MTHFR C677T基因多態(tài)性與復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)相關(guān)性的Meta分析①

孫玲玲，方　芳，荊洪英，雷力力

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥劑科，黑龍江 佳木斯 154003)

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MTHFR C677T基因多態(tài)性與復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)相關(guān)性的Meta分析①

孫玲玲，方芳，荊洪英，雷力力

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥劑科，黑龍江 佳木斯 154003)

摘要：目的：運用Meta分析綜合評價亞甲基四氫葉酸還原酶( MTHFR) C677T基因多態(tài)性與復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的關(guān)系。方法：通過檢索PubMed、中國知網(wǎng)等中英文文獻數(shù)據(jù)庫，收集所有關(guān)于MTHFR C677T基因多態(tài)性與復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)相關(guān)的病例對照研究，提取所需數(shù)據(jù)應(yīng)用RevMan 5.3軟件進行Meta分析。結(jié)果：共收入13篇文獻，其中7篇中文相關(guān)文獻和6篇英文文獻。包括病例組1646例，對照組4072例。Meta分析結(jié)果表明：TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險比CC/CT高1.33倍[RR=1.33，95%CI=0.85~2.09]，其中國內(nèi)和國外人群TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險分別比CC/CT型高1.90倍[RR=1.90，95%CI=1.25~2.89]和0.58倍[RR=0.58，95%CI=0.22~1.49]；TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險比含C等位基因型高1.40倍[RR=1.40，95%CI=0.81~2.40]，其中國內(nèi)和國外人群TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險分別比含C等位基因型高2.25倍[RR=2.25，95%CI=1.41~3.59]和0.48倍[RR=0.48，95%CI=0.48~1.55]。結(jié)論：MTHFR C677T 基因多態(tài)性與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的易感性密切相關(guān)，但其病因關(guān)聯(lián)性仍有待于在人群中進行大規(guī)模的研究加以論證。

關(guān)鍵詞：亞甲基四氫葉酸還原酶；基因多態(tài)性；復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)；Meta分析

復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)(Recurrent spontaneous abortion,RSA)指自然流產(chǎn)連續(xù)發(fā)生兩次或以上，育齡婦女中的發(fā)生率約為1%~2%[1]。近年來研究表明，亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)的缺陷與孕婦復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的發(fā)生有關(guān)，MTHFR在葉酸代謝及 DNA 甲基化 和 DNA 合成修復(fù)過程中起關(guān)鍵作用，是參與葉酸代謝過程中的關(guān)鍵酶[2]，它可以催化5，10-亞甲基四氫葉酸轉(zhuǎn)變成5-甲基四氫葉酸。MTHFR基因已發(fā)現(xiàn)存在多個突變位點，而在這些變位點中研究最多的是MTHFR基因 cDNA序列上第4外顯子677位點核苷酸C>T，目前研究的熱點是突變位點與疾病的相關(guān)性。目前，國內(nèi)外已有關(guān)于MTHFR多態(tài)性與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)性研究報道，但卻不盡相同。隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的進步，越來越多的研究表明在影響不良妊娠的諸多因素中，遺傳因素占據(jù)了很大優(yōu)勢。探討MTHFR基因多態(tài)性與胎兒先天畸形、自然流產(chǎn)、腫瘤性疾病及心腦血管疾病的關(guān)系的研究更是被廣泛關(guān)注[3~5]。因此，我們通過對MTHFR C677T基因多態(tài)性與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)的中英文文獻的收集和進行更全面系統(tǒng)的分析與評價，為復(fù)發(fā)性流產(chǎn)疾病臨床方面提供參考依據(jù)。

1　資料與方法

1.1文獻檢索

在PubMed、Highwire、CNKI上檢索了關(guān)于MTHFR C677T與RSA相關(guān)的所有文章。檢索時間均從2009年至今。檢索主題詞分別為中英文形式為MTHFR、RSA、polymorphism、genotype、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、亞甲基四氫葉酸還原酶。

1.2納入與排除標(biāo)準

1.2.1納入標(biāo)準

①MTHFR C677T基因多態(tài)性與復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)相關(guān)研究；②以復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者為病例組，正常人為對照組；③流產(chǎn)次數(shù)或孕次數(shù)≥2且至少有1次或1次以上孕史；④文獻為中文或英文；⑤根據(jù)病例組、對照組數(shù)據(jù)計算出RR和95%置信區(qū)間(CI)。

1.2.2排除標(biāo)準

①非相關(guān)性研究；②數(shù)據(jù)不完整或描述不清；③結(jié)果不符合納入標(biāo)準文獻數(shù)據(jù)；④對重復(fù)或重疊文獻選擇數(shù)據(jù)最完整文獻。

1.3數(shù)據(jù)提取

選擇符合以上納入和排除標(biāo)準的文獻，對檢索到的文章質(zhì)量進行評價。每個研究提取以下信息：第一作者的姓名，出版年限，國家，病例組和對照組3種基因型的例數(shù)。其中考慮內(nèi)容主要包括：對照組的選取及復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病例診斷。對于質(zhì)量較差的文獻予以剔除。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

采用RevMan5.3軟件進行統(tǒng)計分析，并完成相關(guān)圖表的繪制。計數(shù)資料采用相對危險度(relative risk，RR)，以95%可信區(qū)間(confidence interval，CI)表示。對所納入的文獻進行異質(zhì)性檢驗，根據(jù)異質(zhì)性檢驗結(jié)果選擇效應(yīng)模型，異質(zhì)性檢驗(P<0. 05)，采用隨機效應(yīng)模型，否則采用固定效應(yīng)模型。

2　結(jié)果

2.1納入文獻基本特征

見表1。根據(jù)1.2納入與排除標(biāo)準，對檢索到文獻進行整理，最終納入13篇中英文標(biāo)準文獻，共累計病例組人群1646例，對照組人群4072例。其中國內(nèi)病例組821例，對照組927例；國外病例組825例，對照組3145例。

表1　納入Meta分析文獻一般特征

2.2MTHFR C677T基因多態(tài)性與RSA關(guān)系的Meta分析

2.2.1TT型與RSA相關(guān)性

經(jīng)過異質(zhì)性檢驗，TT型存在異質(zhì)性(P<0.01，I2=83%)，采用隨機效應(yīng)模型。Meta分析結(jié)果顯示，TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險比CC/CT高1.33倍[RR=1.33，95%CI=0.85~2.09]，病例組與對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見圖1。分別對國內(nèi)和國外人群進行分析，經(jīng)異質(zhì)性檢驗，國內(nèi)人群存在異質(zhì)性(P<0.05，I2=69%)，國外人群存在異質(zhì)性(P<0.01，I2=84%)，均采用隨機效應(yīng)模型。Meta分析結(jié)果顯示，國內(nèi)人群TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險比CC/CT型高1.90倍[RR=1.90，95%CI=1.25~2.89]，病例組與對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見圖2。國外人群TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險比CC/CT型高0.58倍[RR=0.58，95%CI=0.22~1.49]，病例組與對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見圖3。

圖1　國內(nèi)外TT與RSA相關(guān)性Meta分析森林圖

圖2　國內(nèi)TT與RSA相關(guān)性Meta分析森林圖

圖3　國外TT與RSA相關(guān)性Meta分析森林圖

2.2.2TTvsCC與RSA相關(guān)性

經(jīng)過異質(zhì)性檢驗，TT型存在異質(zhì)性(P<0.01，I2=90%)，采用隨機效應(yīng)模型。Meta分析結(jié)果顯示，TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險比含C等位基因型高1.40倍[RR=1.40，95%CI=0.81~2.40]，病例組與對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見圖4。

圖4　國內(nèi)外TTvsCC與RSA相關(guān)性Meta分析森林圖

分別對國內(nèi)和國外人群進行分析，經(jīng)異質(zhì)性檢驗，國內(nèi)人群存在異質(zhì)性(P<0.01，I2=78%)，國外人群存在異質(zhì)性(P<0.01，I2=90%)，均采用隨機效應(yīng)模型。Meta分析結(jié)果顯示，國內(nèi)人群TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險比含C等位基因型高2.25倍[RR=2.25，95%CI=1.41~3.59]，病例組與對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見圖5。國外人群TT型發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的風(fēng)險比含C等位基因型高0.48倍[RR=0.48，95%CI=0.48~1.55]，病例組與對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見圖6。

圖5　國內(nèi)TTvsCC與RSA相關(guān)性Meta分析森林圖

圖6　國外TTvsCC與RSA相關(guān)性Meta分析森林圖

2.3發(fā)表偏倚

對納入 Meta 分析的13篇MTHFR C677T 基因多態(tài)性與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的研究文獻進行發(fā)表偏倚評價，結(jié)果顯示，倒漏斗圖基本對稱，發(fā)表偏倚較小。

3　討論

隨著精準醫(yī)學(xué)和分子生物學(xué)的發(fā)展，一些藥物相關(guān)基因多態(tài)性與疾病的相關(guān)性研究越來越受關(guān)注[11~14]，為臨床疾病的診斷和治療提供了依據(jù)。MTHFR是一種黃素蛋白，其相對分子質(zhì)量為14500，它是一種依賴葉酸的酸，廣泛存在于動物的肝臟中。1995年，F(xiàn)rosst[6]等首次發(fā)現(xiàn)了MTHFR 677C→T突變位點，是目前發(fā)現(xiàn)的MTHFR最常見的突變位點之一。MTHFR 677C→T基因是一種常見的突變位點，在體內(nèi)有三種基因型，分別是野生型純合子(CC型)，雜合子(CT型)和突變純合子(TT型)。MTHFR 677TT純合子已與同型半胱氨酸水平增加有關(guān)，可以引起絨毛膜血管形成缺陷，導(dǎo)致胎盤早剝和梗死，可能導(dǎo)致妊娠丟失[7~11]。 本研究表明 MTHFR C677T 突變純合子(TT)可能增加流產(chǎn)風(fēng)險，特別是中國女性這個人群中，而在其他國家地區(qū)人群中并未發(fā)現(xiàn)存在相關(guān)聯(lián)性。這可能是因為由于兩人群的遺傳背景、飲食、地域環(huán)境等不同，可能會影響 MTHFR 的活性也可能是其重要原因，這有待于我們進一步的探究。但由于本文所選的英文文獻較少，所以可能導(dǎo)致本次結(jié)果的偏差。更有待于大樣本數(shù)據(jù)進一步探究MTHFR C677T與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)之間的關(guān)聯(lián)性，以為治療和預(yù)防該疾病提供實驗室依據(jù)。

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中圖分類號：R714.21

文獻標(biāo)識碼：A

文章編號：1008-0104(2015)06-0052-04

基金項目：①1.佳木斯大學(xué)研究生創(chuàng)新項目，編號：LM2014_057；2.佳木斯大學(xué)科學(xué)技術(shù)面上項目，編號：13Z1201549。

作者簡介：孫玲玲(1990～)女，黑龍江佳木斯人，在讀碩士研究生。

通訊作者：雷力力(1958～)女，黑龍江佳木斯人，學(xué)士，主任藥師，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail:leill888@126.com。

(收稿日期：2015-06-15)