12～14歲青少年血清堿性磷酸酶生物參考區間驗證

陳麗敏,郭明衛

(1.河北省邢臺縣中心醫院檢驗科　054000；2.河北省沙河市人民醫院檢驗科　054100)

·經驗交流·

12～14歲青少年血清堿性磷酸酶生物參考區間驗證

陳麗敏1,郭明衛2△

(1.河北省邢臺縣中心醫院檢驗科054000；2.河北省沙河市人民醫院檢驗科054100)

摘要:目的探討適合于12～14歲青少年血清堿性磷酸酶生物參考區間。方法參照美國臨床實驗室標準化協會標準與指南中的C28-A2推薦方法，收集男、女12～14歲體檢人員各40份標本，在經過性能評價驗證可靠的檢測系統上檢測。結果40例12～14歲男性青少年堿性磷酸酶(ALP)水平為91.0～484.0 U/L，平均(264.2±80.1)U/L，有28例數據落在參考區間外；40例12～14歲女性青少年ALP水平為75.0～364.0 U/L，平均(185.0±92.5)U/L，有23例數據落在參考區間外。試驗數據有3例以上的檢測結果落在現用的生物參考區間外。結論該生物參考區間不適合用于12～14歲青少年，應重新建立該年齡段的ALP生物參考區間，12～14歲男、女性青少年ALP參考區間分別為237.7～292.8 U/L、160.7～225.2 U/L。

關鍵詞:青少年；堿性磷酸酶；生物參考區間

生物參考區間是解釋分析檢驗結果的依據和程度[1]。12～14歲青少年正是生長發育旺盛期，堿性磷酸酶(ALP)是否能沿用試劑說明書上的生物參考區間有待驗證。根據ISO15189：2003《醫學實驗室-質量和能力的專用要求》，實驗室必須建立自己的生物參考區間并定期評審，以確保依據生物參考區間的有效性。本研究結合ISO15189條款要求和已有的推薦方法，驗證并探討該人群的生物參考區間，以保證生物參考區間的可靠選用[2]。

1資料與方法

1.1一般資料男、女青少年各40名，年齡12～14歲，男性平均(13.5±3.2)歲，女性平均(13.1±2.6)歲。參照衛生和計劃生育委員會網站2012年12月25日公布的《臨床常用生化檢驗項目參考區間 第1部分》(WS/T 404.1-2012)行業標準，排除消化系統疾病、急慢性感染、腎臟疾病、代謝和營養疾病、風濕性疾病、甲狀腺疾病和血液系統疾病、體質量指數(BMI)≥28 kg/m2等個體。

1.2標本采集空腹8～14 h后于清晨抽取體檢人群靜脈血3 mL于促凝真空采血管中(湖南安信醫用高分子材料有限公司生產)，顛倒混勻3次，室溫凝固后3 000 r/min離心10 min，選擇無溶血、黃疸和乳糜樣血清樣本進行檢測，2 h內完成測試。

1.3儀器與試劑上海科華生物股份有限公司生產的KHB1200生化分析儀及其配套試劑盒，ALP測定方法為AMP緩沖液法，操作過程嚴格按照實驗室SOP文件的有關規定進行，檢驗過程中兩種水平質控均在控。

1.4ALP試劑盒參考區間試劑盒說明書寫明37 ℃時男性為53～140 U/L；女性為42～128 U/L。

1.5方法

1.5.1ALP生物參考區間的驗證參照美國CLSI標準與指南中的C28-A2推薦方法，收集男、女12～14歲體檢人員各40份標本，在經過性能評價驗證可靠的檢測系統上檢測，結果38名(95%)均落在現用的參考區間內，判定現用生物參考區間有效。若試驗數據有3名或3名以上的檢測結果落在參考現用的生物參考區間外，先檢查檢測系統性能、檢測程序是否正確，然后再考慮該項目是否符合人群生物特性。

1.5.2ALP生物參考區間的建立另收集120名12～14歲的健康參考個體進行ALP測定，檢測結果先做離群點判斷。數據中的疑似離群點判斷標準：將疑似離群點和其相鄰點的差值(D)和全距(R)相除，D/R應小于或等于1/3,>1/3考慮為離群點。若有2個或以上疑似離群點，將最小的疑似離群點按判斷標準處理，若大于1/3則所有點都刪去，若小于或等于1/3則保留所有數據，若有離群點被刪除后應立即將其他數據補上。

2結果

40名12～14歲男性青少年ALP水平為91～484 U/L，平均(264.2±80.1)U/L，有28例數據落在參考區間外；40例12～14歲女性青少年ALP水平為75～364 U/L，平均(185.0±92.5)U/L，有23例數據落在參考區間外。試驗數據有3名以上的檢測結果落在現用的生物參考區間外，提示該生物參考區間不適合用于12～14歲青少年，需要重新建立該年齡段的ALP生物參考區間。另外收集60例12～14歲男性青少年ALP水平為91～534 U/L，平均(265.3±86.2)U/L；60例12～14歲女性青少年ALP水平為75～486 U/L，平均(193.0±100.8)U/L。離群點檢查結果：男性離群點有2個，女性離群點有1個。分別繪制12～14歲男、女性青少年的ALP分布圖，見圖1、2，由圖1、2可見，12～14歲男、女性青少年ALP均呈正態分布，12～14歲男、女性青少年ALP參考區間分別為237.7～292.8 U/L、160.7～225.2 U/L。

圖1　　12～14歲男性青少年ALP分布圖

圖2　　12～14歲女性青少年ALP分布圖

3討論

ALP是催化有機單磷酸酯水解的非特異性酶類，幾乎存在于人體各組織中，以骨骼和腎臟濃度最高。健康人血清中ALP主要來自骨骼，由成骨細胞產生，常用于肝膽疾病特別是膽道阻塞時的診斷和鑒別診斷。

本研究發現，上海科華生物股份有限公司生產的ALP試劑盒標注的生物參考區間不適合用于12～14歲的青少年，重新確立該組人群的生物參考區間男性為237.7～292.8 U/L，女性為160.7～225.2 U/L，低于程歆詩等[3]報道的該年齡段正常參考值，可能與該人群所處地域、生活方式、BMI、試劑中緩沖液的組成有關。

本研究結果顯示，調查人群ALP參考區間高于上海科華生物股份有限公司ALP試劑說明書所述參考區間。目前，不同文獻對健康人群ALP的參考范圍報道不一。胡琴[4]報道ALP的參考范圍為男11～50 U/L、女7～32 U/L，張秀明等[5]報道ALP的參考范圍為：成人為40～132 U/L，這可能與所用檢測試劑方法和所調查的人群年齡和性別等有關。韓志鈞等[6]用Thomsa報告的應用國際臨床化學聯合會(IFCC)方法時的男、女兒童各年齡段的參考范圍，就上述兒童ALP的參考范圍，有的只按性別分類，沒有分開年齡段，有的只有成人而沒有兒童ALP的參考范圍，有的只是引用了國外報道的兒童ALP正常參考范圍。所以各個實驗室應用自己的試劑和儀器進行各年齡段的ALP正常參考范圍進行驗證和評價十分必要。

眾所周知，生物參考區間是判斷健康與否的標準，實驗室必須保證給臨床提供一個正確的生物參考區間，否則會導致誤診。但限于一般實驗室現行條件，自行制訂生物參考區間存在客觀難度，因而對實驗室的生物參考區間進行驗證是必要的，也是可行的[7]。當生物參考區間出現偏離時，應當重新確立，確保生物參考區間的準確性。

參考文獻

[1]陳桂山．臨床化檢驗項目參考區間適用性驗證[J]．中華檢驗醫學雜志，2008，31(2)：170．

[2]陳桂山，楊有業，梁錦勝，等．臨床醫學實驗室生物參考區間的建立[J]．檢驗醫學，2008，23(4)：421-424．

[3]程歆詩,程倩,邱玲,等.內蒙古自治區健康青少年血清總鈣、磷、堿性磷酸酶的參考范圍[J].現代檢驗醫學雜志，2014,29(1):12-16.

[4]胡琴．醫學檢驗辭典[M]．北京：化學工業出版社，2008：122．

[5]張秀明,溫冬梅,邱袁勇,等.臨床生物化學檢驗質量管理與標準操作規程[M].北京：人民軍醫出版社，2010:210-211.

[6]韓志鈞,黃志鋒,盧業成,等.臨床化學常用項目自動化分析法[M].3版.沈陽：遼寧科學技術出版社,2005:732.

[7]郭明衛，陳麗敏．臨產孕婦血凝四項生物參考區間驗證[J]．實驗與檢驗醫學，2014，32(1)：98．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.059

文獻標識碼：B

文章編號：1673-4130(2016)11-1577-02

(收稿日期：2016-01-13修回日期：2016-03-05)

△通訊作者，E-mail：guomingwei650318@163.com。