殷玉敬 高輝 郭佳 高洋
環狀RNA(circular RNAs, circRNAs)廣泛地分布于人體各種組織,并在組織重塑、血管生成、胚胎形成以及腫瘤發生發展中起重要作用,環狀RNA(circRNA)是一類特殊的非編碼RNA分子,也是RNA領域最新的研究熱點[1]。與傳統的線性RNA不同,circRNA分子呈封閉環狀結構,不受RNA外切酶影響,表達更穩定,富含microRNA結合位點,可通過miRNA海綿的作用解除miRNA對其靶基因的抑制作用,升高靶基因的表達水平,這一作用機制被稱為競爭性內源RNA機制,在疾病中發揮著重要的調控作用[2,3]。
近年來,circRNAs在腫瘤的作用受國內外學者的關注被認為與腫瘤的發生發展密切相關,如circRNAs HIPK3可通過調控miR-379促進NCI-H1299和NCI-H2170體外增殖,circRNAs ITCH可通過Wnt/β-Catenin調控肺癌細胞體外增殖[4,5]。
肺癌是常見的惡性腫瘤之一,嚴重威脅著人類的健康,肺腺癌具有侵襲性強、預后差、多伴有淋巴結轉移及易復發等特點。我國是肺癌發病率和死亡率最高的國家之一,為了進一步闡明circUBAP2在肺腺癌發生發展的作用,本文研究circUBAP2在肺腺癌組織和正常肺組織中的表達差異,通過siRNA干擾circUBAP2表達研究其對肺癌A549細胞增殖、細胞周期和侵襲的影響,并初步分析其可能的分子機制。
1.1 材料 肺腺癌和相對應的30例正常肺組織均通過病理學證實,取自包頭腫瘤醫院,并經液氮保存備用。人肺癌A549細胞購自中國科學院典型培養物保藏委員會細胞庫(上海);RPMI-1640培養基、胎牛血清、胰蛋白酶液、TRIzol及轉染試劑Lipofectamine 3000均購自Life Technology公司(美國);CCK-8試劑購自江蘇碧云天生物技術有限公司(中國);報告基因質粒pGL3-basic購自Promega公司(美國);……