木脂素促進人胃癌MGC-803細胞凋亡

李紅國，劉雙萍，崔銀姬，李柱虎

(延邊大學 醫學院 病理學教研部， 吉林 延吉 133002)

A.control group；B.experiment group in 48 hours(25 μmol/L)；C.experiment group in 72 hours(25 μmol/L)

木脂素促進人胃癌MGC-803細胞凋亡

李紅國，劉雙萍，崔銀姬，李柱虎*

(延邊大學 醫學院 病理學教研部， 吉林 延吉 133002)

木脂素(lignans)是一類由苯丙素氧化聚合而成的天然產物，多以二聚體的形式存在，少數為三聚體和四聚體。木脂素類化合物具有廣泛的生物活性[1]，如抗腫瘤、抗氧化、降壓、鎮靜和保肝等。

目前，木脂素對胃癌細胞抗增殖及機制方面的研究尚未見報道。因此，本實驗通過木脂素對胃癌細胞增殖的影響與Bax和Bcl-2等蛋白之間的相關性的研究，初步探討木脂素對胃癌細胞的抗增殖作用及其機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細胞系：人胃癌MGC-803細胞系。

1.1.2 主要試劑：木脂素由延邊大學藥學院生藥學教研部提供(純度為99.9%，化學名稱為內消旋二氫愈創木脂酸，meso-dihydroguaiaretic acid)；Bax和Bcl-6單克隆抗體(Santa Cruz公司)；Bcl-2單克隆抗體(碧云天生物技術研究所)；ABC免疫組化檢測試劑盒(福州邁新生物技術開發有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 細胞生存率的檢測：取對數生長期細胞用于下列實驗，細胞數為3×104個/孔，采用MTT方法。細胞生存率(%) = 實驗組吸光值/對照組吸光值 ×100%。實驗重復進行3次。

1.2.2 檢測Bax、Bcl-2和Bcl-6蛋白的表達：用ABC免疫組化檢測試劑盒。實驗重復進行3次。Bax、Bcl-2和Bcl-6抗體的稀釋比例均為1∶50。免疫細胞化學染色結果判定根據Bax以胞質呈棕褐色為陽性；Bcl-2和Bcl-6以胞核呈棕黃色為陽性。陽性表達率(%)=陽性細胞總數/總細胞數×100%。

1.2.3 細胞凋亡及細胞周期的檢測：采用流式細胞技術，實驗重復3次。

1.2.4 透射電鏡觀察：胃癌細胞的形態學變化。……