惠州地區22 671例孕婦孕早中期唐氏綜合征產前篩查結果分析

陳劍虹，梁 艷，李 輝，李彩霞，董 慧，閆 梅，徐志邦，黃紫娟

(廣東省惠州市第一婦幼保健院產前診斷中心，廣東 惠州 516007)

惠州地區22 671例孕婦孕早中期唐氏綜合征產前篩查結果分析

陳劍虹，梁 艷，李 輝，李彩霞，董 慧，閆 梅，徐志邦，黃紫娟

(廣東省惠州市第一婦幼保健院產前診斷中心，廣東 惠州 516007)

目的 分析惠州地區22 671例唐氏綜合征血清學篩查結果，評價孕早期和孕中期產前篩查胎兒染色體異常的效率。方法 對2015年1月至2016年9月來自廣東省惠州市第一婦幼保健院產前診斷中心產檢的22 671例單胎妊娠孕婦進行血清學篩查，計算篩查效率，對篩查結果異常者進行產前診斷并分析胎兒染色體核型異常結果。結果 在22 671例受檢孕婦中，共篩查出21-三體綜合征高風險1152例，18-三體綜合征高風險33例，神經管畸形(NTD)高風險38例。其中孕早期21-三體綜合征的陽性率為5.83%(765/13 109)，18-三體綜合征陽性率為0.21%(28/13 109)，孕中期21-三體綜合征陽性率為4.05%(387/9 562)，18-三體綜合征陽性率為0.05%(5/9 562)，NTD的陽性率為0.40%(38/9 562)。檢出21-三體綜合征10例、18-三體綜合征4例、13-三體綜合征1例，其他染色體異常3例。其中孕早期占77.78%(14/18)，孕中期占22.22%(4/18)。結論 孕早期和孕中期血清學產前篩查可有效降低出生缺陷，重視孕早期產前篩查有利于早期診斷胎兒染色體異常。

唐氏綜合征；產前篩查；染色體異常；結果分析

唐氏綜合征血清學產前篩查是一種簡便、經濟，高效的檢測方法，在優生優育方面發揮了重要的作用。目前，唐氏綜合征血清學產前篩查都是針對21-三體綜合征(down’s syndrome，DS)、18-三體綜合征(Edward syndrome，ES)和神經管缺陷(neural tube defects，NTD)等異常胎兒進行的母親血清標志物的篩查。按孕期的發展階段可分為孕早期篩查、孕中期篩查和孕早中期聯合篩查。本研究對9～13+6周孕婦進行血清妊娠相關蛋白A(pregnancy-associated plasma protein A，PAPPA)和游離人絨毛膜促性腺激素B亞單位(free B-human chorionic gonadotrophin，free β-hCG)的孕早期二聯篩查和14～20+6周進行血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)、β-hCG和游離雌三醇(unconjugated estriol，uE3)的孕中期三聯篩查，用Lifecycle 4.0風險分析軟件計算DS、ES和NTD的風險概率，異常者進行遺傳咨詢、產前診斷和隨訪，現將結果分析如下。

1資料與方法

1.1一般資料

收集2015年1月至2016年9月在廣東省惠州市第一婦幼保健院產前診斷中心進行孕早期篩查孕婦共13 109例，以及只做孕中期篩查的孕婦共9 562例。篩查的早期孕周為9～13+6周，中期孕周為14～20+6周。兩組孕婦均為單胎妊娠，排除輔助妊娠，在申請單上詳細記錄孕婦出生年月、末次月經、體重、B超信息、是否吸煙、妊娠史和家族史等，對所有接受篩查的孕婦進行篩查知情告知并簽署知情同意書。

1.2儀器與試劑

主要儀器由芬蘭PerkinElmer Wallac公司提供的1235 Auto DELFIA全自動時間分辨熒光免疫分析系統。風險計算軟件為芬蘭PE公司提供的lifecycle 4.0。血清 PAPPA 、Free β-hCG、AFP/ Free β-hCG和uE3檢測試劑由芬蘭PE公司提供。

1.2.1孕周的確定

根據申請單上提供的B超信息，所有孕婦以胎兒的頭臀徑或雙頂徑確定的B超孕周為準。

1.2.2標本采集

抽取孕婦空腹非抗凝靜脈血3mL，2h內分離血清保存于4 ℃冰箱，7d內完成檢測。孕早中期血清標志物的測定用芬蘭PE公司提供的1235 Auto DELFIA全自動時間分辨熒光免疫分析系統和相關試劑盒測定，依照說明書進行操作。風險評估根據孕婦血清中的PAPPA 、Free β-hCG、AFP/Free β-hCG和uE3的濃度值，結合孕婦年齡、孕周和體重等因素，用Lifecycle 4.0軟件進行風險評估。高風險的標準：21-三體綜合征的cut-off值≥1：250；18-三體綜合征的cut-off值≥1：350；神經管畸形，AFP MoM值≥2.5。

1.3產前診斷和隨訪

對風險概率異常的孕婦做羊水或臍帶血胎兒染色體核型分析，對風險概率為高風險、臨界風險和單項指標MoM值升高的孕婦進行遺傳咨詢、產前診斷，對NTD高風險的孕婦定期復查B超，以上情況均定期跟蹤隨訪。

1.4統計學方法

統計分析將所有數據錄入Excel表，應用SPSS 21.0統計學軟件對篩查結果進行統計學分析，計算篩查效率值。

2結果

2.1血清學篩查結果

22 671例受檢孕婦(孕早期13 109例，孕中期9 562例)的篩查結果為：21-三體綜合征高風險1 152例，真陽性10例，假陰性2例；18-三體綜合征高風險33例，真陽性4例，假陰性 1例；NTD高風險38例，真陽性 1例，見表1。

表1 22 671例孕婦孕早中期血清學產前篩查分布情況(n)

Table 1 Distribution of prenatal serological screening in first and second trimester in 22 671 pregnant women (n)

2.2血清學篩查效率分析

本血清學篩查體系包括早期孕婦13 109例和中期孕婦9 562 例，篩查效率見表 2。

表2 血清學篩查效率(%)

2.3孕婦各年齡段血清學產前篩查情況

將孕婦年齡分成<35歲、35～39歲和≥40歲三組，21-三體的陽性率分別為3.57%(742/20 770)、17.90%(297/1 659)和46.69%(113/242)，18-三體的陽性率分別為0.08%(17/20 770)、0.72%(12/1 659)和(4/242)1.65%，見表3。

表3 孕婦各年齡段血清學產前篩查情況

Table 3 Status of prenatal serological screening in pregnant women in different ages

2.4胎兒染色體異常核型結果

經羊水或臍帶血染色體核型分析診斷染色體異常共18例(孕早期14例，孕中期4例)。其中21-三體綜合征10例，18-三體綜合征4例，13-三體綜合征1例，其他染色體異常3例，見表4。

2.5假陰性病例分析

22 671例孕婦經血清學篩查后共有3例假陰性病例，其中孕早期和孕中期各1例47，XN+21，DS風險率分別為1：3 467和1：7 045。另外，孕中期有1例47，XN+18，ES風險率為1：648，見表5。

表4 胎兒染色體異常核型分布情況

Table 4 Distribution of fetal chromosomal abnormalities

序號孕周(w)DS風險率(1:)ES風險率(1:)異常染色體類型110+620330047,XN+21212+220304447,XN+21312+4694444847,XN+21412+120600447,XN+21516+2668278847,XN+21612+420135447,XN+21718+010910000047,XN+21815+51272677047,XN+21912+520379747,XN+211010+326119947,XN+211111+4202047,XN+181216+41432047,XN+181311+615774647,XN+181413+025723147,XN+181511+6206047,XN+131613+32494627546,XN,del(x)(q26)1712+23329827mos46XN,t(6:19)(p21;q13.10)/46XN1812+5834100000mos46,XN,t(5:11)(q22:q23)/46,XN

表5 假陰性病例分析

Table 5 Analysis on false negative cases

序號孕周(W)DS風險率(1:)ES風險率(1:)異常染色體類型112+4346710000047,XN+21215+370454297047,XN+21316+6130964847,XN+18

3討論

3.1孕早期血清學篩查意義

本研究包括孕早期和孕中期受檢孕婦共22 671例。其中，13 109例孕早期(PAPPA +β-hCG)二聯篩查高風險共793例，陽性率為6.05%，與Li 等[1]報道的孕早期篩查5.80%的陽性率相近。然后經產前診斷檢出21-三體綜合征7例、18-三體綜合征3例和其他染色體異常2例，未檢出的1例假陰性病例核型為47，XN+21。21-三體綜合征的檢出率為87.50%，假陽性率為5.79%。Baer等[2]在大規模唐氏篩查研究中報道，孕婦在早孕期開始篩查，21-三體和18-三體的檢出率可達到90%以上。與本研究不同的是，Baer等將頸部透明層(nuchal translucency，NT)厚度納入孕早期評估，即一站式孕早期唐氏篩查。目前在孕早期加入NT來評估的一站式唐氏篩查方案已經成為國外和國內大型醫療機構的最普遍篩查方式之一。據報道，孕早期一站式唐氏篩查將假陽性率控制在5%～7%，檢出率可高達82%～95%[3]。Kagan等在研究中使用60個獲得胎兒醫學基礎證書的超聲醫師測量的NT值進行孕早期一站式唐氏篩查，將假陽性率控制在3%以內，21-三體的檢出率高達90%，并提出使用胎兒NT厚度來有效篩查染色體異常需要訓練有素并取得相應資質的超聲醫師來完成。美國婦產科醫師協會(American College of Obstetricians and Gynecologists，ACOG)也建議將孕早期一站式唐氏綜合征血清學篩查作為普通人群的常規篩查，而孕中期篩查則在沒有相關資質的超聲醫師測量NT的情況下使用。因此，進行孕早期一站式唐氏篩查，NT測量的準確性是關鍵。在本研究中用非一站式孕早期篩查的檢出率雖然能達到87.50%，隨著本院人才隊伍的建設和產前篩查程序的規范，已開始使用部分有相關遺傳學資質的超聲醫師審核后的NT，逐漸有序地開孕早期一站式唐氏篩查。

3.2孕中期血清學篩查意義

本研究9 562例孕中期篩查高風險共430例，陽性率為4.50%。經產前診斷檢出21-三體綜合征3例，18-三體綜合征1例，NTD 1例，未檢出的2例假陰性病例分別為21-三體和18-三體各1例。楊嵐等[4]也報道在孕中期的篩查陽性率為4.91%，結果與我們的相近。有文獻研究顯示，將孕中期三聯篩查的假陽性率控制在5%～9%時，檢出率為69%～85%。在本研究中，孕中期21-三體綜合征的檢出率為75%，而假陽性率低至4.02%。我國是世界上最大的發展中國家，人口基數大，在大城市和一些發達地區的醫院已經使用NT常規開展孕早期一站式唐氏篩查。然而，在一些中小城市、鄉鎮尤其是發展較為落后的地區，沒有足夠相關資質的超聲醫師測量NT的情況下，使用孕中期血清學篩查仍然很普遍，也是至關重要的。此外，Sebire等在1997年的研究中提出在孕14周前母親血中的AFP水平不能用于NTD的評估， NTD的篩查也需要在孕中期進行。雖然用無創DNA產前檢測(noninvasive prenatal testing，NIPT)來檢測胎兒非整倍體染色體異常比血清學唐氏篩查有更高的靈敏度和特異度，但由于技術成本高，檢測費用昂貴，普及程度不如后者。

3.3孕婦年齡對篩查影響與胎兒染色體異常核型分布情況

本研究將孕婦年齡分層后分析，在<35歲、35～39歲和≥40歲三組年齡段中，21-三體的陽性率分別為3.60%、18.04%和47.88%，18-三體的陽性率分別為0.08%、0.73%和1.69%，特別是≥35歲的孕婦，陽性率隨年齡的增大呈顯著增加趨勢。Loane等[5]調查了歐洲多個國家1990—2009年間21-三體、18-三體和13-三體綜合征的流行增加主要是由于高齡產婦數量增加所致。國內也有研究報道35歲以上年齡段孕婦的產前陽性診斷率顯著高于小于35歲以下的孕婦[6]。以上研究表明常染色體三體綜合征容易流行于高齡妊娠中，應重視對高齡孕婦的產前篩查與診斷。在胎兒染色體異常核型結果中，檢出21-三體綜合征10例、18-三體綜合征4例、13-三體綜合征1例，其他染色體異常3例。孕早期占77.78%(14/18)，孕中期占22.22%(4/18)。從本研究結果可以看出，孕早期篩查更利于早期檢測出胎兒染色體異常。有研究分析100例DS胎兒的臨床資料，結果顯示在妊娠早期產前篩查有助于早期診斷DS[7]。孕早期篩查不僅有利于染色體異常的早期診斷，還可使患者選擇更早更安全的終止妊娠的方式。因此，應加強健康教育宣傳，提高出生缺陷的防范意識，重視孕早期的唐氏綜合征產前篩查。此外，從本研究染色體異常結果可以看出21-三體是最常見的染色體畸形，占總染色體異常的55.56%(10/18)，其次是18-三體綜合征，占總異常的22.22%(4/18)。

3.4假陰性病例分析

唐氏綜合征血清學篩查有一定的局限性。首先，有假陰性現象的存在。假陰性有兩種情況，一是不能排除孕婦在妊娠過程自然流產或人為中止妊娠中一些染色體異常的假陰性病例的存在，這是大多數研究存在的共有現象[2]。二是雖然篩查不是高風險，但有可能存在年齡、臨界風險、單項指標MoM值偏高和B超軟指標的等的異常，這些情況同樣需要重視。在本研究中，3例假陰性病例就存在不同程度的以上指標的異常，特別是其中的1例18-三體，在孕中期經B超檢查發現胎兒呈典型的多發性結構異常，經產前診斷后證實引產。中孕期超聲常規對胎兒結構發育進行排查是極其重要的。因此在臨床上盡管血清學篩查不是高風險，仍然不能排除患病可能，還應結合其他指標綜合分析，及時進行遺傳咨詢、產前診斷。其次，由于血清學篩查軟件本身的缺陷，其他染色體異常只能以21、18-三體和NTD高風險、臨界風險或單項指標MoM值偏高的形式表現出來[8]。本研究如表4中的13-三體綜合征、其它如缺失和易位的染色體異常有3例以21-三體綜合征高風險，1例以單項指標的MoM值偏高的形式表現出來。再次，血清學產前篩查的質量指標有檢出率、假陽性率、陽性預測值等，得到這些質量指標離不開全面的隨訪統計工作。現行的行業標準對于隨訪工作有明確的要求，但落實起來難度很大[9]。此外，不僅對血清學篩查異常結果，對B超軟指標異常結果的隨訪也非常重要，對于血清學篩查提示陰性而B超提示異常者需引起重視，及時啟動遺傳咨詢程序，必要時產前診斷，最大程度減少非整倍體胎兒的娩出。

綜上所述，隨著我國二孩政策的開放，妊娠人數的增加，特別是高齡孕婦，出生缺陷的背景風險增高，結合我國國情，目前孕早、中期唐氏綜合征血清學篩查仍是基層醫院的一線篩查手段。臨床上應重視對孕早期孕婦的血清學篩查，做好實驗室的質控和追蹤隨訪，結合超聲影像學等多種手段排查胎兒非整倍體異常，提高檢出率，降低假陰性，盡早診斷，早干預，對降低缺陷患兒出生具有重要的臨床意義。

[1]Li B,Sahota D S,Lao T T,etal.Applicability of first-trimester combined screening for fetal trisomy 21 in a resource-limited setting in mainland China[J].BJOG,2016,123(Suppl 3):23-29.

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[3]Park S Y,Jang I A,Lee M A,etal.Screening for chromosomal abnormalities using combined test in the first trimester of pregnancy[J].Obstet Gynecol Sci,2016,59(5): 357-366.

[4]楊嵐,趙麗,江靜穎,等.孕中期血清學篩查在產前診斷及妊娠結局預測中的應用[J].南方醫科大學學報,2015,35(7):1059-1062,1072.

[5]Loane M,Morris J K,Addor M C,etal.Twenty-year trends in the prevalence of Down syndrome and other trisomies in Europe: impact of maternal age and prenatal screening[J].Eur J Hum Genet, 2013,21(1):27-33.

[6]段利利,王林,吝蓓蕾,等.血清標志物及年齡篩查與羊水染色體的相關性[J].中國婦幼健康研究,2015,26(6):1133-1135.

[7]甄理,楊昕,李東至,等.100例唐氏綜合征產前診斷結果分析[J].中華圍產醫學雜志,2014,17(1):50-52.

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[9]邊旭明,蔣宇林.重視唐氏綜合征產前篩查的質量控制和評價[J].實用婦產科雜志,2014,30(2): 81-83.

[專業責任編輯：李春芳]

Result analysis of prenatal serological screening for Down’s syndrome in first and second trimester in 22 671 pregnant women in Huizhou region

CHEN Jian-hong,LIANG Yan, LI Hui, LI Cai-xia, DONG Hui, YAN Mei, XU Zhi-bang, HUANG Zi-juan

(Prenatal Diagnosis Center, Huizhou First Women and Children’s Hospital, Guangdong Huizhou 516007, China)

Objective To analyze results of prenatal serological screening for Down’s syndrome in 22 671 pregnant women in Huizhou region and to evaluate the efficiency of prenatal screening for fetal chromosomal abnormalities in first and second trimester. Methods A total of 22 671 women with singleton pregnancy receiving check-up in prenatal diagnosis center in Huizhou First Women and Children’s Hospital from January 2015 to September 2016 accepted prenatal serological screening. Screening efficiency was observed. Prenatal diagnosis was performed for patients with abnormal results and fetal chromosomal abnormalities were analyzed. Results Of 22 671 pregnant women screened, 1 152 cases were detected with high risk of trisomy 21, 33 cases with high risk of trisomy 18, and 38 cases with high risk of neural tube defects (NTD). In first trimester, positive rate was 5.83% (765/13 109) for trisomy 21 and 0.21% (28/13 109) for trisomy 18 respectively. Positive rates of trisomy 21, trisomy 18 and NTD in second trimester were 4.05% (387/9 562), 0.05% (5/9 562) and 0.40% (38/9 562), respectively. In all screened patients, 10 cases of trisomy 21, 4 cases of trisomy 18, 1 case of trisomy 13, and 3 cases of other chromosome abnormalities were identified, among which 77.78% (14/18) was detected in first trimester and 22.22% (4/18) in second trimester. Conclusion Prenatal serological screening in first and second trimester can effectively reduce birth defects, and paying attention to first trimester screening is helpful for early diagnosis of fetal chromosomal abnormalities.

Down’s syndrome; prenatal screening; chromosomal abnormalities; result analysis

2016-12-19

陳劍虹(1973-)，女，副主任醫師，博士，主要從事產前診斷與遺傳咨詢的研究。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.06.032

R714

A

1673-5293(2017)06-0713-04