急性腦卒中患者TGFBR2基因多態性與動態血壓指數的關聯研究

馬 琳,石樹君

(內蒙古醫科大學附屬醫院神經內科，呼和浩特 010050)

急性腦卒中患者TGFBR2基因多態性與動態血壓指數的關聯研究

馬 琳,石樹君△

(內蒙古醫科大學附屬醫院神經內科，呼和浩特 010050)

目的 探討腦卒中TFGBR2基因多肽性和患者動態血壓相關指標的關系。方法 選取2014年6月至2015年6月該院收治的急性腦卒中患者60例，其中腦出血患者32例(腦出血組)，腦梗死患者28例(腦梗死組)；另選取60例體檢健康者為對照組。采用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性(PCR-RFLP)法檢測患者TGFBR2基因rs6785358片段多態性，所有患者均行動態血壓檢測，分析患者TGFBR2基因多態性與腦卒中動態血壓的關系。結果 腦出血和腦梗死患者A/A基因型均占50.0%，高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)；對照組患者G/G基因型比例(60.0%)高于腦卒中患者，差異有統計學意義(P<0.05)；有高血壓史和腦卒中史的患者A/A基因型分別占51.4%和60.0%，高于無高血壓史和無腦卒中史患者，差異均有統計學意義(P<0.05)；A/A基因型的腦卒中患者24 h平均收縮壓、24 h平均舒張壓、24 h平均脈壓、24 h動態脈壓指數均高于基因型為A/G和G/G者，差異均有統計學意義(P<0.05)。結論 腦卒中患者TGFBR2基因rs6785358基因型以A/A為主，且A/A基因型患者血壓波動性較大。

轉化生長因子β；基因多態性；卒中；動態血壓

腦卒中是導致我國居民死亡的重要疾病之一，大多數腦卒中患者因未得到及時救治而出現語言、運動功能障礙，嚴重影響患者的生活質量，并對家庭和社會造成嚴重的醫療負擔，因此，減少腦卒中的發生是當前醫學臨床研究的重要課題之一[1-2]。高血壓是腦卒中的重要危險因素，高血壓患者腦血管風險事件是非高血壓患者的1.25倍[3]。轉化生長因子β(TGF-β)是重要的炎性因子，TGF-β信號通路參與多種疾病的病理生理過程。有研究提示，TGF-β基因多態性可能參與高血壓的發生、發展，而且可能與腦卒中的發生有密切關系[4]。而脈壓和脈壓指數是腦血管事件重要的預測指標[5-6]。本研究通過對本院60例腦卒中患者的臨床資料進行分析，探討腦卒中患者TGF-β基因多態性與動態血壓相關指數之間的關聯，進一步了解TGF-β基因多態性在腦卒中患者中的重要意義，現將研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年6月至2015年6月在本院治療，經顱腦CT或磁共振成像(MRI)和神經系統體格檢查符合2010年中國急性缺血性腦卒中診治指南中腦卒中(腦出血、腦梗死)診斷標準[7]的60例患者作為研究對象，其中腦出血患者32例(腦出血組)，腦梗死患者28例(腦梗死組)。入選標準：(1)起病1～3 d內入住本院神經內科；(2)經影像學確診為腦卒中，其中腦梗死32例，腦出血28例；排除標準：(1)存在影響自主神經的其他系統疾病，例如糖尿病、腎功能不全、慢性阻塞性肺疾病、電解質紊亂；(2)合并有惡性腫瘤；(3)病例資料不完整；(4)不能完成隨訪；(5)既往發生過腦卒中，合并其他中樞系統疾病。本研究60例患者中男39例，女21例，平均年齡(54.6±12.5)歲。并以同期60例體檢健康者為對照組，男42例，女18例，平均年齡(54.7±12.8)歲。兩組患者性別、年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準，所有患者均簽署知情同意書。本研究中腦卒中患者均參照2010年中華醫學會制定的急性腦卒中診治指南進行治療。

1.2 方法

1.2.1 動態血壓檢測 采用DS-250型全自動血壓檢測儀(日本NISSEI公司)進行血壓監測，將血壓監測儀袖帶固定于患者左側手臂，并對患者進行動態血壓相關知識的宣教。24 h動態血壓監測分為白晝血壓和夜間血壓監測，白晝時間為6：00～22：00，夜間時間為22：00至次日6：00，均為每隔20 min或30 min測量1次血壓，收集24 h動態血壓結果，血壓測量有效率需達到80%以上(有效數據定義為測量結果在患者實際血壓的合理范圍內)，由動態血壓檢測儀連接計算器直接計算24 h平均收縮壓(24 h MSBP)、24 h平均舒張壓(24 h MDBP)，24 h平均脈壓(PP)=24 h MSBP-24 h MDBP，動態脈壓指數(PPI)=PP/24 h MSBP。

1.2.2 基因多態性檢測 采集觀察組患者血液標本DNA使用Promega公司試劑盒及Eppendorf核酸定量儀測定白細胞中DNA載量，進一步使用ABI-2700型測序級擴增儀擴增TGFBR2基因rs6785358基因片段，對其進行測序和純化，最后使用反向引物進行反向測序，進一步對rs6785358基因進行位點分析。rs6785358上游引物：5′-GAA CT G CAA ACA AGA GAA TGG AT-3′；下游引物：5′-TTA GAA TTC TAC CCT AAT GAT TGT AAG G-3′。聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態性(PCR-RFLP)法反應條件及具體操作步驟參照說明書進行。

2 結 果

2.1TGFBR2基因rs6785358片段多態性與急性腦卒中的關系 腦出血、腦梗死患者A/A基因型比例均為50.0%，高于對照組，差異均有統計學意義(P值分別為0.034、0.045)；腦出血、腦梗死患者A/G基因型比例也高于對照組，差異均有統計學意義(P值分別為0.026、0.027)；腦出血、腦梗死患者G/G型基因比例低于對照組，差異均有統計學意義(P值分別為0.003、0.034)，見表1。

表1 TGFBR2基因rs6785358基因片段多態性與急性腦卒中的關系[n(%)]

*：P<0.05，與對照組比較。

2.2 高血壓及腦卒中家族史與TGFBR2基因rs6785358片段多態性的關系 有高血壓史和腦卒中史的患者A/A型基因比例分別為51.4%和60.0%，高于無高血壓史和無腦卒中史的患者，差異均有統計學意義(P值分別為0.007、0.003)；無高血壓史和無腦卒中史的患者G/G型基因比例高于有高血壓史和有腦卒中史的患者，差異均有統計學意義(P值分別為0.002、0.005)，見表2。

表2 高血壓及腦卒中家族史與TGFBR2基因rs6785358片段多態性的關系[n(%)]

*：P<0.05，與無高血壓史患者比較；#：P<0.05，與無腦卒中史患者比較。

2.3 腦卒中患者TGFBR2基因rs6785358片段多態性與動態血壓的關系A/A基因型腦卒中患者24hMSBP、24hMDBP、24hPP、24hPPI均高于A/G基因型患者，差異均有統計學意義(P值分別為0.017、0.020，0.002、0.030)；A/A基因型腦卒中患者24hMSBP、24hMDBP、24hPP、24hPPI均高于G/G基因型患者，差異均有統計學意義(P值分別為0.014、0.030、0.026、0.037)，見表3。

表3 腦卒中患者TGFBR2基因rs6785358片段多態性與動態血壓的關系

*：P<0.05，與基因型為A/A的患者比較。

3 討 論

TGF-β基因活化可使細胞外信號被傳導至細胞核，最終引起細胞增殖、分化、遷移、凋亡[8-9]。活化的TGF-β可以影響細胞運動性、細胞黏附、浸潤、生存及血管生成[10]。TGFBR2的單核甘酸基因位點改變可能通過激活該基因的下游信號，影響轉錄、翻譯過程進而影響細胞的功能[11]。TGF-β是多種信號通路上重要的作用位點，TGF-β參與細胞增殖、凋亡、遷移等多種病理、生理過程[12]。眾多研究提示，腦卒中患者血清TGF-β水平上升，并參與患者疾病的發展，TGFBR2是TGF-β信號通路上重要的組成部分，參與TGF-β信號通路的調控[13]。目前研究發現，TGF基因多態性參與多種疾病的發生、發展，包括高血壓、冠心病、糖尿病等。高血壓患者舒張壓水平與TGFBBR1基因多態性及患者血清中TGF-β水平密切相關，而高血壓又是腦卒中發生的重要風險因素，因此作者設想TGF-β基因多態性可能與腦卒中的發生存在一定的內在關聯。

本研究中rs6785358基因多態性結果提示，50.0%的腦出血患者基因型為A/A，基因型為A/A的患者發生腦出血和腦卒中的概率明顯高于基因型為G/G和A/G的患者。進一步分析患者基因分型與高血壓病史的關系，有高血壓和腦卒中疾病史的患者rs6785358基因型以A/A為主，分別占51.4%和60.0%，而無高血壓和腦卒中病史的患者基因型以G/G為主，分別占47.8%和62.2%。這進一步證實了基因型為A/A的患者更容易發生腦血管事件。作者還對腦卒中患者進行了動態血壓檢測，深入研究不同基因型患者血壓的節律性變化。動態血壓監測有助于腦卒中患者血壓管理，近年來眾多學者建議將脈壓和脈壓指數納入高血壓管理的指標中[14]，兩項指標與腦血管事件均有較好的相關性，而本研究結果提示基因型為A/A的腦卒中患者，24hPP和24hPPI分別為(78.2±11.5)和(0.59±0.06)，均明顯高于其他基因型患者。既往研究提示，PP和PPI均可以作為預測腦血管事件的重要指標，PPI和PP越高，患者發生腦血管風險事件的概率越大。而本研究結果提示，基因型為A/A的患者具有較高的血壓異常風險，這可能是A/A型患者容易出現腦卒中的原因。

TGFBR2是TGF-β信號通路的重要組成部分，參與TGF-β信號通路的調控，與多種疾病模型有關。本研究結果提示，TGFBR2基因rs6785358片段多態性與腦卒中的發生具有明顯的相關性。目前國內尚缺乏有關TGFBR2基因rs6785358片段多態性與腦卒中發生相關性的研究，并且關于TGFBR2基因rs6785358片段多態性與動態血壓相關性的研究也較少。本研究結果表明，腦卒中患者基因型以A/A型為主，還未證實A/A基因型為腦卒中發生的獨立風險因素。

綜上所述，TGFBR2rs6785358基因型為A/A可能是腦卒中的易感因素，而且基因型為A/A的腦卒中患者有較高的腦卒中再發風險。為了控制腦卒中的發生率，早期發現高危易感人群，進行TGFBR2基因型篩選有重要意義，對于基因型為A/A的TGFBR2的患者可以早期預防腦卒中的發生。但是，本研究并未對腦卒中患者風險因素進行探討，未證實A/A為腦卒中的獨立風險因素，仍然需要大樣本、多中心的研究證實TGFBR2rs6785358的A/A基因型在腦卒中發病中的重要意義。

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Association of TGFBR2 gene polymorphism with ambulatory blood pressure index in patients with acute stroke

MaLin，ShiShujun△

(DepartmentofNeurology,AffiliatedHospitalofInnerMongoliaMedicalUniversity,Hohhot,InnerMongolia010050,China)

Objective To explore the relationship between the TFGBR2 gene polymorphism and the indexes of ambulatory blood pressure in patients with stroke.Methods A total of 60 cases of patients diagnosed with stroke,including 32 cases of patients with cerebral hemorrhage(cerebral hemorrhage group) and 28 cases of patients with cerebral infarction(cerebral infarction group),were selected in our hospital from June 2014 to June 2015.Another 60 cases of healthy individuals were allocated to the control group.The PCR-RFLP method was used to determine TGFBR2 rs6785358 gene polymorphism，and all patients were given ambulatory blood pressure monitoring.The relationship between the TFGBR2 gene polymorphism and the indexes of ambulatory blood pressure in patients with stroke were analysed.Results The A/A genotype accounted for 50.0% of rs6785358 gene in patients with cerebral hemorrhage and patients with cerebral infarction,which was higher than that in the control group,there was statistically significant difference(P<0.05).The ratio of G/G genotype(60.0%) in the control group was higher than that of patients with stroke,there was statistically significant difference(P<0.05).The A/A genotype accounted for 51.4% and 60.0% of rs6785358 gene in patients with stroke who had hypertension history and those had stroke history,which was significantly higher than that in patients without hypertension history and stroke history,respectively.The 24 h MSBP,24 h MDBP,24 h PP and 24 h PPI in patients with cerebral stroke carrying A/A genotype of rs6785358 gene were higher than those in patients with cerebral stroke carrying A/G or G/G genotype of rs6785358 gene,there were statistically significant differences(P<0.05).Conclusion The A/A is the major genotype of TGFBR2 rs6785358,and patients with stroke carrying the A/A genotype have significant blood pressure fluctuations.

transforming growth factor beta；gene polymorphism；stroke；ambulatory blood pressure

馬琳(1980-)，主治醫師，碩士，主要從事神經內科研究。△

??·臨床研究

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.35.026

R743.3

A

1671-8348(2016)35-4983-03

2016-05-23

2016-08-11)