白頭翁皂苷D誘導U87MG細胞凋亡

李 博，王元剛，李 娟，湯海峰，程 光*

(第四軍醫大學 西京醫院 1.神經外科； 2.藥劑科，陜西 西安 710032)

研究論文

白頭翁皂苷D誘導U87MG細胞凋亡

李 博1，王元剛1，李 娟1，湯海峰2，程 光1*

(第四軍醫大學 西京醫院 1.神經外科； 2.藥劑科，陜西 西安 710032)

目的探討白頭翁皂苷D對人腦膠質瘤細胞系U87的增殖抑制和促凋亡效應及其機制。方法用MTT法檢測細胞增殖抑制作用，并求得IC25、IC50和IC75，按濃度和時間分組，Annexin-Ⅴ/PI雙染、流式細胞術和TUNEL/PI染色檢測凋亡，Hoechst33342染色、透射電子顯微鏡、DNA-ladder檢測細胞系改變，細胞免疫染色和Western blot檢測相關凋亡蛋白表達。結果白頭翁皂苷D在14.016 nmol/mL下對U87MG抑制率為94.034%(Plt;0.05)；處理組細胞形態呈凋亡改變，細胞超微結構中發現自噬小體；處理組caspase-3、8、Bax和FasL表達上調(Plt;0.05)，Bcl-2表達下調(Plt;0.05)。結論白頭翁皂苷D對U87MG細胞有呈時間和濃度依賴的增殖抑制作用，且通過FasL/Fas途徑誘導其發生凋亡。

白頭翁皂苷D；增殖抑制；凋亡；細胞周期

神經系統中，惡性膠質瘤是最常見的一種腫瘤[1]。其過高的患病率及極短的中位生存期，給社會尤其是患者家庭帶來較大的負擔。白頭翁湯有清熱解毒、明目、消贅和止痢的功效[2]。白頭翁皂苷D

在前期單體藥物篩選中表現出較強的抑制腫瘤細胞增殖的能力。本實驗觀察白頭翁皂苷D對U87MG的增殖抑制作用和致凋亡機制，為其作為臨床抗腫瘤新藥提供理論基礎和實驗依據。

1 材料與方法

1.1 材料

人源性膠質母細胞瘤系U87MG、EVC304細胞、正常星形膠質細胞(美國標準細胞庫，ATCC)。

太白銀蓮花(anemone taipaiensis)提取物單體W-6即白頭翁皂苷D(pulsatilla saponin D)由第四軍醫大學西京醫院藥劑科提供，純度達98%以上。……