新型CD20核酸適配體的篩選及鑒定

張李鈺，胡 燕，曹蓓蓓，段金虹，劉 喆，楊先達*

(1.中國醫學科學院 基礎醫學研究所 病理生理系，北京 100005；2.北京協和醫學院 北京協和醫院 臨床遺傳學實驗室，北京 100005)

研究論文

新型CD20核酸適配體的篩選及鑒定

張李鈺1，胡 燕1，曹蓓蓓1，段金虹1，劉 喆2，楊先達1*

(1.中國醫學科學院 基礎醫學研究所 病理生理系，北京 100005；2.北京協和醫學院 北京協和醫院 臨床遺傳學實驗室，北京 100005)

目的研發能特異性識別CD20分子的DNA適配體，使其作為腫瘤靶向分子為非霍奇金淋巴瘤的新型靶向治療提供依據。方法體外合成含有21個隨機寡核苷酸、全長為59個堿基的DNA文庫，以CD20胞外表位肽為靶標，利用指數富集的配體系統進化技術(SELEX)，從文庫中篩選CD20適配體；利用流式細胞術評估適配體的富集程度、適配體與CD20多肽，適配體與CD20陽性細胞的結合特性；用MFold軟件預測適配體預計結構。結果經多輪篩選獲得了能識別CD20結構的全新DNA適配體CE4-1；它能特異性地識別CD20陽性淋巴瘤細胞，與白蛋白及CD20陰性細胞的結合較弱，與經胰蛋白酶處理的CD20陽性細胞的結合也減弱。結論該新型適配體能選擇性識別CD20結構及CD20陽性細胞，在CD20陽性淋巴瘤的靶向診療方面具有應用潛能。

適配體；SELEX；CD20

非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma, NHL)是最常見的淋巴系統惡性腫瘤[1]，發病率和病死率逐年上升[2]。靶向治療有可能改善腫瘤的治療效果，在NHL治療中得到重視[3]。靶向治療需要靶標蛋白，CD20分子在95%以上的B細胞淋巴瘤中特異表達，而85%的NHL源于B細胞[4-5]，故CD20是治療多數NHL的理想靶點[6]。現有CD20靶向治療的抗體藥物(美羅華)有耐藥性等弊端，故需研發新的靶向分子[7]?！?br>