免疫膠體金與化學匹拉米洞兩種檢測方法在50例上消化道出血診斷中的臨床應用及比較

王華+祝傳貴+宋予娟+耿嵐

【摘要】 目的 探討免疫膠體金與化學匹拉米洞兩種方法的優缺點、適用范圍及臨床應用價值。方法 100例隨機門診及住院患者的糞便樣本和50例上消化道出血患者的柏油便樣本， 分別在相同條件下應用免疫膠體金法和化學匹拉米洞法， 比較兩種檢測方法的陽性率。結果 100例隨機糞便樣本隱血試驗匹拉米洞法陽性率為52%， 免疫膠體金法陽性率為15%， 比較差異有統計學意義（P<0.05）。50例上消化道出血隱血化學匹拉米洞法陽性率為100%， 免疫膠體金法陽性率為86%， 比較差異有統計學意義（P<0.05）。結論 免疫膠體金法假陽性率低， 化學匹拉米洞法假陽性率高， 特異性差， 兩種方法結合可提高檢測的準確性。化學匹拉米洞法干擾因素多假陽性結果較多， 但對假陽性結果可以用免疫膠體金法予以糾正。

【關鍵詞】 上消化道出血；隱血；免疫膠體金法；化學匹拉米洞法

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.27.107

糞便隱血試驗現常用的主要有化學匹拉米洞法和免疫膠體金法兩種。化學匹拉米洞法靈敏度較好， 屬于中度靈敏試驗， 能檢測到1 mg/L的血紅蛋白（Hb）， 消化道出血5～10 ml即可為陽性， 但特異性低， 易受到外源性食物如含有血紅素、血紅蛋白、肌紅蛋白以及鐵劑、肉類、綠葉蔬菜等影響出現假陽性[1]。由于化學試劑的不穩定性， 長期放置會出現反應減弱， 并且如果患者服用大量維生素C或其他具有還原作用的藥物時會出現假陰性結果。免疫膠體金法靈敏度高于化學匹拉米洞法可以檢測到最低0.2 μg/L的Hb， 最高檢出濃度可達2000 μg/ml且不受相關食物藥物影響[2]， 這說明免疫膠體金法對人體早期的消化道微量出血更敏感。但高于2000 μg/ml時， 由于前滯反應可出現假陽性。所以柏油樣便出現假陽性時應充分稀釋后進行檢測。由于免疫膠體金法的高度敏感性， 某些服用刺激胃腸道藥物后的正常人也可出現陽性結果。本文主要對兩種方法在糞便隱血試驗中及應用進行評價。報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 全部糞便標本均系本院門診及住院患者的隨機標本。100例隨機糞便樣本和50例確診為上消化道出血患者的柏油樣便標本。年齡0～90歲， 男82例， 女68例。

1. 2 試劑 免疫膠體金法隱血試紙由上海凱創生物技術有限公司提供， 化學匹拉米洞檢測由珠海貝索生物技術有限公司提供。

1. 3 方法 按照操作說明分別對100例隨機標本及50例上消化道出血標本同時使用化學匹拉米洞法、免疫膠體金法進行隱血檢測。

2 結果

2. 1 100例隨機糞便樣本應用化學匹拉米洞法檢測的陽性率為52%， 膠體金法陽性率為15%， 比較差異具有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 50例上消化道出血患者柏油便標本使用化學匹拉米洞法檢測的陽性率為100%， 免疫膠體金法陽性率為86%， 比較差異具有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

大便隱血實驗陽性率消化道潰瘍為40%～70%， 消化道腫瘤為95%， 糞便中微量Hb的檢出對消化道出血及消化道腫瘤的早期診斷有著重要意義。尤其是對于消化道腫瘤患者， 在早期無癥狀時糞便潛血即可為陽性， 所以此項檢測也可以作為腸癌的重要參考指標， 可以早發現， 早治療， 提高該病患者的生存率[3]。糞便隱血膠體金法的原理是免疫學上的雙抗體夾心法， 故用單克隆抗體法檢測糞便中的隱血時只有糞便中含有人的Hb， 隱血試驗才為陽性， 而其他均為陰性。本文表1結果顯示15例免疫膠體金法陽性結果均作了胃鏡、直腸鏡、內腔鏡等檢查。化學匹拉米洞法受飲食以及含亞鐵離子的食物和藥物對結果均有影響， 包括由于牙齦出血而咽下的血性唾液， 所有這些均可對化學反應造成干擾出現假陽性。如表1中化學匹拉米洞法陽性的52例患者有15例確診為上消化道出血， 21例為柏油便或膿血便， 而其他均無明顯消化道出血癥狀。通過表2發現了免疫膠體金法的一些缺陷。實驗方法的不同有著不同的影響因素， 對于上消化道出血柏油類糞便的患者， 膠體金法有著較低的陽性率， 檢測上消化道潛血40%～50%不能檢出， 膠體金法檢測為假陰性。所以在檢測上消化道出血時免疫膠體金法陽性率低于化學匹拉米洞法。免疫膠體金法其最低檢測濃度0.2 μg/ml其范圍在0.2～2000 μg/ml， >2000 μg/ml時即出現后滯現象[4]。而Hb穩定性差， 在消化道中長期停留發生變性， 抗原性降低。在表2中7例柏油便且臨床證實為消化道出血的患者免疫膠體金法檢測陰性。所以對此種標本應稀釋50～100倍重新測定；并且在冬天溫度較低時會受到溫度影響使有些陽性標本出現陽性結果較慢。

隱血試驗對消化道出血疾病具有非常重要的診斷與鑒別診斷的價值， 要求其必須具有較高的靈敏度及特異性。不同的實驗方法存在著不同影響因素， 檢測結果也存在差異。通過本次試驗比較作者認為， 糞便隱血試驗免疫膠體金法特異敏感， 但存在假陰性可對臨床造成誤診漏診。化學匹拉米洞法干擾因素多假陽性結果較多， 但對假陽性結果可以用免疫膠體金法予以糾正。因此在實驗室發出檢驗報告時應標注檢驗方法， 方便臨床醫生參考， 為臨床提供準確無誤的結果。

參考文獻

[1] 熊立凡.臨床檢驗基礎.北京：人民衛生出版社， 2004：243-244.

[2] 蘇麗莎， 路白楊. 試紙卡法和膠體金法檢測大便潛血的方法學評價. 國際檢驗醫學雜志， 2015（18）：2771-2772.

[3] 王薇潔. 兩種大便潛血檢測試紙的性能比較. 山西醫藥雜志， 2014（18）：2212-2213.

[4] 吳鵬， 李艷， 陳進， 等. 聯合免疫法和化學法檢測糞便隱血的臨床應用評價. 檢驗醫學， 2010， 25（3）：176-178.

[收稿日期：2016-08-16]