孕期葉酸攝入與MTHFR基因多態性對產后抑郁的影響

李引弟，岳紅云，李 華

(1.延安大學附屬醫院產科，陜西 延安 716000；2. 西安交通大學醫學院第二附屬醫院普外科，陜西 西安 710004)

孕期葉酸攝入與MTHFR基因多態性對產后抑郁的影響

李引弟1，岳紅云1，李 華2

(1.延安大學附屬醫院產科，陜西 延安 716000；2. 西安交通大學醫學院第二附屬醫院普外科，陜西 西安 710004)

目的 探討葉酸攝入量與亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因多態性與產后抑郁的關系。方法 將2014年1月至2016年6月之間來延安大學附屬醫院產科進行產檢的800例孕婦納入本項研究，采用開放式問卷調查的方式收集妊娠12周和28周婦女服用葉酸的信息，通過PCR-RFLP檢測MTHFR基因 C677T和A1298C多態性。于產后8周通過愛丁堡產后抑郁量表(EPDS)進行產后抑郁診斷。統計分析葉酸攝入與MTHFR C677T和A1298C基因多態性與產后抑郁的關系。結果 800例受試者中產后抑郁癥患者218例，正常582例。產后抑郁婦女與正常婦女妊娠期間每天的葉酸攝入量和不同時間補充葉酸無明顯差異，但是產后抑郁婦女血清葉酸水平顯著低于正常妊娠婦女(χ2=15.76，P<0.001)。兩組受試者MTHFR C677T和A1298C多態性位點的基因型頻率間差異存在統計學意義，其中雜合子CT(χ2=13.67，P<0.01)、AC(χ2=3.39，P=0.02)和純合子TT(χ2=8.65，P<0.01)、CC(χ2=15.18，P<0.01)是產后抑郁發生的高風險因子。此外，不同MTHFR C677T和A1298C基因型(CC、CT、TT和AA、AC、CC)產后抑郁的婦女在孕期攝入的葉酸量、不同時間補充葉酸和血清葉酸水平無明顯差異(χ2值為0.07～2.79，均P>0.05)。結論 低葉酸攝入量和不同時間補充葉酸不是產后抑郁發病的風險因素，但葉酸水平與MTHFR C677T和A1298C基因型是產后抑郁發病的獨立風險因素。

產后抑郁；葉酸；亞甲基四氫葉酸還原酶；基因多態性

產后抑郁嚴重危害產婦的身心健康，隨著人們對圍產期婦女健康觀念的不斷改變，產婦常見的抑郁和焦慮得到了一定程度的重視與關注[1-2]。有研究表明低葉酸水平與抑郁癥有關，一些臨床試驗也稱葉酸單藥或者結合抗抑郁藥物治療抑郁癥有一定的療效[3-5]。但是一些研究認為低葉酸水平與抑郁無關[6-8]。如果低葉酸水平是產后抑郁發生的重要因素，那么亞甲基四氫葉酸還原酶(Methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR) 的基因多態性也應與抑郁癥的發病有關。MTHFR在葉酸代謝通路中將5,10-亞甲基四氫葉酸轉化為5-甲基四氫葉酸，5-甲基四氫葉酸可以進一步進入甲基傳遞通路，通過同型半胱氨酸的重新甲基化為DNA甲基化和蛋白質甲基化提供甲基并且使血液中的同型半胱氨酸水平保持在一個較低的水平，這就可能影響機體情緒[8-9]。因此，本研究探討了葉酸攝入和亞甲基四氫葉酸還原酶MTHFR C677T和A1298C基因多態性與產后抑郁的關系。

1材料與方法

1.1資料來源

將2014年1月至2016年6月之間來延安大學附屬醫院產科進行產檢的800例孕婦納入本項研究，且參與者均為初產婦，分娩后8周參與抑郁癥檢測，嬰兒存活時間>12個月。排除產前具有神經、精神障礙的，且不配合調查的患者。該項研究通過醫院道德倫理委員會批準。

1.2葉酸檢測

葉酸攝入量檢測：采用開放式問卷調查的方式，收集妊娠8周和20周婦女服用葉酸的信息[9]。無論妊娠婦女是單獨服用葉酸還是與鐵一起服用，都納入本項研究。

葉酸水平檢測：各組受試婦女孕12周，取晨起空腹肘靜脈血5mL，分離血清，在Roche E170電化學發光分析儀上檢測葉酸水平，血清葉酸正常值參考范圍4.50～35.00nmol/L。

1.3MTHFR基因多態性檢測

分別采取每例受試者全血2mL，使用苯酚-氯仿法從全血中提取基因組DNA。通過PCR-RFLP檢測MTHFR基因 C677T和A1298C多態性。聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction，PCR)反應體系：1μL DNA模板，1μL上游引物和1μL下游引物，25μL Master Mix，21μL ddH2O；引物序列和擴增條件[10]如表1所示，擴增結束后，對PCR擴增產物進行酶切，37℃孵育2h，進行1.5%瓊脂糖凝膠電泳，然后分析MTHFR基因多態性。

表1 2個SNPs位點引物序列和擴增條件

1.4抑郁癥檢測

由于產后抑郁癥尚無統一的診斷標準，我們采用現階段公認的愛丁堡產后抑郁量表(Edinburgh postnatal depression scale，EPDS)對產后8周的婦女進行診斷。EPDS包括10項調查內容，每項內容分4級評分(0，1，2，3)。10個項目的總和為受試者的總得分，12～13分為患有不同程度的抑郁性疾病，≥13分為產后抑郁癥。

1.5統計學方法

2結果

2.1妊娠婦女基本特征與產后抑郁癥的關系

在800例受試者中產后抑郁癥患者218例，正常582例。妊娠婦女的基本特征對產后EPDS得分沒有明顯影響，如年齡、文化程度、孕前身體質量指數(body mass index，BMI)、胎兒性別和分娩方式。但是我們發現胎兒的性別對產后抑郁的影響較其他因素相對明顯(P=0.05)，見表2。

表2 妊娠婦女基本因素對抑郁癥得分的影響

2.2葉酸攝入量和葉酸水平與產后抑郁的關系

產后抑郁婦女與正常婦女妊娠期間每天的葉酸攝入量無明顯差異(P=0.30)。兩組受試者在妊娠12周時補充葉酸(P=0.68)、在妊娠28周補充葉酸(P=0.54)及在12和28周同時補充葉酸無明顯差異(P=0.63)。這就表明葉酸的攝入量與補充時間對產后抑郁的發病沒有影響。但是，產后抑郁婦女與正常婦女妊娠12周時體內葉酸水平存在顯著性差異(P<0.001)，85.78%(187例)病例組婦女血清葉酸水平<4.50nmol/L，97.42%(567例)對照組婦女血清葉酸水平在4.50～35.00 nmol/L之間，見表3。

Table 3 Effect of different folic acid intake and folic acid levels on postpartum expression[±S,n(%)]

注:食品頻率調查問卷(foodfrequencyquestionnaire，FFQ)。

2.3MTHFR基因多態性與產后抑郁的關系

病例組和對照組的MTHFR基因C677T和A1298C的基因型頻率如表4所示，兩組的C677T和A1298C多態性位點的基因型頻率間差異存在統計學意義，其中雜合子CT(P<0.01)、AC(P=0.02)和純合子TT(P<0.01)、CC(P<0.01)是產后抑郁發生的高風險因子，C677T和A1298C基因型分布頻率均符合Hardy-Weinberg平衡定律，見表4。

表4 不同的MTHFR基因(C677T和A1298C)的基因型頻率對產后抑郁的影響[n(%)]

Table 4 Effect of genotype frequency of MTHFR gene(C677T and A1298C) on postpartum depression[n(%)]

2.4混雜因素分析

混雜因素(葉酸攝入量、不同的補充時間和血清葉酸水平)對不同MTHFR基因型產后抑郁婦女的影響分析顯示，不同MTHFRC677T和A1298C基因型(CC、CT、TT和AA、AC、CC)產后抑郁的婦女在孕期攝入的葉酸量、不同時間補充葉酸和血清葉酸水平無明顯差異(P>0.05)。這就表明不同MTHFRC677T和A1298C基因型導致婦女產后抑郁不受孕期葉酸攝入量、補充時間和血清葉酸水平的影響，是婦女產后抑郁的獨立影響因素，見表5。

SNP葉酸攝入量(FFQ)(μg/d)妊娠12周補充葉酸妊娠28周補充葉酸妊娠12和28周補充葉酸血清葉酸水平(nmol/L)MTHFRC677T CC(n=97)298.72±47.2289(91.75)17(17.53)9(9.28)3.60±0.76 CT(n=93)275.31±43.8386(92.47)15(16.13)8(9.68)3.31±0.27 TT(n=28)287.63±53.8125(89.29)4(14.29)2(7.14)2.93±0.92χ2/t0.320.740.380.540.07P0.770.100.680.292.32MTHFR1298C AA(n=86)301.62±57.3179(91.86)14(16.28)7(8.14)3.74±1.12 AC(n=75)288.92±50.2270(93.33)12(16.00)7(9.33)3.20±0.93 CC(n=57)273.50±46.9451(89.47)10(17.54)6(10.53)3.1±0.87χ2/t0.860.090.710.262.79P0.400.770.470.590.06

3討論

產后抑郁是一種嚴重危害產婦及其家庭的疾病，我國發生率為10%～40.18%[11]。雖然產后抑郁是一個復雜的多因素導致的疾病，但目前尚無統一的診斷標準與治療方法，一直以預防為主。為了預防產后抑郁癥的出現，本研究探討了葉酸攝入量與產后抑郁癥發病的關系，而且還首次深入研究了MTHFR基因多態性與產后抑郁的相關性。

3.1 低葉酸攝入量與產后抑郁發病的關系

流行病學與臨床研究表明，低葉酸水平與抑郁癥發病明顯相關，孕期補充葉酸可以防止產后抑郁癥的出現，因此，低葉酸水平是抑郁癥發病的高風險因素[3-5]。Lewis等[8]以6 908例妊娠婦女為研究對象發現低葉酸攝入量不會導致產后抑郁的發生。到目前為止，葉酸與產后抑郁的關系一直存在爭議。本研究發現，孕期低葉酸攝入量與產后抑郁無關，而且不同時間補充葉酸對產后抑郁也沒有影響，但血清葉酸水平與產后抑郁顯著相關，這與前人研究結果相一致。通常不同的人群，飲食習慣、身處的環境、納入排除標準和抑郁癥診斷標準等因素造成結果不完全相同。

3.2 MTHFR基因多態性與產后抑郁發病的關系

由于MTHFR基因參與葉酸代謝途徑，間接調節血漿同型半胱氨酸含量，可能會影響產婦情緒[12-13]。Lewis等[8]發現MTHFR C677T與產后抑郁的發生有關；Devlin等[14]也有類似的發現，MTHFR C677T與妊娠期抑郁的發生有關。本研究發現MTHFR C677T和A1298C基因多態性與產后抑郁的發生有關，其中雜合子CT、AC和純合子TT、CC是產后抑郁發生的高風險因子。本研究又進一步檢測了MTHFR C677T和A1298C基因型與產后抑郁的關系是否受混雜因素(葉酸攝入量、攝入時間和血清葉酸水平)的影響，研究結果表明不同MTHFR C677T和A1298C基因型導致婦女產后抑郁不受孕期葉酸攝入量、攝入時間和血清葉酸水平的影響，是產后抑郁發生的獨立影響因素。因此MTHFR C677T和A1298C基因多態性是產后抑郁的獨立影響因子。

綜上所述，低葉酸攝入量和不同時間補充葉酸不是產后抑郁發病的風險因素，但葉酸水平與MTHFR C677T和A1298C基因型是產后抑郁發病的獨立風險因素。妊娠婦女的MTHFR基因篩查及葉酸水平檢測可以作為產后抑郁癥發生的預后因子，然后采取相應措施預防或減少產后抑郁的發病。

[1]盧錦華, 郭勇, 沈松英, 等. 孕晚期炎癥反應與產后抑郁風險的前瞻性隊列研究[J]. 中國婦幼健康研究, 2014, 25(3):391-393.

[2]張素瑛, 高江梅, 任小花,等. 舟曲地區產后抑郁發生特點及影響因素分析[J]. 中國婦幼健康研究, 2011, 22(4):437-438.

[3]Brito Noronha M, Almeida Cunha N,Agra Araújo D,etal. Undernutrition, serum vitamin B12, folic acid and depressive?symptoms in older adults [J]. Nutr Hosp, 2015, 32(1):354-361.

[4]Sharpley AL, Hockney R,McPeake L,etal. Folic acid supplementation for prevention of mood disorders in young people at familial risk: a randomised, double blind, placebo controlled trial[J]. J Affect Disord, 2014, 167:306-311.

[5]Aishwarya S,Rajendiren S,Kattimani S,etal. Homocysteine and serotonin: association with postpartum depression[J]. Asian J Psychiatr,2013, 6(6):473-477.

[6]Okereke O I,Cook N R,Albert C M,etal. Effect of long-term supplementation with folic acid and B vitamins on risk of depression in older women[J]. Br J Psychiatry,2015, 206(4):324-331.

[7]Walker J G, Mackinnon A J, Batterham P,etal. Mental health literacy, folic acid and vitamin B12, and physical activity for the prevention of depression in older adults: randomised controlled trial[J]. Br J Psychiatry, 2010, 197(1):45-54.

[8] Lewis S J, Araya R, Leary S,etal. Folic acid supplementation during pregnancy may protect gainst depression 21 months after pregnancy, an effect modified by MTHFR C677T genotype[J]. Eur J Clin Nutr, 2012, 66(1):97-103.

[9] Gabriela Nielsen M,Congiu C,Bortolomasi M,etal. MTHFR: Genetic variants, expression analysis and COMT interaction in major depressive disorder. J Affect Disor,?2015, 1, 183:179-186.

[10]Peter C, Danny SP, Alejandro V,etal. Polymorphisms of the methylenetetrahydrofolate reductase gene (C677T and A1298C) in nulliparous women complicated with preeclampsia[J]. Gynecological endocrinology, 2014, 30(5): 392-396.

[11]李江, 王慶. 孕期補鐵、鈣、葉酸預護產后抑郁癥的臨床觀察[J]. 長江大學學報(自科版), 2014, 11(30):82-83.

[12]Sayadi M A, Achour O, Ezzaher A,etal. CT genotype of 5,10-methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) C677T polymorphism is protector factor of major depressive disorder in the Tunisian population: a case control study[J]. Ann Gen Psychiatry, 2016, 15:18.

[13]Jiang W, Xu J, Lu X J,etal. Association between MTHFR C677T polymorphism and depression:a meta-analysis in the Chinese population[J]. Psychol Health Med, 2016, 21(6):675-685.

[14] Devlin A M,Brain U,Austin J,etal. Prenatal exposure to maternal depressed mood and the MTHFR C677T variant affect SLC6A4 methylation in infants at birth[J]. PLoS One. 2010, 5(8):e12201.

[專業責任編輯：韓 蓁]

Effect of folic acid intake during pregnancy and MTHFR polymorphism on postpartum depression

LI Yin-di1, YUE Hong-yun1, LI Hua2

(1.Department of Obstetrics, Affiliated Hospital of Yan’an University, Shaanxi Yan’an 716000, China; 2.Department of General Surgery, Second Affiliated Hospital of Medical School of Xi’an Jiaotong University, Shaanxi Xi’an 710004, China)

〗Objective To investigate the relationship between folic acid intake during pregnancy and methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) polymorphism and postpartum depression. Methods Altogether 800 pregnant women receiving check-up in obstetrics department in Affiliated Hospital of Yan’an University from January 2014 to June 2016 were included in this study. Information on use of folic acid supplements was collected from women at 12 and 28 weeks of gestation based on an open-ended questionnaire. MTHFR C677T and A1298C polymorphism was detected by PCR-RFLP. Postpartum depression was diagnosed in 8 weeks postpartum through Edinburgh postnatal depression scale (EPDS). Relationship between folic acid intake during pregnancy and MTHFR polymorphism and postpartum depression was analyzed by statistical analysis. Results There were 218 cases of postpartum depression and 582 normal cases in 800 subjects. No significant difference was found in daily folic acid intake and different folic acid supplementary time between women with postpartum depression and normal women. But serum folic acid level of women with postpartum depression was significantly lower than that of normal women (χ2=15.76,P<0.001). There were significant differences in genotype frequency at polymorphic site of MTHFR C677T and A1298C between two groups. Among them, heterozygous CT (χ2=13.67,P<0.01), AC (χ2=3.39,P=0.02) and homozygous TT (χ2=8.65,P<0.01), CC (χ2=15.18,P<0.01) were high risk factors of postpartum depression. In addition, women with postpartum depression with different MTHFR C677T and A1298C genotype (CC, CT, TT and AA, AC, CC) were not significantly different in daily folic acid intake, different folic acid supplementary time and serum folic acid level during pregnancy (χ2value ranged 0.07-2.79, allP>0.05). Conclusion Low intake of folic acid and different supplementary time of folic acid are not risk factors for postpartum depression, but serum folic acid level, MTHFR C677T and A1298C genotype are independent risk factors for postpartum depression.

postpartum depression; folic acid; methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR); polymorphism

2017-02-13

科技惠民計劃資助項目(編號：2015HM-01-02)

李引弟(1984-)，女，主治醫師，主要從事孕產婦疾病診治及基因診斷工作。

李 華，副主任醫師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.06.005

R749.4

A

1673-5293(2017)06-0632-04