乳腺癌中BCL—6、ZEB2、PTEN與VEGF—D的表達及其意義

吳國標+康凱夫+劉自光

【摘要】 目的 探討B細胞淋巴瘤蛋白-6（BCL-6）、E盒結合鋅指蛋白2（ZEB2）、蛋白酪氨酸磷酸酶基因（PTEN）以及血管內皮生長因子-D（VEGF-D）在乳腺癌組織中的表達情況及其臨床意義。方法 95例術前未做化療的乳腺癌患者（Ⅰ期18例， Ⅱ期34例， Ⅲ期29例， Ⅳ期14例）作為乳腺癌組， 60例乳腺良性增生病變患者作為良性病變組。比較兩組患者免疫組化檢測其BCL-6、ZEB2、PTEN與VEGF-D表達情況。結果 乳腺癌組患者BCL-6、ZEB2與VEGF-D表達陽性率分別為56.84%、50.53%、62.11%， 高于良性病變組的18.33%、21.67%、15.00%；PTEN表達陽性率為12.63%， 低于良性病變組的76.67%， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。BCL-6、ZEB2與VEGF-D表達陽性率與乳腺癌組病理分期呈正相關（r=0.572、0.431、0.794， P<0.05）， PTEN表達陽性率與乳腺癌組病理分期呈負相關（r=-0.353， P<0.05）。結論 乳腺癌患者BCL-6、ZEB2與VEGF-D表達升高， PTEN表達降低， 對其進行監測， 能為其診斷及病情評估提供參考。

【關鍵詞】 乳腺癌；B細胞淋巴瘤蛋白-6；E盒結合鋅指蛋白2；蛋白酪氨酸磷酸酶基因；血管內皮生長因子-D；臨床價值

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.22.022

大量研究證實， BCL-6、ZEB2、PTEN與VEGF-D在乳腺癌患者的表達與健康體檢者存有差異， 為乳腺癌的早期診斷提供了依據[1， 2]。影響乳腺癌患者預后的關鍵因素是乳腺腫瘤轉移及浸潤， 而隨著對腫瘤標記物認識的加深， 尋找合適的腫瘤標記物不僅有助于乳腺癌的早期診斷及治療， 還有助于預測乳腺癌生物學行為， 進而提高患者生存率。本研究通過對比， 探討了乳腺癌患者血清BCL-6、ZEB2、PTEN與VEGF-D表達及臨床意義， 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2012年1月～2016年12月在本院接收的術前未做化療的95例乳腺癌患者作為乳腺癌組， 年齡35～69歲， 平均年齡（50.6±12.3）歲， 腫瘤直徑1～7 cm， 平均腫瘤直徑（3.61±1.08）cm。同期接收的60例乳腺良性增生病變患者作為良性病變組， 年齡34～71歲， 平均年齡（50.8±12.1）歲。兩組患者年齡等一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05）， 具有可比性。納入標準：①經兩位高級病理醫生病理檢查確診；②女性， 有完整的資料；③術前未接受過抗腫瘤治療。排除標準：排除標準：①重要臟器嚴重功能不全者；②免疫系統疾病者；③血液感染者。

乳腺癌組患者TNM分期（按92分期標準）：Ⅰ期18例， 年齡37～68歲， 平均年齡（50.4±12.5）歲；Ⅱ期34例， 年齡35～69歲， 平均年齡（50.8±12.1）歲；Ⅲ期29例， 年齡36～65歲， 平均年齡（50.5±12.3）歲；Ⅳ期14例， 年齡36～69歲， 平均年齡（50.6±12.0）歲。四分期患者一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 兩組患者均需要被醫生告知詳細的檢查過程， 了解整個實驗， 以便于更好的配合， 保障被檢者的知情同意權。手術治療切除病變組織后， 用石蠟組織切片機LEICA RM2255型將乳腺癌及良性病變組織石蠟包埋標本各重切5 張， 每張厚3 μm， 其中1張做常規HE染色， 其余 4 張用于免疫組化檢測BCL-6、ZEB2、PTEN與VEGF-D表達情況。相關試劑盒、即用型免疫組化MaxVisionTM檢測試劑盒以及DAB顯色液購自于武漢博士德生物科技有限公司。嚴格按相關試劑盒說明書進行操作。

1. 3 統計學方法 采用SPSS23.0統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗或F檢驗；計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗或秩和檢驗。直線相關性分析采用Spearman檢驗， P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2. 1 兩組BCL-6、ZEB2、PTEN與VEGF-D表達陽性率比較 乳腺癌組患者BCL-6、ZEB2與VEGF-D表達陽性率高于良性病變組， PTEN表達陽性率低于良性病變組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 乳腺癌患者BCL-6、ZEB2、PTEN、VEGF-D表達陽性率與病理分期相關性分析 BCL-6、ZEB2與VEGF-D表達陽性率與乳腺癌組病理分期呈正相關（r=0.572、0.431、0.794， P<0.05）， PTEN表達陽性率與乳腺癌組病理分期呈負相關（r=-0.353， P<0.05）。見表2。

3 討論

乳腺癌為臨床常見的一種惡性腫瘤， 據統計[3]， 其在我國女性人群中的發生率高達， 20/10萬～30/10萬， 且近年來其發病率呈現上升趨勢， 具有較高發生率與死亡率， 已成為社會廣泛關注健康問題。BCL-6是淋巴系統功能調節的重要因子之一， 屬于BTB/POZ轉錄因子家族， ZEB2是一種轉錄因子， 屬于鋅指結構轉錄因子中的ZEB家族， BCL-6與ZEB2均具有抑制核轉錄、阻止細胞分化凋亡等作用；VEGF-D是由二硫鍵連接的同源二聚體糖蛋白組成的促血管生成因子， 主要功能為激活血管內皮細胞、刺激腫瘤血管生成， 而PTEN是具有雙特異性磷酸酶活性的抑癌基因， 該基因缺失會使細胞分裂無限進行形成癌癥[4-6]。通過檢測BCL-6、ZEB2、PTEN與VEGF-D在乳腺組織的表達有助于乳腺疾病， 尤其是乳腺癌的診斷， 本研究中乳腺癌組患者BCL-6、ZEB2與VEGF-D表達陽性率顯著高于良性病變組， PTEN表達陽性率顯著低于良性病變組， 差異有統計學意義（P<0.05）。， 進一步證實了BCL-6、ZEB2、PTEN與VEGF-D在乳腺良惡性病變區別診斷中具有一定的應用價值。

浸潤、轉移是惡性腫瘤患者治療效果較差、病死率高的主要原因， 是一個多步驟的復雜過程。有研究表明[7， 8]， BCL-6與ZEB2具有促進細胞發育、增殖等作用， PTEN缺失會造成細胞周期縮短、細胞大量遷移粘附， 此外， 惡性腫瘤作為一種血管依賴性病變， VEGF-D高表達會導致持續的、不可控制的血管生成， 因此， 其與腫瘤的進展密切相關。本研究中BCL-6、ZEB2與VEGF-D表達陽性率與乳腺癌組病理分期呈正相關（P<0.05）， 而PTEN表達陽性率與乳腺癌組病理分期呈負相關（P<0.05）， 提示其可以作為判斷乳腺癌進展的指標。研究中發現對于腫瘤生物標記物尚未形成統一的、權威性的量化標準， 因此應擴大樣本量進行深入研究使其更加規范化。

綜上所述， 乳腺癌患者BCL-6、ZEB2與VEGF-D表達升高， PTEN表達降低， 對其進行監測， 能為其診斷及病情評估提供參考。

參考文獻

[1] 鄭麗， 趙敏， 昂琳， 等. 乳腺癌中BCL-6與ZEB2的表達及其意義. 臨床與實驗病理學雜志， 2017， 33（1）：50-51.

[2] 趙云霞， 劉恒超， 馬琳， 等. 乳腺癌組織中血管內皮生長因子-D 和 PTEN 的表達及臨床意義. 蚌埠醫學院學報， 2015， 40（6）：704-707.

[3] 令狐銳霞， 司文， 李瑩， 等. 3846例乳腺癌流行病學及臨床病理學分析. 解放軍醫學院學報， 2015， 36（10）：1017-1022.

[4] 馬蓉， 吳建中， 仲悅嬌， 等. 彌漫大B細胞淋巴瘤血清VEGF和β2-MG蛋白與Bcl-6和Ki-67表達臨床相關性分析. 中華腫瘤防治雜志， 2014， 21（17）：1343-1346.

[5] 于曉黎. ZEB2在鼻咽癌中抑制增殖、凋亡， 誘導EMT并參與維持“干性”. 南方醫科大學， 2013.

[6] 宋潤波， 董耀， 張靜， 等. 甲狀腺乳頭狀癌中血管內皮生長因子C和 PTEN 蛋白的表達及意義. 現代中西醫結合雜志， 2014， 23（18）：1962-1963， 1966.

[7] 馮慧琳， 譚明子， 朱連成， 等. BCL6與Lewis y在卵巢漿液性腫瘤中的表達及其臨床意義. 現代腫瘤醫學， 2016， 24（13）：2127-2132.

[8] 王芳， 張瑰紅， 丁凱陽， 等. EBER、PTEN和VEGF在血管免疫母T細胞淋巴瘤中的表達及其臨床病理學意義. 中國實驗血液學雜志， 2015， 23（3）：663-668.

[收稿日期：2017-03-31]