白細胞介素-17與原發(fā)性腎病綜合征相關性實驗研究

周洪彬 潘艷東 張宏宇

白細胞介素-17與原發(fā)性腎病綜合征相關性實驗研究

周洪彬 潘艷東 張宏宇

目的 探討白細胞介素-17(IL-17)與原發(fā)性腎病綜合征(PNS)的相關性。方法 采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測35例PNS患者(腎病綜合征組)和36例健康體檢者(對照組)外周靜脈血IL-17水平, 比較兩組IL-17水平均數, 再對腎病綜合征組外周靜脈血IL-17與其尿蛋白水平進行直線相關分析。結果 腎病綜合征組外周靜脈血IL-17高于對照組［(50.77±7.16)ng/L VS (33.83±6.23) ng/L］, 差異有統(tǒng)計學意義(t=10.52, P＜0.01)；腎病綜合征組外周靜脈血IL-17與其尿蛋白水平呈直線正相關(r=0.72, P＜0.01)。結論 原發(fā)性腎病綜合征的發(fā)病可能與體內IL-17水平的異常存在相關性。

原發(fā)性腎病綜合征； 白細胞介素-17； 尿蛋白

腎病綜合征(nephrotic syndrome, NS)是由多種原因引起、以腎小球基膜通透性增加伴腎小球濾過率降低等腎小球病變?yōu)橹鞯囊唤M腎臟疾病綜合征, 該綜合征不是獨立的疾病, 而是多種腎臟疾病的共同表現, 典型臨床表現為高蛋白尿(24 h尿蛋白 ＞3.5 g)、低蛋白血癥(血漿白蛋白 ＜30 g/L) 、高度水腫、高脂血癥, 其中以高蛋白尿最具特征性；腎病綜合征臨床上分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩大類型, 原發(fā)性腎病綜合征(primary nephrotic syndrome, PNS)是其中較為多見的一類, 且多發(fā)于青少年人群, 對患者的健康常常帶來嚴重的危害［1,2］。PNS發(fā)病原因一直未完全明確, 學者們普遍認為［3,4］：PNS是一組常見的免疫反應介導性疾病, 它的發(fā)病與機體細胞免疫功能紊亂密切相關。具有強致病性的免疫細胞因子IL-7在PNS中所起的作用目前的研究不多, 僅少有報道提示IL-17 在PNS中有重要作用［5,6］。為此, 作者采用成組設計和直線相關性分析對35例PNS患者外周靜脈血IL-17和24 h尿蛋白進行研究, 以探討IL-17與PNS發(fā)病的相關性。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年2月～2015年1月廣州市白云區(qū)人民醫(yī)院綜合科門診和病房就診患者, 經臨床和實驗室確診PNS患者35例(腎病綜合征組), 自愿參與本研究, 均符合PNS診斷標準［2］；其中男21例, 女14例, 年齡9～26 歲,平均年齡(11.54±6.23)歲；病程48 d～3年, 平均病程1.13年；所有患者受試前1個月內均未接受系統(tǒng)治療, 亦無合并其他急、慢性疾病。另選擇同期健康體檢者(對照組)36例, 均自愿參與本研究, 男23例, 女13例, 年齡10～24 歲, 平均年齡(12.83±4.36)歲, 近1個月內均無服藥史, 無急、慢性疾病。兩組受試對象性別構成、年齡等一般資料比較, 差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 研究方法 ①主要儀器和試劑：IL-17酶聯免疫吸附試驗試劑盒(美國Sigma公司)、酶標儀(奧地利ANTHOS2010型)。②標本收集：收集兩組受試對象外周靜脈血(EDTA抗凝)各2 ml, 均3000 r/min離心20 min, 取上清液, -30℃條件保存?zhèn)溆谩＂跧L-17測定［7］：測試時將-30℃保存血漿標本取出, 解凍復融至室溫并充分混勻, 3000 r/min離心5 min, 取其上清液血漿；采用ELISA法測定IL-17水平, 具體測定程序和方法嚴格按試劑盒說明書進行。④24 h尿蛋白測定［8］：收集腎病綜合征組受試者24 h 尿(甲苯防腐, 以防尿液中細菌生長、影響檢驗結果準確性), 送醫(yī)院檢驗科檢測, 24 h尿蛋白定量采用終點法檢測, 具體操作與檢測由檢驗科協助完成。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計學軟件進行數據統(tǒng)計分析。計量資料以均數±標準差( x-±s)表示, 采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗；相關性分析采用直線相關分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組受試對象IL-17水平均數比較 腎病綜合征組與對照組測定的外周靜脈血IL-17數據均呈正態(tài)分布且方差齊,腎病綜合征組外周靜脈血IL-17水平高于對照組, 差異有統(tǒng)計學意義(t=10.52, P＜0.01)。見表1。

2.2 腎病綜合征組外周靜脈血IL-17與24 h尿蛋白的相關性分析 PNS患者外周靜脈血IL-17與自身24 h尿蛋白水平兩組數據經正態(tài)性檢驗、等級相關分析及直線相關分析, 兩者呈直線相關(t=5.91, P＜0.01)和正相關(r=0.72)。

3 討論

該研究發(fā)現, PNS患者外周靜脈血IL-17水平要高于健康人, 差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01), 與文獻報道一致［6］。細胞免疫功能的紊亂是PNS 的重要發(fā)病機制之一, 這已成為不爭的共識。Th17和Treg細胞在PNS患者體內的平衡失調伴隨著PNS具有明顯的腎小管上皮細胞和腎間質病變, Th17和Treg細胞之間動態(tài)的相互作用可能對PNS的病情發(fā)展變化非常重要［9］, Th17細胞分泌的IL-17 是一種具有代表性和多效性的細胞因子, 在許多炎癥性疾病如自身免疫性疾病、感染性疾病等發(fā)病中起著重要的推動作用, 尤其在自身免疫性疾病模型中的致病性已被確認, IL-17能誘導促炎癥介質的產生, 增強T細胞介導的免疫反應和Th1型反應［10］, IL-17在復發(fā)期PNS患者體內的血漿濃度要高于緩解期和健康人,血漿中IL-17的濃度可能反映的是PNS疾病活動的情況［6］。這說明IL-17在PNS的發(fā)病過程中起著重要作用。

該研究還發(fā)現, PNS患者外周靜脈血IL-17與24 h尿蛋白呈直線正相關關系, 說明血中IL-17濃度增大, 24 h尿蛋白增高, 與文獻報道一致［6］。PNS是一組由多種原因引起的腎小球基底膜通透性增加, 導致血漿內大量蛋白質從尿液中流失的腎臟疾病綜合征, 其發(fā)病機制尚不明確［1］。研究發(fā)現, PNS 患者的血漿及尿液中IL-17水平在復發(fā)期明顯增高, 在緩解期降至基線水平, 且與尿蛋白呈正相關［6］；在阿霉素腎病大鼠硬化的腎組織中有IL-17表達明顯增加, 可能在阿霉素腎病大鼠發(fā)生腎小球硬化過程中起了一定的作用［5］。鐘桴等［11］研究發(fā)現, PNS患者體內核因子-кB(NF-кB)活性高于正常兒童, 提示PNS NF-кB信號途徑過度活化。而IL-17正是通過活化的NF-кB信號途經發(fā)揮其促進免疫應答和炎癥反應等作用［10］。因此機體內高水平的IL-17與過度活化的NF-кB的結合必將引發(fā)腎臟組織的病理改變和尿蛋白的升高。

雖然國內少有報道, 但以上所述還是說明了IL-17與原發(fā)性腎病綜合征發(fā)病有著重要的相關作用。

［1］ 孟哲, 裴路文.原發(fā)性腎病綜合癥患者臨床分析.臨床醫(yī)藥文獻雜志, 2014, 1(7):1172, 1175.

［2］ 孫靜, 王澤蘭.中西醫(yī)結合治療原發(fā)性腎病綜合征的臨床觀察.中醫(yī)臨床研究, 2014, 6(5):91-92.

［3］ Sinha A, Bagga A.Nephrotic Syndrome.Indian J Pediatr, 2012, 79 (8):1045-1055.

［4］ 劉俊朝, 俞建, 時毓民.腎病綜合征患兒免疫功能的變化.中國中西醫(yī)結合兒科學 , 2014, 6(1):28-30.

［5］ 王莉, 張偉, 李秋.白細胞介素-17在阿霉素腎病大鼠腎小球硬化中的作用.中華微生物學和免疫學雜志, 2010, 30(3):245-249.

［6］ Katarzyna KP, Danuta Z, Anna M, et al.Interleukin-17 concentration in serum and urine of children with idiopathic nephrotic syndrome.Przegl Lek, 2006, 63(3):198-200.

［7］ 張宏宇, 毛祖豪, 陳曉芬.銀屑病與白細胞介素-17和白細胞介素-10表達水平的相關研究.中國醫(yī)師進修雜志, 2014, 37(33):19-20.

［8］ 景紅麗, 常艷軍, 馬永進.干化學法與終點法檢測尿蛋白結果的比較分析.實用醫(yī)技雜志, 2014, 21(5):510-511.

［9］ Shao XS, Yang XQ, Zhao XD, et al.The prevalence of Th17 cells and FOXP3 regulate T cells (Treg) in children with primary nephritic syndrome.Pediatr Nephrol, 2009, 24(9):1683 -1690.

［10］ 張宏宇, 毛祖豪.IL-17對人表皮細胞增殖過程中DNA含量的影響.皮膚性病診療學雜志, 2013, 20(3):155-156.

［11］ 鐘桴, 董軍, 高巖, 等.核因子-кB對原發(fā)性腎病綜合征患兒IL-8調控及黃芪的干預作用.中國臨床藥理學雜志, 2009, 25(5):434-437.

Experimental research of correlation between interleukin-17 and primary nephrotic syndrome

ZHOU Hong-bin, PAN Yan-dong, ZHANG Hong-yu.General Department, Guangzhou City Baiyun District People’s Hospital, Guangzhou 510500, China

Objective To investigate correlation between interleukin-17 (IL-17) and primary nephrotic syndrome(PNS).Methods Enzyme-linked immuno sorbent assay (ELISA) was applied for detecting IL-17 levels in peripheral venous blood of 35 PNS patients (nephrotic syndrome group) and 36 healthy people (control group).IL-17 meal levels were compared between the two groups.Linear correlation analysis was made on IL-17 level in peripheral venous blood of nephrotic syndrome patients and their urinary protein level.Results The nephrotic syndrome group had much higher IL-17 level in peripheral venous blood than the control group ［(50.77±7.16) ng/L VS (33.83±6.23) ng/L］, and their difference had statistical significance (t=10.52, P＜0.01).IL-17 levelin peripheral venous blood of nephrotic syndrome patients had positive linear correlation with their urinary protein level (r=0.72, P＜0.01).Conclusion Morbidity of primary nephrotic syndrome may have correlation with abnormal IL-17 level.

Primary nephrotic syndrome; Interleukin-17; Urine protein

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.19.002

2015-03-09］

2012年廣東省社會發(fā)展領域科技計劃(項目編號：20120318087)

510500 廣州市白云區(qū)人民醫(yī)院綜合科(周洪彬 潘艷東), 皮膚科(張宏宇)

張宏宇