葛根素對(duì)2型糖尿病大鼠胰腺β細(xì)胞損傷的影響

陳秀芳，雷康福，董敏，鄭巧敏

（溫州醫(yī)科大學(xué)，浙江 溫州 325035，1.基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 生物化學(xué)教研室；2.生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心）

我國(guó)糖尿病的患病率高達(dá)9.7%，其中90%以上為2型糖尿?。╰ype 2 diabetes mellitus，T2DM）[1]。糖尿病不斷進(jìn)展的本質(zhì)是胰島素分泌功能的持續(xù)減退，初發(fā)患者診斷為糖尿病時(shí)β細(xì)胞功能已降低50%[2]。與正常人群相比，T2DM患者胰島β細(xì)胞數(shù)目明顯減少，凋亡明顯增加[3]。因此保護(hù)胰島β細(xì)胞功能，抑制其凋亡成為預(yù)防和治療T2DM的重要措施。葛根素（puerarin，Pue）是從傳統(tǒng)中藥葛根中提取的異黃酮化合物，被證實(shí)有降低血糖、保護(hù)心肌等作用[4-7]。本研究采用高脂飲食聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ）腹腔注射建立T2DM大鼠模型，觀察胰腺組織氧化應(yīng)激指標(biāo)、端粒長(zhǎng)度、沉默信息調(diào)節(jié)因子1（sirtuin 1，SIRT1）、解偶聯(lián)蛋白2（uncoupling protein 2，UCP2）及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)變化，探討葛根素對(duì)胰腺β細(xì)胞的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SPF級(jí)雄性SD大鼠30只，體質(zhì)量160～180 g，購(gòu)自浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)：SCXK（浙）2008-0033。

1.1.2 飼料：高脂飼料（60%脂肪，D12492）、普通飼料（10%脂肪，D12450J）購(gòu)自美國(guó)Research Diets公司。

1.1.3 主要藥物和試劑：STZ由美國(guó)Sigma公司提供；葛根素注射液（批號(hào)130902）由廣州白云山天心制藥股份有限公司提供；血糖測(cè)試紙、定量PCR試劑盒購(gòu)自瑞士Roche公司；糖化血紅蛋白（HbA1c）測(cè)定試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所；胰島素ELISA試劑盒購(gòu)自瑞典Mercodia公司；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、過氧化氫酶（Catalase，CAT）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）檢測(cè)試劑盒，RIPA裂解液由上海碧云天生物技術(shù)研究所提供；蛋白酶/磷酸酶抑制劑、BCA蛋白含量檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)Thermo Scientific公司；DNA提取試劑盒購(gòu)自德國(guó)Qiagen公司；……