PKCε信號通路介導甘青鐵線蓮活性成分APG抗心肌缺血再灌注損傷的機制研究

馮穎達，馮建宇，楊 陽，狄守印，張 偉，陸云陽，湯海峰，朱艷榮

·基礎研究·

PKCε信號通路介導甘青鐵線蓮活性成分APG抗心肌缺血再灌注損傷的機制研究

馮穎達，馮建宇，楊 陽，狄守印，張 偉，陸云陽，湯海峰，朱艷榮

目的 研究不同濃度甘青鐵線蓮活性成分APG對H9C2大鼠心肌細胞缺血再灌注損傷的保護作用及其可能的機制。方法 體外培養H9C2大鼠心肌細胞，經2μM/L和4μM/L的APG預處理24 h后，建立缺氧復氧損傷模型(I/R)(缺氧45 min，復氧3 h)。采用CCK－8法檢測細胞活力，檢測細胞培養液乳酸脫氫酶(LDH)的釋放量、丙二醛(MDA)的釋放量和細胞內超氧化物歧化酶(SOD)的活力;采用Western Blot法檢測細胞內蛋白激酶Cε(PKCε)、Caspase－3、Bax和Bcl－2表達情況，使用特異性PKCε抑制劑CHE觀察PKCε信號通路在此過程中的作用。結果 I/R處理可抑制H9C2細胞活性，細胞培養基中LDH、MDA含量升高，SOD活力降低(與Control組比較，P＜0.05)。抑制PKCε表達，上調Caspase－3表達，下調Bcl－2/ Bax比例(與Control組比較，P＜0.05)。2μM/L和4μM/L的APG預處理均可發揮細胞保護作用，降低LDH與MDA釋放量，提高SOD活力(與I/R組比較，P＜0.05)。此外，APG處理對抗了I/R損傷引起的PKCε表達下調，抑制Caspase－3表達，提高了Bcl－2/Bax比例(與I/R組比較，P＜0.05)。CHE處理后細胞活力下降，Caspase－3表達上調，Bcl－2/Bax比例下降，凋亡增加(與APG+I/R組比較，P＜0.05)。結論 甘青鐵線蓮中活性成分APG可減輕心肌缺血再灌注損傷，其機制可能是激活PKCε相關信號通路，最終抑制心肌細胞凋亡。

甘青鐵線蓮;心肌缺血再灌注損傷;蛋白激酶Cε;細胞凋亡

缺血性心臟病是威脅人類健康的一項重大疾病，心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)損傷是重要的損傷類型，其病理機制復雜，有很多信號通路和細胞因子參與其中［1－4］。心肌I/R損傷是指缺血期處于可逆損傷的心肌細胞，恢復血液供應后產生不可逆轉的損傷［5］。……