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花生四烯酸對(duì)日本沼蝦肝胰腺細(xì)胞脂質(zhì)代謝基因表達(dá)的影響

2017-02-28 05:04:09丁志麗曹訪羅娜孔有琴?gòu)堃紫槔罹胺胰~金云

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(1.浙江省水生生物資源養(yǎng)護(hù)與開發(fā)技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院水生動(dòng)物繁育與營(yíng)養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖州師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,湖州 313000;2.大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命科學(xué)學(xué)院,大連 116000)

花生四烯酸對(duì)日本沼蝦肝胰腺細(xì)胞脂質(zhì)代謝基因表達(dá)的影響

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(1.浙江省水生生物資源養(yǎng)護(hù)與開發(fā)技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院水生動(dòng)物繁育與營(yíng)養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖州師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,湖州 313000;2.大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命科學(xué)學(xué)院,大連 116000)

本試驗(yàn)旨在評(píng)價(jià)細(xì)胞培養(yǎng)液中花生四烯酸(arachidonic acid,ARA)濃度對(duì)日本沼蝦肝胰腺細(xì)胞活力及脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響。分離日本沼蝦肝胰腺細(xì)胞,使用M199完全培養(yǎng)液培養(yǎng)5 d后換成含ARA的培養(yǎng)液,ARA濃度分別為0(ARA1)、50(ARA2)、100(ARA3)、200(ARA4)和1 000 μmol/L(ARA5),測(cè)定12和24 h時(shí)脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)水平,以及24 h時(shí)細(xì)胞活力。結(jié)果表明:原代肝胰腺細(xì)胞使用完全培養(yǎng)液時(shí),生長(zhǎng)狀況良好,能存活15 d左右;ARA5組24 h時(shí)細(xì)胞活力顯著低于ARA1和ARA2組(P<0.05);高濃度的ARA降低了12和24 h時(shí)Δ4脫飽和酶(Δ4FAD)、Δ6脫飽和酶(Δ6FAD)、碳鏈延長(zhǎng)酶6(Elovl6)、B類Ⅰ型清道夫受體(SR-BⅠ)、脂肪酸結(jié)合蛋白10(FABP10)、乙酰輔酶A結(jié)合蛋白(ACBP)基因表達(dá)水平;ARA作用12 h時(shí),ARA2組SR-BⅠ基因表達(dá)水平顯著高于其余各組(P<0.05),ARA2和ARA3組FABP10基因表達(dá)水平顯著高于ARA1和ARA5組(P<0.05),ARA3組ACBP基因表達(dá)水平顯著高于其余各組(P<0.05);ARA作用24 h時(shí),ARA2組SR-BⅠ、FABP10和ACBP基因表達(dá)水平顯著高于其余各組(P<0.05)。由此可見,細(xì)胞培養(yǎng)液中ARA濃度會(huì)影響日本沼蝦肝……

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