁殖，動物使用許可證號：wydy 2012-0079。

1.1.2 儀器和試劑：常壓低O2高CO2艙（溫州醫科大學肺心病研究室制），CYESIl型O2、CO2氣體測定儀（上海市嘉定學聯儀表廠），熒光顯微鏡（日本奧林巴斯公司），酶標儀（美國ABI公司）。兔抗鼠磷酸化p38 MAPK、辣根過氧化物酶（HRP）標記的羊抗兔二抗、β-tublin抗體均購自美國Cell Signal Technology公司，caspase-3活性測定試盒、細胞凋亡檢測試劑盒購自江蘇碧云天生物技術研究所。……