泌尿生殖系感染患者尿液中沙眼衣原體、淋球菌、解脲脲原體感染分析

羅　藝，徐文莉，張洪德，李　康，廖長征

(廣東省深圳市龍崗中心醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室　518116)

·論著·

泌尿生殖系感染患者尿液中沙眼衣原體、淋球菌、解脲脲原體感染分析

羅藝，徐文莉，張洪德，李康，廖長征

(廣東省深圳市龍崗中心醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室518116)

摘要:目的檢測泌尿生殖系統(tǒng)感染患者尿液中沙眼衣原體(CT)、淋球菌(NG)、解脲脲原體(UU)感染狀況，并進(jìn)一步了解CT、NG、UU病原體在深圳市的感染情況，為臨床診治提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法采集疑似泌尿系統(tǒng)感染的609例患者(其中男305例，女304例)尿液，并選取其中108例患者同時(shí)采集尿液、分泌物，采用實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測CT、NG、UU。結(jié)果CT、NG、UU在分泌物及尿液中的檢測結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。單純感染UU陽性率最高,為42.04% (256/609);CT+NG+UU感染患者感染率為0.33%(2/609)；CT+UU感染是雙重感染中最高，為2.63%(16/609)。男性患者CT、NG、UU感染率分別為:29.18%(89/305)、14.10%(43/305)、52.45%(160/305)；女性患者CT、NG、UU感染率分別是：3.29%(10/304)、2.63%(8/304)、31.58%(96/304)。<20歲者CT、NG、UU陽性檢出率為64.00%，20～29歲者為63.16%，>29～39歲者為63.34%，>39歲者為75.00%。結(jié)論采用尿液和分泌物檢測CT、NG 、UU的檢出率基本一致； CT、NG、UU的感染率后者明顯高于前二者，混合感染以CT+UU感染率最高；男性患者CT、NG、UU感染率均高于女性。

關(guān)鍵詞:泌尿生殖系統(tǒng)感染；尿液；聚合酶鏈反應(yīng)；沙眼衣原體；淋球菌；解脲脲原體

性傳播疾病(STD)是指通過性行為或類似性行為傳播的一類疾病。據(jù)WHO估計(jì)，全球15～49歲人群每年發(fā)生STD病例約3.4億，日均約有100萬人感染性病。在性病病原體中，沙眼衣原體(CT)、淋球菌(NG)、解脲脲原體(UU)所致的泌尿生殖系統(tǒng)感染已成我國各地區(qū)主要的STD。目前國內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院都是采用泌尿生殖系統(tǒng)分泌物檢測，但此采樣方法需要經(jīng)專業(yè)醫(yī)務(wù)人員完成，患者自行采樣困難。本研究擬對(duì)患者尿液與分泌物檢測結(jié)果進(jìn)行比較，分析尿液標(biāo)本檢測的臨床價(jià)值，并進(jìn)一步分析探討深圳地區(qū)人群CT、NG、UU的感染情況，報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2014年10月至2015年9月在深圳市龍崗中心醫(yī)院婦產(chǎn)科、泌尿外科及皮膚性病科就診的疑似泌尿生殖系統(tǒng)感染的患者609例，囑患者取清晨首次尿液，或長時(shí)間(至少1 h)不排尿的首段尿0.5 mL，與0.5 mL尿樣保存液混合，該樣品為尿液待檢標(biāo)本，-20 ℃冰箱保存。在609例患者中選取108例同時(shí)采集分泌物：將醫(yī)用棉拭子伸入男性尿道口或女性宮頸口約1～2 cm,旋轉(zhuǎn)1周，停留10 s后取出，拭子頭放入裝有1 mL生理鹽水的采集管中，浸泡貼壁擠干后，取0.5 mL加入0.5 mL保存液混合，該標(biāo)本為分泌物待檢標(biāo)本，-20 ℃冰箱保存。

1.2試劑與儀器試劑盒由上海任度生物科技有限公司生產(chǎn)。檢測儀器為美國ABI 7500 PCR儀。

1.3檢測方法將所有試劑溫度平衡到室溫(25 ℃)，充分混合，按每人份40 μL反應(yīng)液+2.5 μL檢測液配置擴(kuò)增檢測液，200 μL生理鹽水+200 μL尿樣保存液+10 μL對(duì)照(陰性、陽性)，待測樣品400 μL(待測樣品已按1∶1加入保存液)，每管加入100 μL核酸提取液，振蕩混勻，60 ℃溫浴5 min，室溫放置10 min，轉(zhuǎn)移到磁力架吸附，靜置5 min，吸棄上清液，然后加入1 mL洗滌液，輕微振蕩混勻，重復(fù)上一步驟。靜置5 min，完全吸走廢液，然后加入40 μL擴(kuò)增檢測液，振蕩下磁珠，取30 μL帶磁珠的液體到8連排PCR管中60 ℃溫浴10 min，42 ℃溫浴5 min，每孔加入10 μL SAT酶放入核酸擴(kuò)增儀，酶平衡至42 ℃開始擴(kuò)增(程序提前設(shè)好：42 ℃每個(gè)循環(huán)1 min，40個(gè)循環(huán)，每分鐘采一次熒光，選取FAM通道)，擴(kuò)增結(jié)束分析結(jié)果。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以n(%)表示，采用χ2檢測，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1分泌物與尿液CT、NG、UU陽性檢測結(jié)果比較見表1。108例患者同時(shí)檢測分泌物和尿液中CT、NG、UU檢測結(jié)果基本一致，組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1　　108例分泌物與尿液CT、NG、UU陽性

2.2609例患者尿液感染CT、NG、UU陽性結(jié)果比較見表2。單獨(dú)感染UU最常見，其總陽性率為42.04%。CT、NG、UU進(jìn)行組間比較，χ2分別為17.52、32.62、92.17，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2　　患者尿液感染CT、NG、UU陽性結(jié)果比較(n=609)

2.3各種CT、NG、UU混合感染類型陽性結(jié)果比較見表3。混合感染CT+UU最常見,與其他混合感染類型比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表3　　各種類型混合感染陽性結(jié)果比較(n=609)

2.4不同性別感染者CT、NG、UU陽性結(jié)果比較見表4。男性組CT、NG、UU感染率與同指標(biāo)女性組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.5不同年齡階段CT、NG、UU陽性檢出結(jié)果比較見表5。609例陽性感染患者中，年齡最小15歲，最大58歲，按年齡劃分為4組，雖各組間感染率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但20～29歲組及大于29～39歲組陽性患者最多。

表4　　男性和女性組CT、NG、UU陽性結(jié)果比較[n(%)]

表5　　不同年齡階段CT、NG、UU陽性檢出

3討論

STD是指可以通過性接觸而感染的疾病，亦稱“性病”。傳統(tǒng)觀念是指通過性交行為傳染的疾病，主要病變發(fā)生在生殖器部位。CT可引起多種生殖道感染，包括男性的尿道炎和附睪炎，女性的宮頸炎及盆腔炎等，生殖道 CT 感染具有流行率高和無癥狀攜帶者多的特點(diǎn)[1]。人類是NG唯一的自然宿主，淋病主要由性接觸而傳播。NG侵入泌尿生殖系統(tǒng)繁殖，男性發(fā)生尿道炎，女性引起尿道炎和子宮頸炎，如治療不徹底，可擴(kuò)散至生殖系統(tǒng)。胎兒可經(jīng)產(chǎn)道感染造成新生兒淋病性急性結(jié)膜炎。人類對(duì)NG無自然免疫力，均易感，病后免疫力不強(qiáng)，不能防止再感染。UU是6種脲原體屬中的一種，與人類泌尿生殖道感染有密切關(guān)系，能利用自身的尿素酶分解尿素后以提供代謝的能源，在分類上屬支原體科脲原體屬。UU是人類泌尿生殖道常見的寄生菌之一，在特定環(huán)境下可致病。在人體的定植可有2次上升趨勢，即分娩時(shí)由母體產(chǎn)道感染新生兒，以后迅速減少；從性生活開始又漸增多。

3.1CT、NG、UU 3種病原體陽性率分布和地域性分布特點(diǎn)由CT、NG、UU導(dǎo)致的泌尿道炎或其他混合感染發(fā)病率逐年上升且存在一定地域差異[2]。廣東地區(qū)CT、NG、UU 3種病原體感染的流行較為嚴(yán)重，且呈逐年上升趨勢[3]。可能因其獨(dú)特的亞熱帶季風(fēng)氣候，空氣溫暖濕潤，病原菌易于繁殖；且因其流動(dòng)人口密集，STD傳播速度較經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)的內(nèi)陸地區(qū)要快。近年來，深圳多家醫(yī)院中因不孕不育、流產(chǎn)、早產(chǎn)等原因就診的夫婦中CT、NG、UU感染引起病例正在快速增長[4]。

3.2采用尿液檢測與分泌物檢測結(jié)果比較采用尿液標(biāo)本與分泌物相比，最突出的優(yōu)點(diǎn)是取樣方便，不會(huì)造成患者因取樣帶來的不適與疼痛。本研究中108例患者尿液與分泌物中CT、NG和UU 3種病原體的總檢出率分別為66.67%與68.51%，二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；且尿液的3種病原體總檢出率與文獻(xiàn)[5-6]報(bào)道采用分泌物檢測的生殖系統(tǒng)分泌物檢測陽性率基本相符，因此使用尿液檢測方法更值得臨床推廣應(yīng)用。

3.3各種病原體的性別分布特點(diǎn)各種病原體的陽性檢出率與性別差異與文獻(xiàn)[7-8]報(bào)道都不一致。本研究結(jié)果顯示，男性組CT、NG、UU的陽性率均顯著高于女性組，與文獻(xiàn)報(bào)道有差別，這可能與本地區(qū)的人口結(jié)構(gòu)有關(guān)。深圳市2010年第6次全國人口普查主要數(shù)據(jù)顯示本市常住人

口1 035.79萬人，其中戶籍人口仍有251.03萬人。深圳市外來務(wù)工人員中青壯年與配偶分居兩地男性居多，而此類人群文化程度不高，且存在不固定性伴侶，因此以泌尿生殖系統(tǒng)疾病就診的患者以男性居多。不論檢出男、女性各自的感染率如何，STD只要一方感染，均有傳播給性伴侶的可能。因此，需要同防同治才能隔絕病原體反復(fù)感染。

3.4CT、NG、UU感染的年齡分布本研究發(fā)現(xiàn)，就診患者年齡最小15歲，最大58歲，患者年齡集中在35歲以下，20～39歲人群中陽性患者達(dá)339例，占感染人數(shù)的83.50%，這部分患者正值育齡期，患者感染病原體后如果不積極配合治療，不孕不育、流產(chǎn)、早產(chǎn)現(xiàn)象將不能得到有效遏制。因此應(yīng)將這部分患者作為STD防控的重點(diǎn)人群。

綜上所述，檢測尿液中CT、NG、UU 3種病原體的方法較傳統(tǒng)采用分泌物檢測相比，具有無創(chuàng)、無痛、取樣方便等特點(diǎn)，且檢出率與分泌物檢測率基本一致，因此值得大力推廣。CT、NG、UU的感染具有地域性、性別差異，以及好發(fā)年齡較集中等特點(diǎn)。因此，應(yīng)針對(duì)高發(fā)人群開展相關(guān)知識(shí)宣教，并做好相應(yīng)檢測和治療，以達(dá)到防控STD的目的。

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Analysis on prevalence of Chlamydia trachomatis,Neisseria gonorrhoeae and Ureaplasma urealyticum infections in the patients with urogenital system infection

LUOYi,XUWenli,ZHANGHongde,LIKang,LIAOChangzheng

(DepartmentofClinicalCentralLaboratory,LonggangCenterHospital,Shenzhen,Guangdong518116,China)

Abstract:ObjectiveTo detect and analyze the Chlamydia trachomatis (CT),Neisseria gonorrhoeae (NG),Ureaplasma urealyticum (UU) infection status of urogenital system and to provide laboratory evidence for clinical diagnosis and treatment.MethodsThe urine of 609 patients with suspected urinary tract infections (305 male cases,304 female cases) were selected as well as secretion of urinary and reproductive system in 108 patients among them.Using real-time fluorescence polymerase chain reaction technique,CT,NG and UU were detected.ResultsCT,NG and UU between secretions and urine had no significant difference (P>0.05).Positive rate of UU in simple urinary track infection was the 42.04% (256/609),higher than that of CT and NG.The rate of mixed infection of CT,NG and UU was 0.33% (2/609).The rate of co-infection of CT and NG was up to 2.63% (16/609),higher than any other kind of co-infection.Rates of CT,NG and UU infection in male patients were 29.18%(89/305),14.10%(43/305) and 52.45%(160/305),respectively.And the rates of CT,NG and UU infection in female were 3.29% (10/304),2.63% (8/304) and 31.58% (96/304),respectively.In addition,the total infection rate in the patients younger than 20 years old,from 20 to 28 years,from 29 to 38 years and older than 38 years were 64.00%,63.16%,63.34% and 75.00%,respectively.ConclusionThe detection rates in secretions are coincident with that in urine.The infection rate of UU is significantly higher than that of CT and NG.The mixed infection rate of CT and UU is the highest.The infection rates of males are higher than that of females.

Key words:urogenital system infection;urine;polymerase chain reaction;chlamydia trachomatis;neisseria gonorrhoeae;ureaplasma urealyticum

作者簡介：羅藝，女，主管技師，主要從事臨床檢驗(yàn)研究。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.015

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)11-1486-03

(收稿日期：2016-01-14修回日期：2016-03-21)