多次輸注血小板后產(chǎn)生抗-E和抗-c抗體1例

黃美容，黃　健，張紹基，顏利江，陳月寬，楊　宇

(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院:1.輸血科；2.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科,貴州遵義 563003)

·臨床研究·

多次輸注血小板后產(chǎn)生抗-E和抗-c抗體1例

黃美容1，黃健2，張紹基1，顏利江1，陳月寬1，楊宇1

(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院:1.輸血科；2.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科,貴州遵義 563003)

摘要:目的通過本文案例提醒廣大輸血工作者，輸注血小板也能產(chǎn)生(非D)Rh抗體。方法回顧臨床資料，結(jié)合血型血清學(xué)試驗(yàn)，對(duì)輸血前標(biāo)本進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選。結(jié)果該患者輸血前不規(guī)則抗體篩選陰性，住院期間共輸注了5個(gè)治療量單采血小板，28 U濃縮血小板，在首次輸血小板相隔22 d后，不規(guī)則抗體篩選陽性，并鑒定出抗-E和抗-c抗體。結(jié)論僅輸注血小板也能產(chǎn)生(非D)Rh抗體。

關(guān)鍵詞:血小板；輸注；抗-E抗體；抗-c抗體

血小板表面表達(dá)血小板相關(guān)抗原和血小板特異性抗原，但不表達(dá)Rh抗原，Rh抗原僅存在于紅細(xì)胞上[1]。作者在工作中發(fā)現(xiàn)1例患者由于多次輸注血小板后導(dǎo)致抗篩陽性，經(jīng)鑒定該不規(guī)則抗體為抗-E和抗-c，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料患者，女，36歲，因“宮頸癌綜合治療后2年余，淤點(diǎn)、淤斑半月”入院，半月前訴口服中藥(具體不詳)后出現(xiàn)全身散在淤點(diǎn)、淤斑及口腔出血。既往無輸血史，有妊娠史。入院診斷：(1)宮頸鱗癌Ⅱb期放、化療后；(2)Ⅳ°骨髓抑制。入院后積極給予血小板治療、營(yíng)養(yǎng)支持等對(duì)癥處理，但復(fù)查血小板仍維持在(1～3)×109/L。骨髓涂片示：骨髓見巨核增生，分類有成熟停滯現(xiàn)象，血小板分布提示數(shù)量減少，堿性磷酸酶染色積分增高，結(jié)合患者輔助檢查結(jié)果，考慮血小板減少性紫癜，予地塞米松10 mg輸注抑制免疫，重組人血小板生成素注射液升血小板，配血小板輸注減低出血風(fēng)險(xiǎn)，甘露聚糖肽調(diào)節(jié)免疫，止血合劑止血等對(duì)癥處理。但血小板上升不明顯，遂加用長(zhǎng)春新堿1 mg靜脈滴注，1次/周，抑制免疫治療。后患者血小板呈上升趨勢(shì)，無明顯出血傾向，血小板總數(shù)：63×109/L，病情好轉(zhuǎn)出院。

1.2儀器與試劑FYQ免疫微柱孵育器、BYL型血型血清學(xué)多用離心機(jī)(長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司)。不規(guī)則抗體篩選微柱凝膠卡、抗人球蛋白檢測(cè)微柱凝膠卡、Rh血型抗原檢測(cè)微柱凝膠卡購(gòu)自長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限公司，均在有效期內(nèi)使用。ABO、Rh(D)血型定型試劑、不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞(批號(hào)：20157009)、譜細(xì)胞(批號(hào)：20151020)購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司。A、B、O型紅細(xì)胞由本實(shí)驗(yàn)室自配。

1.3方法(1)ABO血型鑒定：正定型采用玻片法，反定型采用試管法。(2)Rh血型抗原鑒定：采用微柱凝膠法按試劑說明書操作。(3)不規(guī)則抗體篩選：將0.8%的篩選細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號(hào)各50 μL分別加入不規(guī)則抗體篩選微柱凝膠卡對(duì)應(yīng)孔中，再分別對(duì)應(yīng)加入50 μL待檢血漿，37 ℃孵育15 min，離心觀察結(jié)果。(4)不規(guī)則抗體鑒定及判斷方法參照文獻(xiàn)[2]操作。

2結(jié)果

2.1血型鑒定結(jié)果ABO血型：O型，Rh血型：CCDee。

2.2患者住院期間輸注的血液成分、劑量及不規(guī)則抗體篩選結(jié)果見表1。

2.3不規(guī)則抗體篩選結(jié)果見表2。

2.4不規(guī)則抗體鑒定結(jié)果見表3。結(jié)合該患者Rh血型：CCDee，按照反應(yīng)格局，初步判斷不規(guī)則抗體為抗-c，并可能合并抗-E。選用大量O型CcDee紅細(xì)胞吸收患者血漿后，再用譜細(xì)胞做鑒定試驗(yàn)，結(jié)果證實(shí)含抗-E。用微柱凝膠法檢測(cè)抗-E效價(jià)為1∶32；抗-c效價(jià)為1∶16。

表1　　患者住院期間輸注的血液成分、劑量及不規(guī)則

表2　　患者不規(guī)則抗體篩選檢測(cè)結(jié)果

注：+表示陽性，0表示陰性。

表3　　患者不規(guī)則抗體鑒定結(jié)果

注：+表示陽性，0表示陰性，/表示廠家未做這項(xiàng)檢測(cè)，結(jié)果未知。

3討論

不規(guī)則抗體產(chǎn)生的原因主要包括：輸注了與受血者抗原不合的血液成分；器官移植；母胎血型不合的妊娠。但個(gè)體是否產(chǎn)生不規(guī)則抗體還取決于抗原的劑量及暴露抗原位點(diǎn)的多寡[3]。本研究中該患者入院前有妊娠史，無輸血史，因無法采集患者子女血液做Rh抗原檢測(cè)，故不能排除該抗體產(chǎn)生為輸注血小板中混入的紅細(xì)胞刺激產(chǎn)生次級(jí)免疫反應(yīng)的可能性。

但該(非D)Rh抗體的產(chǎn)生，由輸注血小板中混入的紅細(xì)胞刺激產(chǎn)生初級(jí)免疫反應(yīng)的可能性也不能排除。因輸血前不規(guī)則抗體篩選為陰性，在輸注了2個(gè)治療量單采血小板，10 U濃縮血小板，間隔5 d，不規(guī)則抗體篩選也為陰性，又陸續(xù)輸注了3個(gè)治療劑量單采血小板，18 U濃縮血小板，在首次輸血小板相隔22 d后，不規(guī)則抗體篩選為陽性。而濃縮血小板和單采血小板都有可能刺激產(chǎn)生(非D)Rh抗體。這是因?yàn)闈饪s血小板中混入的紅細(xì)胞較多，而28 U的濃縮血小板需要接受14例不同Rh抗原的供血者，因之前未預(yù)料輸注血小板會(huì)產(chǎn)生(非D)Rh抗體，所以供血者的Rh抗原除D外，其他4個(gè)抗原均未檢測(cè)，不規(guī)則抗體篩選檢測(cè)間隔時(shí)間也相對(duì)較長(zhǎng)。這就提醒廣大輸血工作者，輸注任何血液成分前必須做不規(guī)則抗體篩選。

單采血小板在紅細(xì)胞污染少方面優(yōu)于濃縮血小板，一般認(rèn)為輸注后不會(huì)產(chǎn)生Rh抗體。但在國(guó)外的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，每份治療量的單采血小板混入的紅細(xì)胞為0.4～0.8 μL，紅細(xì)胞衍生微粒為0.1～1.0 μL，有3例患者分別在輸注單采血小板后22、37、82 d檢測(cè)到(非D)Rh抗體，可能為那些體積小，數(shù)量多的紅細(xì)胞衍生微粒比紅細(xì)胞更容易導(dǎo)致同種免疫，因?yàn)樗鼈兏菀妆豢乖蔬f細(xì)胞吞噬[4]。在法國(guó)的一項(xiàng)關(guān)于輸注血小板后產(chǎn)生紅細(xì)胞抗體長(zhǎng)達(dá)5年的研究顯示,輸注血小板后，產(chǎn)生抗Rh血型系統(tǒng)的抗體最多[5]。

關(guān)于輸注血小板產(chǎn)生(非D)Rh抗體的病例國(guó)內(nèi)報(bào)道較少，文獻(xiàn)[6]報(bào)道的3例與國(guó)外文獻(xiàn)[4]報(bào)道的案例資料基本一致，其可靠性有待考究。本研究發(fā)現(xiàn)了這例患者單純輸注血小板后產(chǎn)生(非D)Rh抗體，雖然對(duì)患者輸注血小板不會(huì)產(chǎn)生太大的影響，但若再次懷孕有發(fā)生新生兒Rh-溶血病的風(fēng)險(xiǎn)；再次輸注紅細(xì)胞，可能發(fā)生配血不合，或遲發(fā)性輸血不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。

因此，本研究通過本病例提醒廣大輸血工作者：(1)單純輸注血小板，也能產(chǎn)生(非D)Rh抗體；(2)隨著輸血的增多，產(chǎn)生(非D)Rh抗體的報(bào)道也增多[7-10]。所以呼吁將Rh 5個(gè)抗原作為常規(guī)檢查項(xiàng)目，并相容性輸注，以減少輸血不良反應(yīng)及新生兒溶血病的發(fā)生。

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.035

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)11-1535-03

(收稿日期：2016-01-25修回日期：2016-03-07)