黏著斑激酶在機械壓力誘導的人氣道上皮細胞黏液分泌中的作用

李 娜，李 琪，尤列·皮爾曼，維克多·科羅索夫，周向東*

(1.重慶醫科大學 附屬第二醫院 呼吸內科， 重慶 400010； 2.俄羅斯醫學科學院 遠東呼吸生理與病理中心， 俄羅斯 布拉戈維申斯克 675000)

研究論文

黏著斑激酶在機械壓力誘導的人氣道上皮細胞黏液分泌中的作用

李 娜1，李 琪1，尤列·皮爾曼2，維克多·科羅索夫2，周向東1*

(1.重慶醫科大學 附屬第二醫院 呼吸內科， 重慶 400010； 2.俄羅斯醫學科學院 遠東呼吸生理與病理中心， 俄羅斯 布拉戈維申斯克 675000)

目的探討黏著斑激酶(FAK)在機械壓力誘導的人氣道黏蛋白(MUC)5AC分泌中的作用。方法氣液相界面培養人支氣管上皮NHBE細胞，用Transwell壓力實驗裝置間斷性施壓于NHBE細胞，黏著斑激酶(FAK)siRNA轉染NHBE細胞，Western blot法檢測FAK和p-ERK1/2蛋白含量，實時熒光定量PCR檢測MUC5AC mRNA表達，ELISA法檢測MUC5AC蛋白相對含量。結果與空白對照組相比，機械壓力能顯著升高MUC5AC mRNA及蛋白含量及p-ERK1/2蛋白相對表達水平(均Plt;0.01)。FAK siRNA可顯著降低機械壓力所誘導的MUC5AC mRNA及蛋白含量的升高及p-ERK1/2蛋白表達(Plt;0.01)，但與轉染FAK siRNA對照組相比，機械壓力+轉染FAK siRNA組細胞表達MUC5AC mRNA及蛋白水平和p-ERK1/2蛋白相對水平仍然是增加的(Plt;0.05)，PD98059能顯著抑制機械壓力所誘導的MUC5AC mRNA及蛋白表達水平的升高(Plt;0.01)。FAK siRNA聯合AG1478作用于NHBE細胞則可顯著抑制機械壓力誘導的MUC5AC mRNA和蛋白表達(Plt;0.01)。AG1478單獨作用能有效降低由機械壓力所誘導的上述指標的升高(Plt;0.05)，但與AG1478對照組相比差異仍具有顯著性。結論機械壓力誘導的MUC5AC高表達的信號傳導通路為ERK依賴的，FAK為ERK的上游信號分子。

黏著斑激酶；機械壓力；黏蛋白類；細胞外信號調節激酶