基于GC—MS的滸苔代謝產物提取方法研究

何艷麗 王延輝 陳方園 孫平飛 徐年軍

摘要 [目的]研究滸苔代謝產物的提取方法。[方法]以滸苔為研究對象，用不同的細胞破碎方式、溶劑提取體系、料液比等對均一樣本的代謝產物進行提取，氣相色譜-質譜法（GC-MS）鑒定代謝產物成分，利用主成分分析等方法，對不同的代謝提取體系進行評價。[結果]溶劑體系甲醇-三氯甲烷-水（7∶3∶3）和液氮處理-球磨破碎-超聲波的破壁方法提取并鑒定出81種代謝產物，該方法具有高提取產率、高重現(xiàn)性、易操作和速度快等優(yōu)點。[結論]溶劑體系甲醇-三氯甲烷-水（7∶3∶3）和液氮處理-球磨破碎-超聲波破壁是適合滸苔代謝物提取的方法，該方法可為滸苔及大型綠藻的代謝組學研究提供參考。

關鍵詞 滸苔；提取方法；氣相色譜-質譜；代謝產物

中圖分類號 S986.2 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611（2017）13-0072-04

Metabolite Profiling of Seaweed Enteromorpha Using Gas Chromatography-Mass Spectrometry

HE Yan-li1，2， WANG Yan-hui1， CHEN Fang-yuan1， XU Nian-jun2* et al

（1. School of Pharmaceutical Engineering， Zhejiang Pharmaceutical College， Ningbo， Zhejiang 315100； 2. School of Marine Sciences， Ningbo University， Ningbo， Zhejiang 315211）

Abstract [Objective] To study the extraction method of Enteromorpha metabolites. [Method] Enteromorpha as the research object， using different cell crushing methods， solvent extraction system， solid-liquid ratio， the homogeneous sample metabolites were extracted； the metabolites were identificated by GC-MS； using principal component analysis method， different metabolic extraction systems were evaluated. [Result] A total of 81 metabolites were extracted and identified by the solvent system of methanol∶chloroform∶water （7∶3∶3） and liquid nitrogen treatment-milling-ultrasonic breaking method， showing high extraction yield， high reproducibility， easy operation and fast and other characteristics. [Conclusion] It is a suitable method for extracting metabolites of Enteromorpha which can provide reference for metabonomics study of Enteromorpha and large green algae.

Key words Enteromorpha；Extraction method；GC-MS；Metabolite

滸苔（Enteromorpha）亦稱苔條、苔菜，屬綠藻綱石莼科，為大型海洋綠藻，廣溫、廣鹽、耐干旱，在我國近海廣泛分布。在適合條件下容易出現(xiàn)爆發(fā)型增殖，給水產養(yǎng)殖造成嚴重困擾，其生態(tài)危害受到廣泛關注。同時滸苔又有較高的營養(yǎng)價值，滸苔“燒末吹鼻止衄血，湯浸搗敷手背腫痛”，具有軟堅散結、化痰消積、解毒消腫等作用；滸苔富含蛋白質、纖維素、碳水化合物和維生素等營養(yǎng)成分，在日韓等國家作為中高檔的佐料消費[1]，且價格昂貴。

滸苔在近海中的綠潮爆發(fā)極具規(guī)律：每年4、5月份在山東、江蘇、浙江等局部海域爆發(fā)，爆發(fā)期間對當?shù)厮a養(yǎng)殖造成極大損失[2]，對近海環(huán)境也產生不良影響，而其他時間附近海域則較少出現(xiàn)。……