ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀檢測HBsAg的性能評估

左　芳,劉更夫,尚小玲

(湖北省黃石市中心醫院：1.醫學檢驗科；2.臨床輸血科　435000)

·論著·

ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀檢測HBsAg的性能評估

左芳1,劉更夫2△,尚小玲2

(湖北省黃石市中心醫院：1.醫學檢驗科；2.臨床輸血科435000)

摘要:目的對ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀進行使用前的性能評估。方法以ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀的定量檢測項目HBsAg進行精密度、符合率、檢出限、攜帶污染率檢測。結果HBsAg批內精密度、批間精密度均小于5.1%，精密度、符合率、檢出限及攜帶污染率均符合ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀的性能要求。結論ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀HBsAg的精密度、符合率、檢出限及攜帶污染率均達到性能要求，同時能滿足臨床實驗室檢測要求。

關鍵詞:全自動免疫分析儀；定量檢測；性能評估

目前國內乙型肝炎5項大多是采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)測定，但因其方法學靈敏度不夠，對臨界值標本的檢出率不高，因這一缺點在一定程度上給臨床診治帶來了困難[1]。隨著醫療技術的發展，臨床免疫學檢驗已經由手工操作進入到自動化、微量化檢測的時代，ELISA雖具有操作簡單、成本低廉、試劑有效期長等優點，但是其靈敏度和重復性不及免疫發光技術，因此，越來越多的實驗室引進全自動免疫分析儀用于感染因子的檢測。然而低濃度感染時ELISA檢測的靈敏度較低，特異性高；中高濃度感染時ELISA和化學發光法檢測的敏感度相近[2]。在ELISA檢測乙型肝炎5項的少見模式標本中，化學發光法檢測的準確度明顯高于ELISA[3]。本研究采用先進的全自動化學發光免疫分析系統，其具有靈敏度高、重復性好和準確性高的特點[4]。由于相同的儀器設備在不同使用狀態下，其性能指標有可能出現性能差異，依據ISO15189:CNAS-2012《醫學實驗室質量和能力認可準則》中的要求，在新進設備投入使用前，需對其檢測系統中的檢測項目進行檢驗方法和程序的分析性能驗證。現就黃石市中心醫院醫學檢驗科ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀中檢測項目HBsAg進行性能驗證，現將性能驗證情況報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源選自本院中心院區門、急診患者及住院患者，以及健康體檢者，所有標本均為靜脈血，3 500 r/min離心10 min后分離血清待檢。

1.2儀器與試劑采用美國雅培公司生產的ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀，使用其配套檢測試劑及定標品；選取北京康徹思坦生產的HBsAg弱陽性定值質控品。

1.3方法

1.3.1精密度驗證

1.3.1.2判定標準所有檢測前必須確認儀器運轉正常，質控在控后方可上機檢測。批內精密度CV值小于或等于廠家給定的10%，批間精密度CV值小于或等于廠家給定的15%，則認為驗證通過。

1.3.2符合率驗證

1.3.2.1驗證方案以最近2次參加衛生部臨床檢驗中心室間質量評價(EQA)室間質量回報的數據為基礎，對回饋的報告進行相應的數據分析。

1.3.2.2判斷標準如果臨床檢驗中心回饋的報告顯示該項目狀態為通過，則認為該項目準確度符合要求。

1.3.3線性評估

1.3.3.1試驗方案選取低、高值血清標本各1份(盡量靠近廠家試劑說明書的線性值)，按如下方式將低值(L)和高值(H)血清配制成5種濃度值。按5 L、4 L +l H、3 L +2 H、2 L +3 H、1 L +4 H、5 H比例進行混合,混合均勻后上機檢測，1 d內做2次檢測，取均值。

1.3.3.2線性統計以直接測定結果計算得出的相應濃度為X，即理論值，以通過稀釋測定結果為Y，即實測值，做回歸統計Y=bX+a。得到a、b及r值。

1.3.3.3判斷標準若b在0.97～1.03范圍內，并且r2≥0.975則認為線性通過驗證。若b不在0.97～1.03范圍內，舍去高值或低值組數據，另做回歸統計，直至縮小的分析范圍其回歸方程b的判斷符合要求，則該范圍為線性范圍。

1.3.4攜帶污染率

1.3.4.1分別收集HBsAg高值血清(H)、低值血清(L)各l份，依次按H1、L1、H2、L2、H3、L3次序測定。

1.3.4.2CR=[(L1-L3)/(H3-L3)×100%]。CR為攜帶污染率；L1為低濃度臨床標本的第1次測定值；L3為低濃度臨床標本的第3次測定值；H3為高濃度臨床標本的第3次測定值。

1.3.4.3以CR≤1%為合格判定標準。

2結果

2.1將HBsAg高、中、低3種水平的血清分別混勻，每種水平連續測定20次，每天檢測1次，批間CV低、中、高值分別為5.01%、5.02%、5.10%；批內CV低、高值分別為3.73%、3.96%；質控物(1 ng/mL)為0.96 U/mL，質控物(5 ng/mL)為4.77 U/mL。

2.2以最近2次參加衛生部臨床檢驗中心EQA室間質量回報的數據為基礎，對回饋的報告進行相應的數據分析，2015年 3 月EQA標本數5例，通過5例(100%)，2015年 6 月EQA標本數5例，通過5例(100%)，2次成績均合格。

2.3線性范圍評估 HBsAgHBsAg相關方程為Y=1.026X-0.729，相關系數為0.996，測量線性范圍為0.02～236.30 ng/mL，廠家線性范圍為0～250 ng/mL。

2.4攜帶污染率測定將HBsAg高值血清和低值血清按照H1、L1、H2、L2、H3、L3依次測定，其檢測值分別為236.73、0.04、237.02、0.02、235.10、0.02 ng/mL，污染率為0.35%，攜帶污染率均小于1.00%。

3討論

ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀采用微粒子免疫發光技術，對多項免疫項目進行定量或定性分析，具有檢測原理先進、檢測速度快、運行模式多元化等優點，已逐步應用于臨床實驗室。臨床診斷中最重要的就是高靈敏度與高特異性相結合，故檢驗系統的性能指標能否滿足臨床檢測的要求會影響診療結果。定性檢測性能評估主要通過重復性和方法間比較來評估[5]。

目前對全自動免疫分析儀性能評估文獻較少，本研究參照生化分析儀性能評價方法，對雅培ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀定量測定的HBsAg項目進行性能評估[5-6]。結果顯示該檢測系統精密度高，線性范圍寬，交叉污染率低，性能指標符合儀器說明書規定，可應用于臨床實驗室。

乙型肝炎是一種嚴重危害人類健康的世界性傳染病，迄今為止在世界范圍內約有3.5 ～4.0億乙型肝炎病毒(HBV)感染者,每年約有100萬人死于HBV感染所致的肝硬化、原發性肝細胞癌等[7]。我國屬乙型肝炎高發區,表面抗原攜帶率約為15%，疾病的早期診斷、治療有助于延緩病情發展及治愈。目前多數臨床實驗室對HBV血清標志物采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)進行定性檢測,HBsAg的靈敏度達到2 ng/mL時，ELISA才會呈陽性反應，而ARCHITECT i2000全自動免疫分析儀檢測HBsAg為定量分析，檢測靈敏度0.1 ng/mL，在HBsAg≥0.05 U/mL時即為陽性，顯示出很高的靈敏度。

有資料顯示，健康人群HBsAg水平在5 ng/mL以下者占2.34%[8]。在HBsAg陽性人群中，HBsAg水平在5 ng/mL以下者占陽性人群的13.5%，其中HBsAg水平在1 ng/mL者占陽性人群的8.4%，占低水平感染者的61.9%。HBsAg定量分析能檢測出低水平的陽性標本，有助于臨床早期確診HBV感染，縮短診療過程中的“窗口期”，減少HBV感染的漏檢，及時為臨床診斷和治療提供依據[9]。

因此，用于傳染性疾病的篩選試驗應強調靈敏度。這對于阻斷輸血、手術、有創檢查等途徑的傳播、蔓延，診斷、治療及流行病學調查具有重要意義。本研究認為，臨床實驗室對HBsAg的篩選試驗尤其是低水平HBsAg的檢測，以采用免疫發光技術定量檢測為宜，可提高其檢出率。

參考文獻

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Evaluation of the performance of ARCHITECT i2000 automatic immune analyzer for detecting HBsAg

ZUOFang1,LIUGengfu2△,SHANGXiaoling2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory;2.DepartmentofBloodTransfusion,CentralHospitalofHuangshi,Hubei435000,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the performance of ARCHITECT i2000 automatic immune analyzer for detecting HBsAg.MethodsThe precision,coincidence,detection limit,pollution carrying rate of HBsAg were detected by the quantitative measurement of the instrument.ResultsBoth the within-run precision and between-run precision of HBsAg were less than 5.1%.The precision,accuracy,linear range and pollution carrying rate totally met the performance requirements of the instrument.ConclusionThe precision,coincidence,detection limit and pollution carrying rate of the ARCHITECT i2000 automatic immunoassay system can meet the performance requirements of design for the quantitative measurement and the requirement of clinical laboratory testing.

Key words:automatic immune analyzer;quantitative measurement;performance evaluation

作者簡介：左芳，女，主管技師，主要從事臨床免疫學檢驗方面的研究。△通訊作者，E-mail:59853149@qq.com。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.007

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)11-1468-02

(收稿日期：2016-01-09修回日期：2016-03-18)