血清IL-22水平與急性戊型肝炎病毒感染患者肝功能損害、疾病進展及轉歸的相關性

宋玉蓮　白若岑

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血清IL-22水平與急性戊型肝炎病毒感染患者肝功能損害、疾病進展及轉歸的相關性

宋玉蓮白若岑

110032遼寧沈陽遼寧中醫藥大學附屬醫院臨床檢驗中心(宋玉蓮)；中國醫科大學(白若岑)

【摘要】目的探討血清白介素-22(IL-22)水平同急性戊型肝炎病毒(HEV)感染患者肝功能損害、病情及轉歸的相關性。方法研究對象為我院收治的62例急性HEV感染患者，其中32例伴有肝硬化(A組)，30例為單純性HEV感染(B組)，另選取同期在我院進行健康體檢的30名健康志愿者作為健康對照組及20例單純性代償期肝硬化患者作為肝硬化對照組，對所有研究對象進行血清干擾素-γ(IFN-γ)、IL-22、白介素-6(IL-6)檢驗，對檢驗結果進行對比分析。結果A、B兩組的IL-22水平均顯著高于健康對照組及肝硬化對照組(P<0.05)；A組的IL-6水平顯著高于健康對照組及肝硬化對照組(P<0.05)；A組患者中，有14例出現慢加急性肝功能衰竭(ACLF)，18例未出現ACLF。伴ACLF患者的IL-22、IL-6水平均顯著高于不伴ACLF患者(P<0.05)。伴ACLF組患者治療9周后的IL-22水平明顯降低(P<0.05)。結論急性HEV感染引起的肝臟炎性損傷有IL-22的參與，IL-22水平的高低與患者病情的嚴重程度、預后情況存在密切聯系，臨床可將其作為評估HEV患者病情轉歸的有效指標。

【關鍵詞】肝功能損害；急性；HEV；血清IL-22

急性戊型肝炎是由HEV感染引起的急性自限性肝臟疾病，HEV與其他肝炎病毒一樣，均主要由病毒介導的免疫反應而引起損傷。存在慢性肝臟基礎疾病的患者在合并感染HEV后會造成肝病急劇進展，導致嚴重的肝功能失代償、肝功能衰竭，最終造成預后不良[1]。HEV的致病機制主要為T細胞介導的免疫反應，患者病情的加重與緩解均取決于Th細胞分泌的細胞因子譜所產生的免疫應答性質及強度。IL-22由Th22、Th17細胞分泌的效應分子，其發揮著抵御微生物入侵，修復組織損傷，促進急性期反應等作用[2]。本研究旨在明確IL-22水平變化與急性HEV感染患者病情、肝功能損害的相關性，現報道如下。

資料和方法

一、 一般資料

研究對象為我院2010年10月—2015年10月收治的62例急性HEV感染患者。(1)納入標準：HEV IgG滴度升高3倍以上，或HEV IgM陽性；符合急性HEV感染診斷標準，并經臨床、超聲檢查、肝組織病理活檢確診；HEV感染前3個月無慢性乙型肝炎活動；單純HEV感染者無肝功能異常或肝炎病史。(2)排除標準：合并潰瘍性結腸炎、銀屑病、系統性紅斑狼瘡者；妊娠期女性；合并肝細胞癌或其他惡性腫瘤者；HCV、HIV、HAV及其它可引起肝臟急性炎癥的病毒感染者。62例患者中，32例合并肝硬化(A組)，男27例，女5例，平均年齡(45.84±12.42)歲，30例為單純性HEV感染(B組)，男24例，女6例，平均年齡(44.54±11.73)歲。另選取同期在我院進行健康體檢的30名健康志愿者作為健康對照組，男25名，女5名，平均年齡(45.22±11.90)歲。選取20例單純性代償期肝硬化患者作為肝硬化對照組，男16例，女4例，平均年齡(45.37±11.74)歲。本研究通過了醫院倫理委員會批準，研究對象均知情，并簽署了知情同意書。

二、 方法

急性HEV感染患者入院后均行標準的抗病毒治療，收集患者的年齡、性別及住院期間的并發癥、常規生化指標(WBC、PTA、PLT、Alb、ALT等)等臨床資料。同期將檢測剩余血清送入血清樣本庫保存，以備IL-22、IL-6、IFN-γ檢驗。肝硬化對照組在入院時采集血清標本，健康對照組在進行健康體檢時采集血清標本完成常規生化指標及IL-22、IL-6、IFN-γ指標檢測。

IL-22、IL-6、IFN-γ指標檢測方法：使用相應的酶聯免疫吸附試驗檢測試劑盒(IL-22、IL-6、IFN-γ)進行檢驗，試劑盒由美國Ray Biotech 公司提供。室溫下嚴格按照試劑盒說明書進行操作，各樣本設復孔3個，并設標準品孔和空白對照，最終取3個復孔檢測結果的平均值。建立標準曲線，并根據曲線計算出每個樣本的IL-22、IL-6、IFN-γ濃度。在450 nm的波長下，使用全光譜酶標儀檢測OD值。

三、統計學處理

研究數據運用SPSS 20.0軟件處理，計數資料比較用卡方檢驗，計量資料比較用t檢驗，P<0.05差異有統計學意義。

結果

一、 各組的IL-22、IL-6、IFN-γ水平結果比較

A、B兩組的IL-22水平均顯著高于健康對照組和肝硬化對照組(P<0.05)；A組的IL-6水平顯著高于健康對照組和肝硬化對照組(P<0.05)；A組的IL-22、IL-6水平均顯著高于B組(P<0.05)；4組的IFN-γ水平比較差異無明顯統計學意義(P>0.05)。見表1。

二、ACLF與IL-22、IL-6、IFN-γ的關系

A組患者中，有14例出現ACLF，18例未出現ACLF。伴ACLF患者的IL-22、IL-6水平均顯著高于不伴ACLF患者(P<0.05)；伴ACLF與不伴ACLF患者的IFN-γ水平比較差異無明顯統計學意義(P>0.05)。見表2。

三、 伴ACLF患者的IL-22水平變化

對伴ACLF患者的IL-22水平進行持續動態監測，每周進行1次IL-22檢測。伴ACLF患者經治療后，病情逐漸好轉，出血、腹脹、乏力癥狀均顯著改善。伴ACLF組患者首次檢測的IL-22水平為(164.35±13.54) pg/mL，持續治療9周后，檢測的IL-22水平為(46.4±21.8) pg/mL，明顯低于首次檢測結果，差異具有統計學意義(P<0.05)。

討論

慢性肝炎病毒感染容易引起肝硬化和肝纖維化，對肝功能造成嚴重損害。國外研究資料顯示，肝硬化合并急性HEV感染后容易引起ACLF，而發生ACLF患者約1/2在3個月內死亡。現階段，臨床認為急性HEV感染造成的炎癥主要與T細胞介導的免疫性損傷有關，但對于其具體的致病機制仍無完全明確的闡釋[3]。近期研究顯示[4]，免疫調節細胞Th22與Th17在功能、數量方面的平衡，及其分泌的關鍵效應分子在肝炎病毒相關性肝病、移植排斥反應、自身免疫性疾病的發生及發展過程中均發揮著至關重要的作用。Th22和Th17細胞均會分泌一種重要的效應分子IL-22，目前IL-22已被臨床證實在類風濕關節炎、銀屑病等炎性疾病中發揮著組織修復、免疫調節、抗炎等功能，由于肝細胞等實質細胞會特異性表達IL-22受體，所以IL-22在肝病中的作用也越來越受到臨床的關注[5]。

關于IL-22與肝病關系的研究普遍以HBV和HCV引起的急慢性感染為焦點，甚少有學者研究急性HEV感染患者的IL-22表達規律及臨床意義，并且對于IL-22在肝病中到底是發揮抗炎還是促炎作用均存在較大爭議。有學者認為[6]，IL-22在急性乙型肝炎的發生、發展中所發揮的作用以促炎為主，IL-22能夠刺激免疫細胞分化聚集達到清除被病毒感染肝細胞的目的，但是IL-22在慢性乙型肝炎的發生發展中所發揮的作用則以抗炎為主，其能促進肝細胞增殖緩解慢性炎癥損傷。由于急性HEV感染與急性HBV感染較為相似，所以推測IL-22在急性HEV感染中所發揮的作用也可能以促炎為主，但具體是以組織修復作用還是以促炎作用為主，還與其自身濃度、局部環境、細胞來源等因素有關[7]。

表1　4組研究對象的IL-22、IL-6、IFN-γ水平比較(±s，pg/mL)

注：1)與健康對照組比較，P<0.05；2)與肝硬化對照組比較，P<0.05；3)與B組比較，P<0.05

表2　伴ACLF者與未伴ACLF者的IL-22、IL-6、IFN-γ水平比較(±s，pg/mL)

注：表示與不伴ACLF組比較，*P<0.05

目前，臨床已證實IL-6是參與肝臟損傷修復過程的重要細胞因子，同時也是觸發CD4+T細胞向Th22細胞分化，并刺激Th22和Th17細胞分泌IL-22的調控因子，其與IL-22有共同的信號轉導通路，二者可發揮協同效應[8]。IFN-γ是由Th1細胞分泌的細胞因子，其具有介導CTL效應的作用，IFN-γ的編碼基因與IL-22基因距離很近，且IL-22與IFN-γ轉錄起始位點相同。在本研究中，選擇了IL-22及其來源細胞分化相關的細胞因子IL-6和轉錄起始位點相同的IFN-γ，對其在急性HEV感染患者的表達規律進行了分析。結果顯示，A、B兩組的IL-22水平均顯著高于健康對照組，A組的IL-22、IL-6水平均顯著高于B組(P<0.05)。說明急性HEV感染確實會引起IL-22水平異常升高，而合并肝硬化的急性HEV感染患者的IL-22、IL-6水平比單純急性HEV感染患者更高，并且IL-22的升高幅度比IL-6更大，提示IL-22對病情的判斷能力可能比IL-6更加敏感和穩定。研究結果還顯示，4組患者的IFN-γ水平比較差異均無明顯統計學意義(P>0.05)，說明急性HEV感染并不會引起IFN-γ分泌增加，其并不會增加Th1型免疫反應優勢，由此推測可能是因為Th17和Th22細胞在外周血的優勢表達造成了Th1與Th17、T22細胞軸免疫失調。本研究結果還顯示，伴ACLF患者的IL-22、IL-6水平均顯著高于不伴ACLF患者，并且隨著ACLF患者病情的好轉，IL-22的水平也會明顯降低[9]，說明IL-22參與了急性HEV感染后的嚴重肝損傷過程，其與患者的病情變化、預后情況有著密切的關系[10]。

綜上所述，急性HEV感染引起的肝臟炎性損傷有IL-22的參與，IL-22水平的高低與患者病情的嚴重程度、預后情況存在密切聯系，臨床可將其作為評估HEV患者病情轉歸的有效指標。

參考文獻

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[10]華忠,顧錫炳,湯琴,等.慢性乙型肝炎患者不同HBV DNA水平誘導細胞免疫不同及其意義.實用醫學雜志, 2013, 29:3718-3720.

(本文編輯：賴榮陶)

通信作者：宋玉蓮, Email: 18102458079@163.com

(收稿日期：2015-11-20)

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