單例先天性小耳殘耳軟骨細胞體外構建人耳廓軟骨

康 寧，劉 霞，曹誼林，肖 苒

(中國醫學科學院 整形外科醫院 研究中心， 北京 100144)

研究論文

單例先天性小耳殘耳軟骨細胞體外構建人耳廓軟骨

康 寧，劉 霞，曹誼林，肖 苒*

(中國醫學科學院 整形外科醫院 研究中心， 北京 100144)

目的探討單例先天性小耳殘耳軟骨細胞體外構建正常人大小耳廓形態組織工程軟骨的可行性。方法分離40例小耳畸形患者殘耳軟骨細胞統計細胞提取率；MTT法檢測細胞增殖能力、計算擴增效率；免疫熒光和PCR檢測不同代數細胞的軟骨表型。分別應用3例患者各自的殘耳軟骨細胞培養至P3～P4代，藻酸鹽凝膠包埋接種于正常人大小耳廓形態的聚羥基乙酸/聚乳酸支架，體外成軟骨誘導動態培養10周后行組織學染色觀察。結果耳軟骨細胞提取率為(3.90±1.27)×106/g；在增殖培養基中細胞增殖能力明顯提高，至P4代擴增(328.4±50.4)倍(Plt;0.05)；P3代細胞Ⅱ型膠原、蛋白聚糖表達顯著減弱，至P4代消失，Ⅰ型膠原表達增強；體外培養10周，實驗組形成了耳廓形態的類軟骨組織，可見典型軟骨陷窩，番紅O、甲苯胺藍及Ⅱ型膠原染色陽性；對照組明顯變形，未形成軟骨結構。結論單例先天性小耳殘耳軟骨細胞經體外擴增和動態誘導培養可在體外構建正常人大小耳廓軟骨。

先天性小耳畸形；殘耳軟骨細胞；耳廓形態軟骨；組織工程

先天性小耳畸形是整形外科涉及軟骨組織缺損的常見疾病，發病率約1.4/萬。目前治療多為自體肋軟骨移植或假體植入，但造成供區損傷或存在外露、感染等風險。應用組織工程技術構建人耳廓軟骨是組織工程向臨床應用轉化的重要研究方向之一。……