咳喘固本丸急性毒性的實(shí)驗(yàn)研究

王艷霞

[摘要] 目的 研究咳喘固本丸的急性毒性，確定咳喘固本丸用藥的安全性。 方法 應(yīng)用咳喘固本丸提取液給小鼠灌胃，測定小鼠最大給藥量，觀察小鼠出現(xiàn)的急性毒性反應(yīng)。 結(jié)果 灌藥1周后，實(shí)驗(yàn)小鼠體質(zhì)量變化與各個(gè)臟器指數(shù)變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。 結(jié)論 咳喘固本丸毒性很小，安全性好，可供臨床和實(shí)驗(yàn)研究。

[關(guān)鍵詞] 咳喘固本丸；急性毒性；實(shí)驗(yàn)研究

[中圖分類號] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 2095-0616（2014）19-28-03

咳喘固本丸是由黃芪、淫羊藿、人參、菟絲子、熟地黃、蛤蚧等中藥組成的方藥，具有補(bǔ)腎納氣、健脾益肺、止咳平喘等功效，用于支氣管哮喘、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病、肺心病等病緩解期見上述證候者，效果較好。但其實(shí)驗(yàn)研究報(bào)道較少，我們的前期實(shí)驗(yàn)證實(shí)，咳喘固本丸對慢性阻塞性肺炎有較好的療效[1]，為評價(jià)其安全性，本試驗(yàn)通過采用最大用藥量對小鼠進(jìn)行灌胃給藥，觀察咳喘固本丸的對小鼠的急性毒性作用，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)所用咳喘固本丸由臨沂市中醫(yī)醫(yī)院提供，制劑號20080820，該試劑為水丸試劑，每克相當(dāng)于含有生藥1.1g，按其重量稱取藥物，加入蒸餾水放置于90℃水浴煎煮，過濾所得藥液加入適量乙醇沉淀，4℃冰箱放置過夜而后過濾，所得上清液在60℃水浴上濃縮，隨得到100%咳喘固本液（系指含生藥量），4℃儲存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

取健康昆明種小鼠50只，體重19～22g，平均（20.0±2.0）g，雌雄各半且分籠。實(shí)驗(yàn)前所有小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3d，觀察小鼠活動(dòng)、毛色狀況、飲食正常的方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。飼養(yǎng)小鼠環(huán)境相對濕度50%～70%，室溫保持20～26℃，自然光源，實(shí)驗(yàn)房間保持通風(fēng)3次/d，30min/次。小鼠均自由攝水，普通飼料飼養(yǎng)，自由取食。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 預(yù)實(shí)驗(yàn) 首次預(yù)試驗(yàn)取10只，給藥前禁食12h，實(shí)驗(yàn)第一天給動(dòng)物灌胃100%咳喘固本液，按60kg成人體重的臨床擬用藥量為60g/d計(jì)算，小鼠飼喂的所用劑量為成人等效劑量的10倍，為10g/（kg小鼠體重·d）。按照小鼠體重計(jì)算所用劑量，早中晚各給藥1次，每次0.2mL/10g，每天3次，每次給藥后觀察小鼠的一般情況；其后連續(xù)觀察7d。所有小鼠一般情況無異常，無死亡，也無明顯中毒反應(yīng)，故采用最大耐受量實(shí)驗(yàn)。

1.3.2 分組實(shí)驗(yàn) 其余40只小鼠隨機(jī)分兩組，其中30只小鼠為實(shí)驗(yàn)組重復(fù)以上操作，對照組10只，給予等體積生理鹽水。試驗(yàn)期間觀察動(dòng)物食欲、飲水、反應(yīng)、呼吸、黏膜分泌物、精神、背毛、大小便等一般體征變化，并記錄各動(dòng)物體重增長。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處死小鼠解剖試驗(yàn)動(dòng)物，肉眼觀察其主要內(nèi)臟變化的狀況。實(shí)驗(yàn)期間所有動(dòng)物無死亡現(xiàn)象提示由于灌胃給藥途徑無法測出動(dòng)物對該制劑的半數(shù)致死量（LD50），所以只能據(jù)此計(jì)算最大給藥量（MTD）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所得數(shù)據(jù)采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，所得計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況與外觀體征

實(shí)驗(yàn)過程及實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，觀察動(dòng)物基本情況，動(dòng)物食欲、反應(yīng)、精神、背毛、大小便等均未見異常，兩組小鼠均活動(dòng)自如、皮毛光潔、反應(yīng)敏捷，黏膜無異常分泌物，7d后所有組均無死亡情況，無明顯中毒反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算動(dòng)物體重增長正常。見表1。

2.2 各組小鼠主要臟器肉眼觀察情況

與對照組比較，解剖后肉眼觀測可見，動(dòng)物心、肝、脾、肺、腎等器官未見明顯異常，無出血點(diǎn)及其他明顯病理改變，腸管未見脹氣。由于灌胃給藥途徑無法測出動(dòng)物對該制劑的LD50，據(jù)此計(jì)算MTD>60g（生藥）/kg。急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果詳見表2。

3 討論

喘證相當(dāng)于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的慢性喘息性支氣管炎，支氣管哮喘或慢性阻塞性肺疾病（COPD）等疾病，見于多種急、慢性疾病的病理過程中[2]，早在《黃帝內(nèi)經(jīng)》中就記載有喘證的名稱、病因病機(jī)及癥狀表現(xiàn)等，認(rèn)為肺為主病之臟，本病發(fā)作與臟腑氣機(jī)失調(diào)，肺腎虛弱，肝脾氣機(jī)升降逆亂有關(guān)。目前多認(rèn)為其病因復(fù)雜，多因久咳不愈傷肺導(dǎo)致邪侵肺虛，或素有肺氣虛弱而致外邪侵襲，總之本病多為本虛標(biāo)實(shí)之證，并最終引起瘀血停滯，痰濁凝滯，痰瘀互結(jié)的病理結(jié)果，并反向加重肺虛，逐步發(fā)展為肺脾腎三臟氣虛，造成虛實(shí)夾雜、寒熱夾雜、痰瘀夾雜的情況，加重病情使本病纏綿難愈反復(fù)發(fā)作[3-4]。本著急則治標(biāo)緩則治本的原則，在患者緩解期，本著健脾益肺固腎的原則采用咳喘固本丸治療本病，長期服藥，徐徐圖之，使機(jī)體逐漸修復(fù)，培本而祛邪。

咳喘固本丸處方由黃芪、淫羊藿、人參、菟絲子、熟地黃、蛤蚧、地黃、黃精、玉竹、白術(shù)、六神曲、山藥、澤瀉、紫蘇子、白芥子、細(xì)辛、僵蠶、葶藶子、苦杏仁、浙貝母、桃仁、丹參共二十二味藥組成，方藥中大多數(shù)藥物歷代醫(yī)籍均記載為“無毒”或“小毒”之品[5-6]；少部分藥物如細(xì)辛為有毒中藥，但用量極少。本方具有健脾益肺、補(bǔ)腎納氣、截哮平喘止咳的功效，用于COPD、慢性支氣管炎、支氣管哮喘、肺心病等病緩解期見喘證者，且可以用于預(yù)防感冒，控制和減少慢性喘證的發(fā)作，效果良好[7]。

本方中黃芪為主藥，重用補(bǔ)中益氣，擅入肺經(jīng)而補(bǔ)益肺氣，淫羊藿溫?zé)嵩锪遥醚a(bǔ)腎陽。兩藥合用為君藥，可補(bǔ)肺氣壯腎陽。人參能大補(bǔ)元?dú)猓芍S芪補(bǔ)肺益氣；菟絲子善補(bǔ)腎陽；蛤蚧擅固腎納氣，可補(bǔ)肺氣助腎陽定喘息，兩藥合用助淫羊藿溫腎陽；生熟地、玉竹、黃精滋腎陰補(bǔ)腎水，與助陽藥物合用，相輔相成；共為臣藥。

白術(shù)、澤瀉、神曲、山藥可燥濕健脾，脾健則痰濁可祛除；細(xì)辛、僵蠶、白芥子可宣通肺竅，溫化寒痰，使氣道暢通；葶藶子瀉肺，蘇子下氣消痰，浙貝化痰，杏仁平喘兼潤腸；其共為佐藥。桃仁、丹參活血化瘀，且桃仁潤腸，止咳逆，化氣道肺絡(luò)之瘀濁，共引諸藥以達(dá)病所，為使藥。諸藥合用，肺脾腎得補(bǔ)，則痰無以生，瘀血去，而肺氣通，呼吸暢。endprint

蔡云海等[8]采用咳喘固本丸聯(lián)合穴位注射治療慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期患者有效率占93.5%，且治療組患者咳嗽、咯痰、胸悶、氣喘、氣短、汗出、食欲不振、腰膝無力等癥狀積分與對照組相比，優(yōu)于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。張正元[9]觀察本藥對112例患者支氣管哮喘（緩解期）的治療效果，發(fā)現(xiàn)其治療組總有效率為88.4%，而對照組總有效率65.5%，兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且治療組IgE含量明顯下降，提示本藥可能還具有調(diào)整細(xì)胞免疫功能，抑制與IgE生物效應(yīng)密切有關(guān)的I型變態(tài)反應(yīng)發(fā)生的作用。

為了考察“咳喘固本丸”的毒性，評估其臨床應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)，本研究按照現(xiàn)代藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)要求，探索了該制劑對小鼠的急性毒性作用，結(jié)果此急性毒性實(shí)驗(yàn)表明，咳喘固本丸的LED50無法測出，給小鼠灌服咳喘固本丸達(dá)60g（生藥）/kg后，動(dòng)物各方面表現(xiàn)正常，通過體重等指標(biāo)觀測，未觀察到動(dòng)物對該制劑的急性毒性反應(yīng)。經(jīng)計(jì)算，動(dòng)物對該制劑的MID（最大給藥量）>60g（生藥）/kg，耐受倍數(shù)>200。此外，本品尚可制作為顆粒劑等制劑，所檢測含生藥量等質(zhì)量滿意，物明顯毒性反應(yīng)[10-11]。

綜上所述，在本實(shí)驗(yàn)條件下，灌服一定劑量的咳喘固本液對小鼠未呈現(xiàn)任何急性毒性反應(yīng)，安全可靠。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 孫兆祥，季鳳剛，李振山.咳喘固本丸治療慢性阻塞性肺病穩(wěn)定期臨床觀察[J].山東中醫(yī)雜志，2011，30（10）：705-707.

[2] 李雯琦，袁博.辨證分型治療喘證八法[J].實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志，2014，28（5）：71-72.

[3] 陳振.支氣管哮喘的中醫(yī)藥治療研究進(jìn)展[J].江蘇中醫(yī)藥，2007，39（4）：61-63.

[4] 李克剛，錢虹.喘癥治療心得[J].中國民間療法，2012，20（1）：39.

[5] 王北嬰.中藥新藥研制與申報(bào)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，1995：42-53.

[6] 衛(wèi)生部藥政局.中藥新藥研究指南（毒理學(xué)項(xiàng)下）[M].1995：6.

[7] 翟德銀.咳喘固本丸的質(zhì)量控制[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，20（22）：2814-2815.

[8] 蔡云海，吳啟相，王東旭，等.咳喘固本丸聯(lián)合穴位注射治療慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期48例[J].中醫(yī)研究，2013，26（6）：55-57.

[9] 張正元.咳喘固本丸治療支氣管哮喘112例[J].湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2002，8（2）：61.

[10] 陳浩，徐歡，何小女.咳喘固本顆粒劑中黃芪甲苷的含量測定[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，24（2）：48-49.

[11] 楊衛(wèi)星，陳浩.咳喘固本顆粒劑薄層色譜鑒別及微生物檢查[J].江西中醫(yī)藥，2010，41（2）：59-60.

（收稿日期：2014-08-12）endprint

蔡云海等[8]采用咳喘固本丸聯(lián)合穴位注射治療慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期患者有效率占93.5%，且治療組患者咳嗽、咯痰、胸悶、氣喘、氣短、汗出、食欲不振、腰膝無力等癥狀積分與對照組相比，優(yōu)于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。張正元[9]觀察本藥對112例患者支氣管哮喘（緩解期）的治療效果，發(fā)現(xiàn)其治療組總有效率為88.4%，而對照組總有效率65.5%，兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且治療組IgE含量明顯下降，提示本藥可能還具有調(diào)整細(xì)胞免疫功能，抑制與IgE生物效應(yīng)密切有關(guān)的I型變態(tài)反應(yīng)發(fā)生的作用。

為了考察“咳喘固本丸”的毒性，評估其臨床應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)，本研究按照現(xiàn)代藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)要求，探索了該制劑對小鼠的急性毒性作用，結(jié)果此急性毒性實(shí)驗(yàn)表明，咳喘固本丸的LED50無法測出，給小鼠灌服咳喘固本丸達(dá)60g（生藥）/kg后，動(dòng)物各方面表現(xiàn)正常，通過體重等指標(biāo)觀測，未觀察到動(dòng)物對該制劑的急性毒性反應(yīng)。經(jīng)計(jì)算，動(dòng)物對該制劑的MID（最大給藥量）>60g（生藥）/kg，耐受倍數(shù)>200。此外，本品尚可制作為顆粒劑等制劑，所檢測含生藥量等質(zhì)量滿意，物明顯毒性反應(yīng)[10-11]。

綜上所述，在本實(shí)驗(yàn)條件下，灌服一定劑量的咳喘固本液對小鼠未呈現(xiàn)任何急性毒性反應(yīng)，安全可靠。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 孫兆祥，季鳳剛，李振山.咳喘固本丸治療慢性阻塞性肺病穩(wěn)定期臨床觀察[J].山東中醫(yī)雜志，2011，30（10）：705-707.

[2] 李雯琦，袁博.辨證分型治療喘證八法[J].實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志，2014，28（5）：71-72.

[3] 陳振.支氣管哮喘的中醫(yī)藥治療研究進(jìn)展[J].江蘇中醫(yī)藥，2007，39（4）：61-63.

[4] 李克剛，錢虹.喘癥治療心得[J].中國民間療法，2012，20（1）：39.

[5] 王北嬰.中藥新藥研制與申報(bào)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，1995：42-53.

[6] 衛(wèi)生部藥政局.中藥新藥研究指南（毒理學(xué)項(xiàng)下）[M].1995：6.

[7] 翟德銀.咳喘固本丸的質(zhì)量控制[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，20（22）：2814-2815.

[8] 蔡云海，吳啟相，王東旭，等.咳喘固本丸聯(lián)合穴位注射治療慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期48例[J].中醫(yī)研究，2013，26（6）：55-57.

[9] 張正元.咳喘固本丸治療支氣管哮喘112例[J].湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2002，8（2）：61.

[10] 陳浩，徐歡，何小女.咳喘固本顆粒劑中黃芪甲苷的含量測定[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，24（2）：48-49.

[11] 楊衛(wèi)星，陳浩.咳喘固本顆粒劑薄層色譜鑒別及微生物檢查[J].江西中醫(yī)藥，2010，41（2）：59-60.

（收稿日期：2014-08-12）endprint

蔡云海等[8]采用咳喘固本丸聯(lián)合穴位注射治療慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期患者有效率占93.5%，且治療組患者咳嗽、咯痰、胸悶、氣喘、氣短、汗出、食欲不振、腰膝無力等癥狀積分與對照組相比，優(yōu)于對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。張正元[9]觀察本藥對112例患者支氣管哮喘（緩解期）的治療效果，發(fā)現(xiàn)其治療組總有效率為88.4%，而對照組總有效率65.5%，兩組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且治療組IgE含量明顯下降，提示本藥可能還具有調(diào)整細(xì)胞免疫功能，抑制與IgE生物效應(yīng)密切有關(guān)的I型變態(tài)反應(yīng)發(fā)生的作用。

為了考察“咳喘固本丸”的毒性，評估其臨床應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)，本研究按照現(xiàn)代藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)要求，探索了該制劑對小鼠的急性毒性作用，結(jié)果此急性毒性實(shí)驗(yàn)表明，咳喘固本丸的LED50無法測出，給小鼠灌服咳喘固本丸達(dá)60g（生藥）/kg后，動(dòng)物各方面表現(xiàn)正常，通過體重等指標(biāo)觀測，未觀察到動(dòng)物對該制劑的急性毒性反應(yīng)。經(jīng)計(jì)算，動(dòng)物對該制劑的MID（最大給藥量）>60g（生藥）/kg，耐受倍數(shù)>200。此外，本品尚可制作為顆粒劑等制劑，所檢測含生藥量等質(zhì)量滿意，物明顯毒性反應(yīng)[10-11]。

綜上所述，在本實(shí)驗(yàn)條件下，灌服一定劑量的咳喘固本液對小鼠未呈現(xiàn)任何急性毒性反應(yīng)，安全可靠。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 孫兆祥，季鳳剛，李振山.咳喘固本丸治療慢性阻塞性肺病穩(wěn)定期臨床觀察[J].山東中醫(yī)雜志，2011，30（10）：705-707.

[2] 李雯琦，袁博.辨證分型治療喘證八法[J].實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志，2014，28（5）：71-72.

[3] 陳振.支氣管哮喘的中醫(yī)藥治療研究進(jìn)展[J].江蘇中醫(yī)藥，2007，39（4）：61-63.

[4] 李克剛，錢虹.喘癥治療心得[J].中國民間療法，2012，20（1）：39.

[5] 王北嬰.中藥新藥研制與申報(bào)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，1995：42-53.

[6] 衛(wèi)生部藥政局.中藥新藥研究指南（毒理學(xué)項(xiàng)下）[M].1995：6.

[7] 翟德銀.咳喘固本丸的質(zhì)量控制[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，20（22）：2814-2815.

[8] 蔡云海，吳啟相，王東旭，等.咳喘固本丸聯(lián)合穴位注射治療慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期48例[J].中醫(yī)研究，2013，26（6）：55-57.

[9] 張正元.咳喘固本丸治療支氣管哮喘112例[J].湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2002，8（2）：61.

[10] 陳浩，徐歡，何小女.咳喘固本顆粒劑中黃芪甲苷的含量測定[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，24（2）：48-49.

[11] 楊衛(wèi)星，陳浩.咳喘固本顆粒劑薄層色譜鑒別及微生物檢查[J].江西中醫(yī)藥，2010，41（2）：59-60.

（收稿日期：2014-08-12）endprint