Orai2參與了HUVEC外鈣敏感受體介導的Ca2+內流和NO生成

王臘梅，鐘 華，趙 慧，王 靜，龐麗娟，孫志萍，何 芳*

(新疆石河子大學 醫學院 1.新疆地方病與民族高發病教育部重點實驗室；2.病理生理教研室；3.病理教研室； 4.醫學機能實驗中心；新疆 石河子 832002)

研究論文

Orai2參與了HUVEC外鈣敏感受體介導的Ca2+內流和NO生成

王臘梅1,2，鐘 華1,2，趙 慧1,2，王 靜1,2，龐麗娟1,3，孫志萍1,4，何 芳1,2*

(新疆石河子大學 醫學院 1.新疆地方病與民族高發病教育部重點實驗室；2.病理生理教研室；3.病理教研室； 4.醫學機能實驗中心；新疆 石河子 832002)

目的研究鈣釋放激活的鈣調素2(Orai2)在人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)細胞外鈣敏感受體(CaR)介導Ca2+內流和一氧化氮(NO)生成中的作用。方法1)用轉染技術將構建的Orai2干擾質粒(Orai2shRNA)轉染入HUVEC，用實時定量RT-PCR和Western blot檢測Orai2 mRNA和蛋白的表達。2)取2～5代HUVEC，分別以精胺激活CaR(鈣池操縱性鈣通道(SOC)和受體操縱性鈣通道(ROC)均激活)、ROC模擬劑12-O-十四烷酰佛波醋酸酯-13(TPA)+CaR負性變構調節劑Calhex231(激活ROC及阻斷SOC)、蛋白激酶C(PKC)抑制劑Ro31-8220、經典型PKCs和PKCμ抑制劑Go6967(阻斷ROC及激活SOC)為細胞模型。實驗分為3組：特異性質粒轉染組(Orai2shRNA組)，未轉染組(空白對照組)，空質粒組(vehicle組)，用熒光探針Fura-2/AM、DAF-FM負載方法同步檢測[Ca2+]i和NO的生成。結果1)與control組相比，shOrai2-71干擾后，Orai2 mRNA和蛋白的表達均明顯降低，抑制率分別為75.75%和70.58%(Plt;0.05)。2)與對照組和空質粒組相比，在4種不同處理因素作用下，Orai2shRNA轉染組[Ca2+]i△ratio值和NO凈熒光強度值均明顯降低(Plt;0.05)。結論Orai2參與了HUVEC中CaR經SOC和ROC激活介導的Ca2+內流和NO生成。

Orai2；一氧化氮；鈣離子；人臍靜脈內皮細胞

隨著鈣通道相關蛋白C-型瞬時型感受器電位通道 (canonical transient receptor potential channels，TRPCs)、基質相互作用分子(stromal interaction molecules，STIMs)、鈣釋放激活的鈣調素(calcium release-activated calcium modulator，Orais)的發現，其單個組件或復合物在不同組織細胞介導的生理和病理生理過程中作用已被進一步研究。……