酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中應(yīng)用對比

梁服泉　朱秀蘭　彭健華

【摘要】 目的 探討酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）在梅毒檢驗中應(yīng)用對比情況。方法 500例梅毒標(biāo)本， 均采用ELISA與TRUST檢測， 比較檢測結(jié)果。結(jié)果 ELISA血清陽性率高于TRUST（P<0.05）， ELISA檢測結(jié)果的敏感性、特異性、陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值均高于TRUST（P<0.05）。結(jié)論 ELISA梅毒準(zhǔn)確性較高， 適用于大批量樣本篩查。

【關(guān)鍵詞】 酶聯(lián)免疫吸附法；甲苯胺紅不加熱血清試驗；梅毒；對比

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.13.010

Application comparison between enzyme linked immunosorbent assay and toluidine red unheated serum reagin test in syphilis detection LIANG Fu-quan， ZHU Xiu-lan， PENG Jian-hua. Department of Inspection， Dongguan Third Peoples Hospital， Dongguan 523320， China

【Abstract】 Objective To investigate application of enzyme linked immunosorbent assay （ELISA） and toluidine red unheated serum reagin test （TRUST） in syphilis detection. Methods A total of 500 syphilis samples were inspected by ELISA and TRUST， and their detection outcome was compared. Results ELISA showed higher serum positive rate than TRUST （P<0.05）， and its sensibility， specificity， negative and positive predictive value were all higher than those of TRUST （P<0.05）. Conclusion Due to high accuracy in syphilis detection， ELISA is suitable for large sample screening.

【Key words】 Enzyme linked immunosorbent assay； Toluidine red unheated serum reagin test； Syphilis； Comparison

梅毒屬于性傳播疾病的一種， 隨著我國改革開放的發(fā)展， 婚育觀念的變化， 梅毒發(fā)生率呈現(xiàn)明顯增高的趨勢[1， 2]。梅毒是由于梅毒螺旋體感染造成的， 其傳播途徑可以分為性傳播和母嬰傳播， 妊娠梅毒可能造成流產(chǎn)、死胎、胎兒畸形等嚴(yán)重的并發(fā)癥， 因而對于梅毒進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的診斷成為重要的公共衛(wèi)生問題之一[3， 4]。本研究通過對本院梅毒檢驗標(biāo)本情況進(jìn)行分析， 擬探討對比ELISA與TRUST在梅毒檢驗中應(yīng)用情況， 現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2014年1月～2015年12月梅毒標(biāo)本500例進(jìn)行分析， 所有標(biāo)本是通過篩查妊娠期梅毒孕婦， 年齡21～41歲， 平均年齡（26.8±11.2）歲， 病程1～5周， 平均病程（2.3±1.4）周， 初產(chǎn)婦408例， 經(jīng)產(chǎn)婦92例， 孕早期210例， 孕中期200例， 孕晚期90例。

1. 2 方法 檢查對象空腹采集靜脈血5 ml， 靜置后分離血清。ELISA：采用全自動酶聯(lián)免疫分析儀（芬蘭雷勃有限公司， Multiskans MK3）進(jìn)行檢測， 相關(guān)操作按照試劑說明書嚴(yán)格執(zhí)行， 樣品OD值S/CO≥1表示梅毒抗體為陽性， 樣品OD值S/CO<1為梅毒抗體陰性。TRUST：試劑主要來自上海榮盛神武有限公司， 取50 μl血清在卡片的圓圈中進(jìn)行涂布， 將抗原輕輕搖勻， 通過9號針頭滴加1滴抗原， 通過水平旋轉(zhuǎn)儀旋轉(zhuǎn)卡片8 min， 在亮光下觀察結(jié)果。TRUST陽性標(biāo)本通過0.9%氯化鈉溶液進(jìn)行倍比稀釋， 測定反應(yīng)素， 將可以引起陽性反應(yīng)最高的稀釋度作為反應(yīng)素的滴度， 再通過明膠顆粒凝集試驗（TPPA）進(jìn)行確認(rèn)， 一般以圓圈內(nèi)出現(xiàn)紅色或者粉色絮狀物作為陽性， 以圓圈內(nèi)可見甲苯胺紅顆粒聚集中央一點或者均勻分布作為陰性。

1. 3 觀察指標(biāo) ①觀察兩種方法檢測梅毒患者血清陽性率情況。②觀察兩種方法檢測結(jié)果評價情況， 主要包括敏感性、特異性、陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值情況。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 血清陽性率 ELISA血清陽性率高于TRUST（χ2=7.68， P<0.05）。

2. 2 檢測結(jié)果評價 ELISA檢測結(jié)果的敏感性、特異性、陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值均高于TRUST（χ2=7.68、6.11、4.31、12.18， P<0.05）。

3 討論

梅毒螺旋體是梅毒感染的病原體， 其侵入人體之后會產(chǎn)生抗菌體的特異性抗體和抗心磷脂抗的非特異性抗體， 因非特異性抗體的檢出時間比較晚， 在一期梅毒早期、晚期梅毒和潛伏期梅毒、梅毒治療后檢出率相對較低， 甚至于可能呈現(xiàn)陰性結(jié)果[5]。對于菌體的特異性抗體， 出現(xiàn)早， 消失晚的規(guī)律， 臨床上以以特性抗體作為梅毒螺旋體感染的診斷依據(jù)。本院常用的梅毒檢測方法主要有ELISA與TRUST， 其中TRUST應(yīng)用的抗原多是心磷脂類， 其檢測結(jié)果很容易受到主觀因素的影響， 但是其操作方便， 價格低廉， 在基層醫(yī)院開展較容易。ELISA是利用梅毒螺旋體特異性抗原將酶標(biāo)板孔包被， 利用雙抗原夾心法的原理對血清中特異性抗體進(jìn)行檢測， 減少了主觀性判定的誤差， 將結(jié)果判定依據(jù)定位酶標(biāo)儀讀數(shù)， 從而提高了檢出率。TRUST可以對梅毒感染進(jìn)行初步篩查， 其反應(yīng)素的滴度測定比較方便， 初期梅毒病灶出現(xiàn)1～2周后反應(yīng)素就可以測出， 二期梅毒患者的滴度最高， 隨著發(fā)展三期梅毒逐步降低， 因反應(yīng)對于集體沒有保護(hù)作用。ELISA酶的純度高， 催化反應(yīng)轉(zhuǎn)化率較高， 性質(zhì)穩(wěn)定， 專一性較強， 靈敏度較高， 通過ELISA可以同時對血清中梅毒抗體免疫球蛋白（Ig）G和IgM進(jìn)行檢測， 對于梅毒抗體若陽性標(biāo)本也可以檢出， 其可以將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原性反應(yīng)有機(jī)的結(jié)合起來。本研究通過對500例梅毒標(biāo)本進(jìn)行分析， 均采用ELISA與TRUST檢測。結(jié)果表明， ELISA血清陽性率高于TRUST， ELISA檢測結(jié)果的敏感性、特異性、陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值均高于TRUST， 提示ELISA在檢測梅毒標(biāo)本中效果優(yōu)于TRUST。另外有資料顯示， ELISA與TRUST在梅毒檢驗中側(cè)重點不是十分相同， TRUST往往注意臨床治療效果和預(yù)后效果的判定， 而ELISA除了準(zhǔn)確性相對較高以外， 還適用于大批量樣本的篩查， 在臨床應(yīng)注意結(jié)合具體情況進(jìn)行方法的選擇。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉冰. 酶聯(lián)免疫吸附法檢測梅毒抗體與甲苯胺紅不加熱血清試驗檢測梅毒螺旋體結(jié)果對比分析.河南預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志， 2015， 26（5）：377-378.

[2] 郭家權(quán)， 洪敏， 林永前， 等.酶聯(lián)免疫吸附法檢測與甲苯胺紅不加熱血清試驗在梅毒檢驗中應(yīng)用價值的比較.廣東醫(yī)學(xué)， 2014， 35（5）：738-740.

[3] 丁國良， 商發(fā)奎， 延義芹， 等.采供血機(jī)構(gòu)對梅毒螺旋體檢測的最佳方案探討.國際輸血及血液學(xué)雜志， 2014， 37（3）：222-225.

[4] 姚家奎， 丁德坤， 孫蓉， 等.應(yīng)用多種方法檢測老年患者梅毒抗體的探討與分析.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志， 2012， 33（19）：2376-2378.

[5] 陳述文， 梁連輝， 蔡常輝， 等.四種方法檢測早期梅毒螺旋體感染的臨床應(yīng)用評價.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志， 2012， 33（21）：2633-2634.

[收稿日期：2016-01-14]