痰標本分析前涂片鏡檢的臨床價值分析

張　肖，朱同華，沈國榮

(江蘇省蘇州市吳江區第一人民醫院　215200)

·臨床研究·

痰標本分析前涂片鏡檢的臨床價值分析

張肖，朱同華，沈國榮

(江蘇省蘇州市吳江區第一人民醫院215200)

摘要:目的對634例痰標本進行分析前涂片革蘭染色鏡檢的結果與其培養結果進行比較，了解痰培養標本分析前涂片鏡檢的臨床價值。方法收集634例痰標本，肉眼觀察痰標本分析前的性狀、顏色等，然后進行涂片、革蘭染色、鏡檢，根據涂片鏡檢結果，將痰標本分為A、B、C 三大類。同時對上述痰培養標本進行培養鑒定，分析比較鏡檢結果與細菌檢出率的關系。結果634例痰培養標本中，涂片結果合格標本495例，占78.08%；不合格標本139例，占21.92%。共檢出457株細菌。在495例涂片結果合格的標本中，檢出408株細菌，細菌檢出率為82.42%，合格痰培養標本涂片結果與培養結果的符合率為71.72%。在139例涂片結果不合格的標本中，檢出49株細菌，檢出率為35.25%。肉眼觀察痰培養標本分析前的性狀，黏性、血性和膿性痰的合格率和細菌檢出率明顯高于水樣或泡沫樣痰；在不同顏色痰標本中，無色痰的合格率和細菌檢出率低于其他顏色的痰標本。結論痰培養標本分析前做涂片革蘭染色鏡檢可以篩除不合格的痰標本，提高痰培養的細菌檢出率，對檢驗結果的正確與否具有重要價值。

關鍵詞:分析前；痰涂片；痰顏色；痰性狀；痰培養

急、慢性下呼吸道感染、社區獲得性感染及醫院獲得性感染是臨床各科室住院患者呼吸系統感染的常見病，因此對痰液進行培養及藥物敏感度試驗具有重要臨床意義。痰標本留取質量直接關系到細菌培養的準確性，痰培養前做涂片鏡檢評價其質量，是保證標本高質量的一個重要環節，只有符合標準的痰標本才能進一步培養鑒定。如何把好痰標本質量關是培養前的重要問題。在臨床工作中收集的痰標本很多是不合格的，結果會導致培養不出細菌或即使培養出細菌也是口腔或咽部的正常菌群，這會導致臨床誤診及抗菌藥物濫用。本研究對634例痰標本在分析前進行涂片、染色鏡檢，根據上皮細胞及白細胞數量，對痰標本的質量進行評價，加強細菌培養的質量控制，并與分離培養結果進行對比分析，現報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源選取2015年1月1日至8月20日來本院住院患者的634例痰培養標本。

1.2儀器與試劑血平板、巧克力平板、中國藍平板和沙保羅平板，快速革蘭染色液為珠海貝索生物技術有限公司產品。Siemens MicroScan WalkAway96plus全自動微生物鑒定儀及法國生物梅里埃公司API細菌鑒定系統，細菌藥敏紙片為英國Oxoid公司產品。

1.3方法

1.3.1涂片染色鏡檢用無菌棉簽挑取膿性、血性、黏性痰液制成薄而均勻的涂片，自然干燥后革蘭染色鏡檢。低倍鏡下觀察白細胞和上皮細胞數目，依據《臨床微生物檢驗標準化操作》第2版[1]，按照A、B、C三分類的標準對痰標本進行分類，A、B為合格，適合做培養，C為不合格，不適合做培養。

1.3.2分離培養將痰標本中加入等量的1%胰酶溶液，使痰液均質化后備用。處理后接種于血平板、巧克力平板、中國藍平板和沙保羅平板，置5%～10%CO2環境中，35 ℃培養18～24 h，細菌培養陽性用Siemens MicroScan WalkAway96plus全自動微生物鑒定儀進行鑒定和藥物敏感試驗。

1.4統計學處理采用SPSS19.0軟件進行統計學分析，計數資料以n(%)表示，各組間率的比較采用χ2檢驗，配對資料比較采用配對χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1痰培養標本的合格率見表1、2。收集634例痰培養標本，依據痰標本A、B、C三分類標準，合格的痰培養標本495例，合格率為78.08%，包括A類260例，占總數的41.01%，B類235例，占總數的37.07%，不合格的C類139例，占總數的21.92%。痰培養標本涂片前對其狀和顏色進行肉眼觀察，水或泡沫樣痰標本的合格率明顯低于其他性狀痰標本，差異有統計學意義(P<0.05)。無色的痰標本合格率也同樣低于其他顏色的痰標本，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2痰培養標本的細菌檢出率

2.2.1A、B、C三分類痰標本細菌檢出率見表3。634例痰培養標本有457例標本檢出有細菌(排除草綠色鏈球菌、奈瑟菌等口腔正常菌群)，陽性檢出率為72.08%，合格標本檢出率為82.42%(408/495)，不合格標本檢出率為35.25%(49/139)，二者差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表1　　634例不同性狀痰培養標本合格率比較

表2　　不同顏色痰標本合格率比較

2.2.2不同性狀痰標本細菌檢出結果見表4。痰標本的性狀可分為4種，包括水或泡沫樣、血性、黏液樣、膿性。水或泡沫樣痰標本細菌檢出率顯著低于其他性狀的痰標本，差異有統計學意義(P<0.05)。

表3　　A、B、C三分類痰標本細菌檢出率

2.2.3不同顏色痰標本細菌檢出結果見表5。痰液的顏色可分為無色、白色、淡黃色、黃色、黃綠色、鐵銹色、紅色等，無色痰標本細菌檢出率低于其他顏色的痰標本，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2.4495例合格痰標本涂片和培養結果比較見表6。495例合格痰標本涂片結果與培養結果差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2.5不同痰標本涂片與培養結果在A、B、C分類中的分布見表7。

表4　　不同性狀痰標本細菌檢出結果[n(%)]

表5　　不同顏色痰標本細菌檢出結果[n(%)]

表6　　495例合格痰標本涂片和培養結果比較[n(%)]

注：(+)表示陽性，(-)表示陰性。

表7　　不同痰標本涂片與培養結果在A、B、C分類中的

注：(+)表示陽性，(-)表示陰性。

3討論

在微生物實驗室工作中發現，造成痰標本合格與否的原因主要有以下幾個方面：(1)臨床醫護人員對痰標本采集不重視，患者留取痰液不規范，醫護人員沒有給予患者指導，收集的標本沒能采集新鮮和深咳的痰液；(2)患者采集痰液后沒能及時送檢或檢驗人員沒有立即處理接種標本，以及痰液受到口咽處正常細菌的污染；(3)實驗室檢驗人員自身的問題，在痰涂片與培養時沒有挑取膿性、黏性或血性的部分，涂片厚薄程度不當等。因此痰標本在培養前先做涂片檢查是下呼吸道標本細菌學檢查的必要環節之一。不合格痰培養產生錯誤的結果誤導了臨床，拖延了治療時間，造成醫療浪費。本院2015年1～8月所收集的634例痰標本合格率為78.08%，其合格率稍高于楊小琴[2]的報道。

在痰標本處理之前，要對標本進行肉眼觀察。表1結果顯示，不同性狀的痰標本其合格率差異很大，血性、膿性痰標本合格率超過95.0%，而水樣或泡沫樣痰的合格率較低，為29.8%。由此可以看出,在鏡檢前肉眼觀察并篩選痰標本過程，要特別注意水樣或泡沫樣的標本，應根據鏡檢結果決定是否重新留置標本。表2結果顯示，不同顏色痰標本合格率也是不盡相同，黃綠色痰標本合格率最高,為100.0%，而無色痰合格率低，為30.72%。表3結果顯示，A類和B類標本的檢出率相對較高，是由于A類和B類標本中膿性標本較多，而C類標本以水樣或泡沫樣標本為主，所以檢出率較低。

表4結果顯示，水樣或泡沫樣痰細菌檢出率相對較低，而膿性痰檢出率最高，其次是血性痰。這一結果表明膿性或血性痰細菌感染的概率相對較大，提示當檢驗人員在工作中遇到膿性或血性痰時應仔細觀察鏡下細菌形態和培養結果，避免漏檢情況發生。表5結果顯示，經過痰標本顏色不同區分的細菌培養結果有明顯差異，這與國外Johnson等[3]報道的結果基本一致。淡黃色、黃色、黃綠色和鐵銹色痰細菌的檢出率相對較高。無色痰其細菌檢出率很低。所以根據顏色對痰標本進行初篩，判斷是否繼續培養或重新留置標本是非常必要的。表6結果顯示，495例痰標本中涂片與培養結果符合率達到71.72%，與國內學者陳險峰等[4]報道在368例合格痰標本中涂片與培養結果的符合率為71.19%結果基本一致，由此證實了痰涂片檢查對細菌培養結果具有預先判斷的輔助價值。表7結果顯示，涂片呈陽性培養未見相應細菌的情況，并不能排除感染的可能性，可能是患者長期應用抗菌藥物的治療及L型菌、厭氧菌和苛養菌等不常見致病菌感染，痰標本中苛養菌不能在普通培養基上生長或是其他生長緩慢的細菌所致，也有可能是痰標本不及時送檢導致細菌裂解死亡。一般而言，鏡檢能看到細菌，且在合適的培養條件下都應該能培養出來。但表7中出現涂片未見細菌而培養檢出細菌的情況，這種情況的發生可能是涂片太薄，沒有挑取膿性或黏性痰標本，也有可能是不動桿菌屬，其形態易與奈瑟菌混淆，還有可能是檢驗人員自身的業務能力問題導致誤檢，這些都是造成涂片陰性而培養陽性的重要原因[5]。

總之，痰標本涂片染色鏡檢是快速診斷下呼吸道感染性疾病中最簡便且經濟的方法之一，其出結果速度快，能在早期為患者治療和診斷提供重要依據。檢驗人員肉眼觀察痰標本性狀和顏色可對細菌培養結果具有預先判斷的輔助價值。痰涂片染色可篩選出合格的痰標本，提高痰培養細菌檢出率[6]。痰標本留取送檢后，檢驗人員根據涂片染色結果和細菌形態及排列初步判斷細菌種類，從而有助于協助臨床在早期診療過程中選擇合適的抗菌藥物，具有指導作用[7]。另外對于檢驗人員而言，其痰標本涂片鏡檢在鑒定細菌時，應將涂片與培養結果結合，判斷二者是否一致，這樣才有助于提高痰標本細菌檢出的準確性。

綜上所述，痰標本革蘭染色涂片鏡檢是非常重要的。

參考文獻

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[2]楊小琴．痰涂片檢查與細菌培養的一致性分析[J]．檢驗醫學與臨床，2010，7(14)：1476-1477.

[3]Johnson AL，Hampson DF，Hampson NB． Sputumcolor:potential implications for clinical practice[J].Respir Care，2008，53(4):450-454．

[4]陳險峰，周庭銀．痰標本涂片革蘭染色鏡檢的臨床意義[J]．檢驗醫學，2013，28(6)：499-502.

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[6]楊朵，辛續麗，馬東媛，等．痰培養標本合格性評估標準的比較[J]．檢驗醫學，2012，27(9)：773-775.

[7]Raghavendran K，Wang J，Belber C，et al.Predictive value of aputum Gram stain for the determination of appropriate antibiotic therapy in ventilator associate pneumonia[J]．Trauma，2007，62(6)：1377-1382.

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.048

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)11-1559-03

(收稿日期：2016-01-24修回日期：2016-03-13)